贵港市人民医院检验科537100
【摘要】目的：评价四个无室间质评计划检验项目5-NT、CHE、β2-MG和CYS-C在不同实验室间测定结果的一致性。方法：选取20份血清样本，分别在2个不同实验室同时进行检测，参考GP29-2A文件采用样本分割法对日立7600-020和罗氏cobas8000两台全自动生化分析仪的检测结果的一致性进行评估。结果：5-NT、CHE、和CYS-C这三个项目在两个实验室间的检测结果一致性可接受。而β2-MG检测结果在两实验室间的一致性不被接受。结论：实验室间样本分割法可作为无室间质评计划项目检测结果一致性的评价，但仍存在一定的局限性。
【关键词】实验室间比对；样本分割法；一致性
Interlaboratorycomparisonof5-NT，CHE，β2-MGandCYS-CassayresultswhenProficiencyTestingisnotavailable
AbstractObjective：Toevaluatetheconsistencyofinterlaboratorycomparisonof5-NT，CHE，β2-MGandCYS-CassayresultswhenProficiencyTestingisnotavailable.Methods：Twentyserumsamplesweredetectedintwodifferentlaboratoriesatthesametime.Split-sampleprocedureswereusedtoevaluatetheconsistencyofassayresultsbetweenHitachi7600-020andRochecobas8000automaticbiochemicalanalyzeraccordingtoGP29-2Adocument.Results：Theconsistencyoftestresultsof5-NT，CHE，andCYS-Cwereacceptablebetweentwolaboratoriesbutnotβ2-MG.Conclusion：Split-sampleprocedurescanbeusedtoevaluatetheconsistencyofinterlaboratorycomparisonwhenProficiencyTestingisnotavailable，buttherearestillsomelimitations.
Keywordsinterlaboratorycomparisons；split-sampleprocedures；consistency
室间质量评价（ExternalQualityAssessment，EQA）也称为能力验证（ProficiencyTesting，PT），是临床实验室质量管理的重要方面。如果EQA材料中分析成分可以溯源到参考方法时，实验室就能根据参加EQA的成绩来评价方法的准确度[1]。然而，由于资金、技术等多种原因的限制，许多实验室检测项目室间质量评价的覆盖率较低。《医疗机构临床实验室管理办法》中规定：医疗机构临床实验室应当将尚未开展室间质量评价的临床检验项目与其它临床实验室的同类项目进行比对，或者用其它方法验证其结果的可靠性。根据本科室的实际情况，参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）GP29-2A文件[2]，采用实验室间样本分割法对我室没有参加室间质量评价的检测项目——5'-核苷酸酶（5-NT）、胆碱酯酶（CHE）、β2-微球蛋白（β2-MG）和胱抑素C（CYS-C）进行比对分析，对其在不同实验室的一致性进行评估分析。
1.材料与方法
1.1仪器与试剂
我室日立7600-020全自动生化分析仪作为实验仪器，玉林市第一人民医院检验科罗氏cobas8000全自动生化分析仪作为比对仪器。我科使用的试剂厂家分别为：北京利德曼生化股份有限公司（5-NT），浙江夸克生物科技有限公司（CHE）、西班牙BiosystemsS.A.公司（β2-MG）、上海科华生物工程股份有限公司（CYS-C）；参比医院使用的试剂厂家分别为：宁波美康生物科技有限公司（5-NT），罗氏公司（CHE）、北京九强生物技术股份有限公司（β2-MG）、日本积水医疗科技有限公司（CYS-C）。室内质控品均为朗道质控品。
1.2样本采集
随机选取20份在线性范围内的高、中、低三个浓度无溶血、脂血的新鲜血清样本，每份临床样本分装成2份，每份1mL。置-20℃冰箱保存，另一份标本干冰保存运送至玉林市第一人民医院检验科。标本测定前1h取出复溶，混匀，按照1~20和20~1的编号顺序各测定一次，每份样本取两次检测结果的平均值，若2次测定偏差超出5％，则取消本次结果重新测定。
1.3质量控制
格按照各实验室作业指导书（标准化操作规程）进行检测，采用试剂配套校准品进行校准，室内质控随机插入检测标本进行检测，各检测项目室内质控均在控。
1.4统计学分析
2.结果
2.1本科室与玉林市第一人民医院检验科5-NT、CHE、β2-MG、CYS-C室内质控情况见表1。
表15-NT、CHE、β2-MG、CYS-C当月室内质控情况
2.2以玉林市第一人民医院检验科检测的结果为X，以本科室检测的结果为Y，以X+D为上限，以X－D为下限做出散点图，5-NT、CHE、β2-MG、CYS-C四个项目的散点图如图1所示。CHE和CYS-C所有的点均在X±D范围，除有一点检测结果在之X±D范围之外，其余点均在X±D范围内，即95％结果在区间内。CHE、CYS-C和5-NT达到GP29-2A文件要求，可认为这三个项目在两实验室间的一致性可接受。而β2-MG散点图显示有9个点在X±D范围之外，即仅有55％结果在区间内，达不到GP29-2A文件要求，可认为β2-MG检测结果在两实验室间的一致性不被接受。
3.讨论
实验室间比对材料通常包括患者样本、相关质控品或者标准品。质控品在使用中往往存在一定的局限性，比如价格昂贵、有一定使用期限、性质不稳定、易变质等等，而且某些质控品与临床实际检测的样本存在一定的区别，因而不能完全反映标本的质量特征。使用患者样本则具有如下优点：它不依赖于常规的质量控制体系，而且能够较好地评估临床患者检测的分析前步骤，如样本采集、运输和处理等。另外，还可减少检测过程中的基质效应。对于比对的患者样本在保存及实验室间运输过程中，应注意保持其具有良好的稳定性，尽可能减少其额外变异。
本次实验比对结果显示，5-NT、CHE、和CYS-C这三个项目检测结果在玉林市第一人民医院和本院实验室间的一致性可接受。而β2-MG只有55％检测结果结果在可信区间内，其检测结果在两实验室间的一致性不被接受，可能的原因：（1）两个实验室所用检测系统不同；（2）虽然检测的方法一样，但是检测试剂并不出于同一厂家；（3）标本的运输复溶等步骤的影响。当比较检测系统与实验检测系统测定结果的一致性不在可接受的范围时，下一步我们应以下几方面考虑：①实验室重新测定或两个实验室对样本重新测定；②考虑参考实验室；③征求笫三方实验室[4]。
实验室间样本分割法方法是送样本的分割部分到其他实验室进行检测。然而分割样本只能评价实验室间的一致性及检测误差，但不能评价其正确度（如与参考测量程序进行比较后得到的偏倚），除非外部实验室使用校准的方法或参考方法或参考物质[5]。因此，要真正做好无室间质量评价计划检验项目的比对任重而道远。
参考文献：
[1]CLSI.GP27-A2：Usingproficiencytestingtoimprovetheclinicallaboratory[S].Wayne，PA，CLSI，2007.
[2]CLSI.GP29-A2：AssessmentofLaboratoryTestsWhenProficiencyTestingisNotAvailable；ApprovedGuideline——SecondEdition[S].Wayne，PA，CLSI，2008.
[3]王薇，钟堃，何法霖，等.无室间质量评价计划的临床检验项目的实验室间比对[C].北京：2012.76-81.
[4]黄永富，曹兴建.替代方法评价两种检测系统测定糖化血清蛋白结果的一致性[J].检验医学，2012，27（12）：1058-1061.
[5]中华人民共和国卫生行业标准.无室间质量评价时实验室检测评估方法[S].北京，中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会，2013.
*基金项目：贵港市科学研究与技术开发计划项目（贵科攻1305029）