海洋厌氧活性菌株资源库构建及一株活性海洋细菌的鉴定

论文摘要

海洋厌氧活性菌株资源库的构建,不仅有助于探索海洋环境中药用厌氧菌的资源,扩大新物种的种类和数量,而且是海洋厌氧菌抗生素研究的前提和必要条件。海洋光合细菌和硫酸盐还原细菌是海洋厌氧菌中的两大类群。这两类菌群的形态结构和生理功能具有许多特性,它们参与新陈代谢的酶系与海洋好氧微生物有显著差异,产生的次生代谢产物理论上也会有较大的差别,因此海洋光合细菌和硫酸盐还原细菌活性菌株资源库的构建对新抗生素的筛选及新药的开发具有重要的意义。本研究目的是构建海洋光合细菌和硫酸盐还原细菌活性菌株资源库。研究内容包括:从中国黄海、渤海和东海海域采集样品;对样品中的海洋光合细菌和硫酸盐还原细菌进行富集与分离;从分离得到的菌株中筛选出具有抗菌活性的海洋厌氧菌;并对其中3株活性海洋光合细菌进行了分类特征的初步研究。此外,还对一株活性海洋细菌A01进行了鉴定。本研究最终从样品中分离到132株海洋厌氧菌,其中海洋光合细菌80株,海洋硫酸盐还原细菌52株。从分离到的116株细菌中筛选出104株具有抗菌活性的菌株。分类特征的研究结果显示,3株活性海洋光合细菌的形态特征差异显著,其中一株细菌具有黑暗中好氧生长的生理特性。海洋细菌A01的鉴定结果为,该菌株属于海洋枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),且具有种内拮抗的特性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 绪论
• 第一章 中国黄海、渤海和东海样品采集
• 1.1 材料与设备
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 样品来源
• 1.2.2 样品采集
• 1.3 采样结果
• 1.4 分析与讨论
• 本章小结
• 第二章 海洋光合细菌和硫酸盐还原细菌的富集与分离
• 2.1 材料与设备
• 2.1.1 实验试剂
• 2.1.2 实验设备及仪器
• 2.1.3 实验材料
• 2.1.4 培养基
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 菌种的富集
• 2.2.2 菌种分离
• 2.3 实验结果
• 2.3.1 富集结果
• 2.3.2 分离结果
• 2.4 分析与讨论
• 本章小结
• 第三章 活性菌株筛选
• 3.1 材料与设备
• 3.1.1 实验试剂
• 3.1.2 实验设备及仪器
• 3.1.3 实验材料
• 3.1.4 活性指示菌的培养基
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 次生代谢产物有机溶剂抽提
• 3.2.2 抗菌活性测试
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 次生代谢产物抽提结果
• 3.3.2 海洋光合细菌活性菌株的筛选结果
• 3.3.3 海洋硫酸盐还原细菌活性菌株的筛选结果
• 3.3.4 抗新型隐球菌和深红酵母菌的测试结果
• 3.3.5 三株海洋光合细菌的抗菌图谱
• 3.3.6 菌株抑菌效果图片
• 3.4 分析与讨论
• 本章小结
• 第四章 三株活性海洋光合细菌分类特征的初步研究
• 4.1 材料与设备
• 4.1.1 实验试剂
• 4.1.2 实验设备和仪器
• 4.1.3 实验材料
• 4.1.4 DNA提取所需溶液的配制
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 形态特征观察
• 4.2.2 黑暗好氧培养
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 形态特征观察结果
• 4.3.2 黑暗好氧培养结果
• 4.3.3 DNA的提取结果
• 4.4 分析与讨论
• 本章小结
• 第五章 一株活性海洋细菌的鉴定
• 5.1 材料与设备
• 5.1.1 实验试剂
• 5.1.2 实验设备和仪器
• 5.1.3 实验材料
• 5.1.4 菌株A01的培养基
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 菌株A01的分离纯化
• 5.2.2 菌株A01抗菌活性测试
• 5.2.3 形态特征观察
• 5.2.4 生理生化特征分析
• 5.2.5 遗传特性分析
• 5.3 实验结果
• 5.3.1 抗菌活性测试结果
• 5.3.2 形态特征观察结果
• 5.3.3 生理生化特征分析结果
• 5.3.4 16S rDNA基因序列测定结果
• 5.3.5 系统进化树构建结果
• 5.4 分析与讨论
• 本章小结
• 结论与展望
• 参考文献
• 附录A 分离得到的厌氧菌的菌株编号
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 致谢