动脉粥样硬化相关基因分析

论文摘要

目的 （1）研究线粒体（mtDNA）16SrRNA基因（T3200C、C3206T）和ND1基因（A4136G、A4164G和T4216C）突变在湖北汉族2型糖尿病人群中的发生率及临床意义。（2）研究糖尿病致动脉粥样硬化的机制,检测2型糖尿病患者外周血中单核细胞清道夫受体CD36的表达情况。 方法 （1）采用等位基因特异性PCR（AS—PCR）、聚合酶链反应-限制性内酶切长度多态性（PCR-RFLP）及PCR产物直接测序,对175例2型糖尿病患者和200例正常对照的线粒体基因突变进行检测,并用DNAstar、Primer、Antherprot和mfold软件对检出的突变位点进行分析,对RNA突变后最小自由能下的二级结构变化和NDI基因突变后蛋白质的二级结构改变进行预测。（2）运用双色荧光标记流式细胞术和RT-PCR技术,检测血糖控制理想（WCP）和血糖控制不良（PCP）的2型糖尿病患及非糖尿病者外周血单核细胞清道夫受体CD36的蛋白和mRNA表达情况。 结果 （1）2型糖尿病组检出3200（T→C）突变2例（1.14%）,3206（C→T）突变11例（6.28%）,4216（T→C）突变3例（1.71%）,4136位点未发现突变,并发现2个未曾报道的新突变位点4164（A→G）7例（4%）,4200（A→T）1例。对照组中检出3206（C→T）突变8例（3.92%）,4164（A→G）突变5例（2.45%）,两位点突变率在两组中比较差异无显著性（P>0.05）。RNA二级结构预测显示3200（T→C）突变引起16SrRNA基因最小自由能和二级结构的改变,可能引起疾病。4164（A→G）和4200（A→T）突变分别为Met和Leu的无义突变,4216T→C突变可使线粒体呼吸链中一个中性酪氨酸被亲水性组氨酸取代,蛋白质二级结构预测显示该突变可引起ND1蛋白质二级结构改变。（2）2型糖尿病组CD36的蛋白和mRNA表达明显高于对照组（P<0.01）,PCP组CD36的蛋白和mRNA表达比WCP组分别高出78%和36%。在PCP组和WCP组内,糖尿病性动脉粥样硬化组CD36蛋白和mRNA表达明显高于单纯糖尿病组（P<0.05）。单核细胞表面CD14分子在三组间无明显差异（P>0.05）。PCP组氧化低密度脂蛋白（oxLDL）浓度明显高于WCP组和对照组（P<0.01）,WCP组和对照组间无显著差异（P>0.05）。在WCP组和PCP组内,糖尿病性动脉粥样硬化组oxLDL浓度高于单纯糖尿病组（P<0.05）。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 一、引言
• 二、正文
• 第一部分 湖北汉族人群2型糖尿病患者线粒体基因突变的检测及临床意义
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 2型糖尿病患者清道夫受体CD36表达增加
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 英文
• 参考文献
• 三、综述
• 第一部分 载脂蛋白A5研究进展
• 正文
• 参考文献
• 第二部分 CD36抗原与糖尿病及动脉粥样硬化的关系评述
• 正文
• 参考文献
• 四、后记