于佳萍１陈震宇２沈艳丽２汪影２郑莉彦２通讯作者
１．解放军第２０２医院护理部;２．解放军第２０２医院妇产科辽宁沈阳１１０００３
【摘要】目的观察催产素(OT)对妊娠大鼠胸主动脉血管环的舒张作用并探讨其可能的机制.方法采用大鼠离体血管功能实验装置,描记张力变化,血管按随机数表分组,每组６枚血管环,分别保留或去除内皮,用阻断剂预处理３０min之后做OT舒张曲线.结果催产素不能舒张苯肾上腺素(PE)预收缩的内皮完整非孕大鼠血管环.而OT(０．１U－３．２U)浓度依赖性地舒张苯肾上腺素(PE)预收缩的内皮完整或去皮的大鼠胸主动脉环.一氧化氮合成酶抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯(LＧNAME)可抑制PE诱导的血管舒张作用(P＜０．０１);环氧合酶抑制剂吲哚美辛(Indo)对PE诱导的血管舒张作用无明显影响.结论催产素具有舒张妊娠大鼠胸主动脉血管的作用,对非孕大鼠无以上作用,其作用主要是血管内皮NO－cGMP途径实现的.【关键词】催产素;妊娠;大鼠;内皮;主动脉;平滑肌血管;一氧化氮【中图分类号】R７１９【文献标识码】B【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－０３００－０１
催产素也称(缩宫素,Oxytocin,OT)是产科的常用药物,主要用于诱发和促进妊娠子宫收缩及产后子宫复旧以减少出血.小剂量使用缩宫素对人体循环系统并无明显影响,但在短时间内大量使用则有可能使血压一过性下降并对心血管系统造成较复杂的影响,这对于机体代偿功能有限的妊娠妇女可能产生某些并发症[１]值得重视.本研究通过制备非妊娠与妊娠大鼠离体胸主动脉环灌注模型,观察催产素对离体胸主动脉环的舒张作用并探讨其可能的作用机制[２].１材料和方法
１．１实验动物雌性孕足月Wistar大鼠３O只,体重３１１±２１g;雌性非孕Wistar大鼠３０只体重２９８±２０g,均由中国医科大学动物中心提供.１．２药品与试剂乙酰胆碱(Ach)、苯肾上腺素(PE)、吲哚美辛(Indo)、四乙胺(TEA)和亚硝基左旋精氨酸甲酯(LＧNAME)购自美国Sigma公司.Ach,PE,LＧNAME和TEA均用灭菌双蒸水溶解;Indo用二甲基亚砜(DMSO)溶解.克氏(K－H)营养液含以下成份:NaCl１２０mmol/L,KCL４．５mmol/L,CaCl２１．２５mmol/L,KH２PO４１．１２mmol/L,MgSO４１．２mmol/L,葡萄糖１１．lmmol/L,NaHCO３２５mmol/L,pH调整到７．１４;无钙K－H营养液除不含CaCl２外,其余成分同K－H营养液.１．３仪器张力换能器(JZ１０１,高碑店新航机电设备有限公司);信号记录(Medlab－U－４CS,南京美易科技公司).
１．４大鼠离体胸主动脉环制备大鼠劲椎脱臼处死,迅速开胸,取胸主动脉,置于盛有K－H营养液的培养皿内,分离血管周围组织,剪成长约３mm的胸主动脉环.置于３７°C恒温浴槽中,持续通入９５％O２和５％CO２的混合气体.动脉环一端固定于浴槽底部,另一端连接张力换能器,用生物信号记录分析系统记录血管张力变化.[２]动脉环静息负荷２g,每１５min换液１次,稳定６０min,实验前以６０mmol/LKCl收缩２次,收缩良好用于实验.去内皮方法和检测:机械法去内皮,加１×１０－６mol/LAch后血管条舒张＞８０％者认为内皮完整,舒张＜１０％则认为内皮失去功能.１．５观察OT对PE预收缩的孕鼠和非孕鼠血管环张力的影响:取内皮完整大鼠胸主动脉血管环不做任何处理,加入OT(０．１－３．２U)观察OT对大鼠胸主动脉血管环张力的影响.１．６观察OT舒血管效应与内皮的关系[３]内皮完整的血管环中,主动脉稳定后,LＧNAME组:用一氧化氮合酶抑制剂LＧNAME０．１mmol/L予处理血管环３０min;吲哚美辛组:用环氧化酶抑制剂吲哚美辛１０umol/L予处理３０min．再各PE０．１umol/L予收缩血管环,观察不同浓度的OT对收缩血管的作用.对照组:以K－H液代替OT等容加入.１．７统计学方法所有数据用X±s表示,两组间比较用t检验,p＜０．０５为差异有统计学意义.
２结果２．１催产素对PE预收缩非妊娠与妊娠大鼠主动脉环张力的影响.累积加药法依次加入OT(０．１U－３．２U)PE预收缩的内皮完整非孕大鼠血管环无作用.而OT浓度依赖性地舒张预收缩的内皮完整孕足月大鼠胸主动脉环(P＜０．０１).２．２催产素对孕鼠内皮完整组与去内皮组主动脉血管环有张力作用.PE预收缩血管环后,累积加药法依次加入OT(０．１U－３．２U)对内皮完整的血管环的舒张程度明显大于去内皮组(P＜０．０１).２．３内皮拮抗剂对催产素引发的舒血管作用的影响.预先给予吲哚美辛并不能抑制OT引发的舒张血管作用(P＜０．０５).用LＧNAME孵育内皮完整的血管环后,可明显抑制OT的血管舒张作用,与未经LＧNAME处理内皮完整组相比差异有统计学意义(P＜０．０５).
３讨论催产素一直是产科临床最广泛的药物之一.由于其促进宫缩作用迅速、疗效确切、价格低廉并可经多种途径使用,因此倍受产科工作者青睐.但是,催产素对其他系统和器官的影响较复杂,尤其是对血压及循环系统的影响以往的报道[６、７]结果不一致,因此,有必要进行深入、细致的研究.本文采用妊娠与非妊娠大鼠离体胸主动脉环及血管张力换能器分别观察催产素对保留血管内皮和去内皮血管的舒张作用,探讨影响血管张力的一些因素可能的机理.本实验结果发现,催产素可浓度依赖性地引起孕鼠主动脉环的扩张,而不能舒张非孕大鼠主动脉环.且内皮完整的主动脉环的舒张效应明显大于去内皮的血管环,提示催产素只引起孕鼠的血管舒张而且这种血管舒张效应涉及到内皮依赖性和非内皮依赖性两个途径.其中内皮依赖性舒张血管途径为主要途径,其舒张血管作用的机制可能与内皮细胞释放NO、前列环素等血管舒张物质调节血管平滑肌的张力有关[８].本研究结果表明,一氧化氮合成酶阻滞剂LＧNAME可显著抑制催产素对内皮完整的主动脉环的舒张作用,说明催产素血管舒张作用主要是通过增加内皮细胞内的一氧化氮合成酶活性,使NO生成增加而作用的[９].NO激活可溶性鸟苷酸环化酶生成cGMP,cGMP在激活蛋白激酶G,进而阻止Ca＋内流和降低血管收缩成分对Ca＋的敏感性,导致血管舒张[１０].
前列环素是内皮细胞合成的另一种舒血管物质.前列环素活化平滑肌细胞膜的腺苷酸环化酶,促进ATP分解使细胞内cAMP含量升高,肌质网摄取的Ca２＋增加,胞内Ca２＋减少,抑制肌球蛋白的磷酸化,致使平滑肌舒张[１１]．本实验氧合酶抑制剂(Indo)不能明显抑制催产素对妊娠大鼠胸主动脉血管环舒张作用,提示前列环素只是催产素对妊娠足月大鼠胸主动脉血管作用的次要调节因素.即催产素的内皮依赖性血管舒张作用是通过NO－cGMP途径来实现的,只有部分通过血管平滑肌实现的.
参考文献[１]叶挺梅徐和靖,汪洋,等.菊米提取液舒张血管作用及其机制研究,中国病理生理杂志,２００７,(４):６６４－６４７．[２]孟紫强,李屹,张海飞,等二氧化硫衍生物引起大鼠血管舒张细胞信号转导途径(J)．应用与环境生物学报,２００６,１２(１):５２－５４