低能N+诱变选育金霉素链霉菌及其发酵特性的研究

论文摘要

离子束是化学元素的离子经高能加速器加速后获得的放射线。离子注入生物效应的发现,为生物的遗传改良开辟了新途径。本文将离子束应用于金霉素链霉菌的诱变选育,对于更深入地研究离子束生物学效应,拓展离子束生物技术在工业微生物育种的应用范围有一定的意义。首先,在摇瓶条件下,对我实验室前两届研究生诱变选育得到的金霉素高产菌株的培养条件进行优化,以期能够在现有的基础上进一步提高金霉素的产量。其次,在前两届研究生对氮离子束诱变金霉素链霉菌实验室研究的基础上,用已获得的最佳剂量诱变工业生产菌种F3#,得到高产工业菌株L6-60#,摇瓶效价比对照菌株提高12.2%,且经稳定性试验和生产力的测定证明诱变菌L6-60#能够进行上罐中试试验。然后,将诱变菌L6-60#在金河集团101车间38吨发酵罐上进行生产试验。上罐结果表明:与生产对照菌相比放罐效价高697U/mL,重量增加0.83吨,种亿多39.88十亿/千克;对其产物采用高效液相色谱法测定,显示4ECTC和TC的含量均在要求范围内,能够成为工业生产用菌。同时对诱变菌株L6-60#与对照菌株F3#的发酵参数进行了跟踪测定和系统分析。最后,应用目前最先进的一种生物氮源—生物氮素部分代替金霉素发酵工艺中的蛋白胨。通过试验证明:可有效地解决金霉素发酵的生产不稳定、发酵水平低、原料价格高等缺点。

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摘要

ABSTRACT

第一章绪论

1.1 金霉素研究现状和发展趋势

1.1.1 背景及生产概况

1.1.2 金霉素的前景预测

1.1.3 金霉素链霉菌诱变选育的研究现状

1.2 微生物诱变育种方法简介

1.2.1 化学诱变

1.2.2 物理诱变

1.3 离子束生物技术与应用进展

1.3.1 离子注入与生物体相互作用

1.3.2 离子注入微生物的生物学效应

1.4 离子注入与传统辐射诱变效应的比较

1.5 离子注入微生物诱变育种的应用现状

1.6 离子注入微生物诱变育种的市场前景

1.7 本论文研究目的和内容

第二章优化金霉素实验室诱变菌的培养条件

2.1 前言

2.2 实验材料与方法

2.2.1 菌种

2.2.2 装液量（溶氧）对效价的影响

2.2.3 接种量对效价的影响

2.2.4 转速对效价的影响

2.2.5 pH值对效价的影响

2.2.6 温度对效价的影响

2.3 实验结论

2.3.1 装液量（溶氧）对效价的影响

2.3.2 接种量对效价的影响

2.3.3 转速对效价的影响

2.3.4 pH值对效价的影响

2.3.5 温度对效价的影响

2.4 讨论

+诱变选育工业金霉素生产菌'>第三章低能N⁺诱变选育工业金霉素生产菌

3.1 前言

3.2 实验材料与方法

3.2.1 菌种

3.2.2 出发菌株系谱

3.2.3 主要仪器

3.2.4 主要试剂

3.2.5 常规培养基

3.2.6 生产力的测定

3.2.7 实验方法

3.2.8 数据分析方法

3.2.9 出发菌株的筛分

3.2.10 高产菌株的遗传稳定性

3.2.11 氮离子注入诱变方法

3.2.12 工艺流程

3.2.13 发酵效价测定

3.3 结果和讨论

3.3.1 CTC效价标准曲线的绘制

+注入金霉素链霉菌的诱变效果'>3.3.2 低能N⁺注入金霉素链霉菌的诱变效果

+注入对金霉素链霉菌菌落形态的影响'>3.3.3 N⁺注入对金霉素链霉菌菌落形态的影响

3.3.4 摇瓶结果的分析及统计

3.4 讨论

第四章工业金霉素诱变菌罐式试验及发酵特性的研究

4.1 前言

4.2 饲用金霉素生产设备的工艺流程简图

4.3 饲用金霉素的生产工艺流程

4.4 材料和方法

4.4.1 金霉素发酵工艺配方

4.4.2 培养方法

4.4.3 中间体的质量标准和检验方法

4.4.4 高效液相色谱法测定金霉素含量

4.4.5 分析方法

4.5 实验结果与分析

4.5.1 上罐试验

4.5.2 t-检验

4.5.3 高效液相色谱法测定金霉素含量

4.5.4 种子培养液的参数测定

4.5.5 发酵液参数的测定

4.6 讨论

第五章生物氮素替代蛋白胨的研究

5.1 前言

5.2 材料及实验方法

5.2.1 仪器

5.2.2 材料

5.2.3 摇瓶试验考察生物氮素对发酵单位的影响并选择最佳比例

5.3 结果和讨论

5.3.1 摇瓶试验结果

5.3.2 罐试试验结果

5.4 结论

第六章结论与展望

6.1 结论

6.2 展望

参考文献

致谢

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