酶制剂改善玉溪低次等烟叶内在品质的初步研究

论文摘要

烟叶内在品质是决定烟叶可用性的重要基础,低次等烟的大量存在不仅占用了大量资金和场地,而且影响了烟草企业对产品的升级换代。因此如何通过生物技术提高低次等烟的内在品质是烟草产业进一步发展的重要课题。已有研究表明,在烟叶烘烤或陈化发酵过程中添加外源酶制剂能一定程度上改善烟叶化学成分,提高烟叶质量。本研究针对红塔低次等烟普遍存在的蛋白质、淀粉、纤维素含量过高的问题,通过添加外源蛋白、淀粉酶等酶制剂提高低次等烟叶提高烟叶内在品质。研究利用本实验室已初筛分离到的上百株产酶菌株进一步通过感官评吸的方法,复筛出能显著改善烟叶质量的蛋白酶P-22；淀粉酶A-7、A-8、A-9；纤维素酶C-1；并以A-8菌株为研究对象,对其发酵条件进行了优化,单位酶活力提高了2.7倍。研究还对A-7、A-8进行了100 L的发酵中试生产,所得发酵液制成酶制剂对K326B4F复烤烟叶进行处理,结果表明,经A-7、A-8酶处理四个月的复烤烟叶,烟碱含量分别降低4.8%和2.8%,而总糖和还原糖含量分别提高6.9%、2.1%和5.8%、1.7%,烟叶感官质量得到明显改善。以A-8为研究对象,对酶制剂的部分理化性质进行了研究,结果表明,该酶制剂在4～55℃都有催化活力,最适酶活温度为55℃,最适pH为7,最适底物为直链淀粉。研究表明,无论在室温及4℃保存,均不能避免酶活力的线性下降趋势,加入对羟基苯甲酸乙酯防腐剂也不能阻止酶活的下降,经30天保存后,酶活损失约30%。因此该酶制剂的保存技术仍值得进一步研究。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 第一章 绪论
• 1.1 酶技术改善烟叶品质的研究
• 1.2 酶在降低烟草危害方面的应用
• 1.3 酶与微生物在烟草中的配合应用
• 1.4 立题依据
• 第二章 改善烟叶品质生物酶的复筛及应用
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 菌株来源
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 烟叶品种
• 2.1.4 试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 酶活力测定
• 2.2.2 改善烟叶品质生物酶的复筛
• 2.2.3 改善烟叶品质产酶菌株16S rRNA鉴定
• 2.2.4 菌株保藏
• 2.2.5 不同浓度生物酶对烟叶感官质量的改善效果
• 2.2.6 商品酶对烟叶感官质量的影响
• 2.2.7 A-8菌株发酵条件优化研究
• 2.2.8 中试试验
• 2.3 实验结果
• 2.3.1 标准曲线
• 2.3.2 改善烟叶品质生物酶的复筛结果
• 2.3.3 改善烟叶品质产酶菌株的16S rRNA鉴定结果
• 2.3.4 不同浓度生物酶对烟叶感官质量的改善效果
• 2.3.5 商品酶对烟叶感官质量的影响
• 2.3.6 A-8菌株发酵条件优化结果
• 2.3.7 中试结果
• 2.4 小结与讨论
• 第三章 A-8淀粉酶制剂的性质研究
• 3.1 材料
• 3.1.1 生物酶来源
• 3.1.2 试剂
• 3.1.3 培养
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 A-8酶学性质的研究
• 3.2.2 A-8酶保存条件研究
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 A-8酶学性质研究结果
• 3.3.2 A-8酶保存条件研究结果
• 3.4 小结与讨论
• 第四章 总结与展望
• 4.1 总结
• 4.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录A 攻读硕士期间发表论文目录
• 附录B 主要试剂及其设备