论文摘要
目的:制备抗VEGF 抗体修饰免疫脂质体,检验免疫脂质体对靶细胞的特异性杀伤作用。并对免疫脂质体的量效与时效进行研究。方法:采用硫酸铵梯度载药;以葡聚糖凝胶G-50 分离脂质体与游离阿霉素(ADM)后,应用紫外分光光度计在波长为232nm 下测定脂质体的包封率;同时检测脂质体的回收率;加25%的20ml 戊二醛于阿霉素脂质体,20 分钟后透析3 小时去除游离戊二醛,加抗VEGF 抗体0.5g 过夜;以葡聚糖凝胶G-200 分离抗体与免疫脂质体,同时收集抗VEGF 抗体修饰免疫脂质体;体外研究抗VEGF 抗体修饰免疫脂质体对膀胱癌移行细胞T-24 细胞的特异性杀伤作用并以正常人淋巴细胞作为对照,以不同浓度的免疫脂质体作用于靶细胞研究量效;以同一浓度的免疫脂质体作用于细胞,在不同时间检测靶细胞的死亡率,来检测药物的时效;普通显微镜与MTT 法检测细胞用药后的存活率与死亡率。结果:硫酸铵梯度载药,其ADM 包封率为98.1 %;回收率为99%;脂质体偶连抗VEGF 单克隆抗体,以膀胱癌T-24 细胞为靶细胞,以正常人外周血淋巴细胞为对照,制备的免疫脂质体对靶细胞具有特异性杀伤作用,其细胞杀伤率(96h)达60%,而对对照细胞的杀伤率仅为8%。结论:采用硫酸铵梯度载药,所得脂质体具较高的包封率;偶联抗VEGF 抗 体于脂质体后制备成免疫脂质体,免疫脂质体对靶细胞具有特异性杀 伤作用,而对非靶细胞的杀伤作用较小。
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