本文主要研究内容
作者徐娜（2019）在《尖顶羊肚菌多糖提取、结构分析和抑制氧化应激损伤作用的研究》一文中研究指出：羊肚菌是一种营养价值丰富,珍贵稀少,医用价值高的食用菌和药用菌。具有独特的风味和形态,在功能性食品,中药,保健品等领域备受关注。羊肚菌中含有很多生物活性物质,包括多糖,蛋白质,脂肪,矿物元素,膳食纤维等。其中,羊肚菌中多糖是含量最多并且具有多种生物活性的营养成分,其生物活性包括抗氧化特性,免疫调节活性,保肝活性和抗肿瘤活性等。羊肚菌多糖多由传统提取方法进行提取,比如,热水浸提法。但热水浸提法具有温度高,提取时间长,消耗更多能源的缺点,需要新型提取方法进行替代,本文采用超声微波协同提取法（UMSE）对羊肚菌多糖进行提取。此外,虽然有研究表明羊肚菌粗多糖的抗氧化性,但是对纯化后的羊肚菌多糖的抗氧化性和抑制氧化应激损伤的作用很少进行深入研究。本文对尖顶羊肚菌子实体纯多糖的分子结构和抗氧化活性进行了系统研究,主要研究的内容和结论如下:（1）尖顶羊肚菌多糖超声微波协同提取法工艺条件的优化和其他提取方法的比较。经过单因素试验,响应面Box-Behnken设计对试验进行优化,羊肚菌粗多糖（MCP）提取过程条件优化的最佳工艺条件如下:微波功率为211 w,液料比为41:1,提取时间为127 s。由UMSE,超声波提取法（UAE）和微波提取法（MAE）三种方法提取羊肚菌多糖的平均提取率分别为7.53±0.17%,6.62±0.08%,5.86±0.03%。UMSE相比于UAE和MAE,具有最大的羊肚菌多糖提取率。在羊肚菌提取液分析中,UMSE的提取液比其他两种提取方法具有更高的浊度值,溶液颜色更深。表明UMSE比UAE和MAE的提取液具有更多的溶出物。在羊肚菌残渣分析中,用扫描电子显微镜（SEM）观察羊肚菌菌丝的微观形态发现经过UAE只呈现出菌丝的裂痕特征,MAE呈现出菌丝的孔洞特征,并且都能分辨出菌丝的大致形态,但经UMSE处理后的羊肚菌菌丝完全破碎,完全分辨不出菌丝的轮廓,并且结合MAE和UAE的的特点,菌丝呈现出既有多孔结构又有裂痕的特征。表明UMSE对羊肚菌菌丝的破碎程度更大。（2）羊肚菌多糖组分的体外抗氧化评价和羊肚菌粗糖对氧化应激损伤保护作用的初步研究。羊肚菌多糖经纤维素DEAE-52离子交换柱分离出两个组分,分别为酸性多糖（AMCP）和中性多糖（NMCP）,将NMCP经Sephadex G100凝胶柱纯化后分离出NMCP-1与NMCP-2两种组分。对MCP,NMCP-1,NMCP-2的体外抗氧化活性进行评价,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除活性,亚铁离子螯合作用,还原力试验,抑制亚油酸自动氧化能力试验。在这四组试验中,抗氧化活性最强的是NMCP-2,其次是NMCP-1,最后是MCP。对MCP进行氧化细胞保护作用试验结果表明。MCP加入H2O2处理的细胞后,能显著抑制细胞内H2O2引起的脂质氧化,当MCP增加到50μg/mL时,丙二醛（MDA）含量显著降低到5.10±0.45 nmol/mg。MCP能够增加细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）的活性。当MCP浓度到达50μg/mL时,酶活性为40.4±3.8 U/mg。（3）NMCP-2对保护氧化应激损伤HEK-293T细胞的作用效果的研究。NMCP-2能显著降低H2O2诱导的氧化应激细胞中ROS的产生,能显著降低细胞内线粒体膜电位（MMP）水平,明显减少H2O2诱导产生的细胞凋亡,并且线粒体的透射电镜图显示,NMCP-2明显改善由H2O2诱导的HEK-293 T细胞产生的线粒体嵴破裂或缺失。显著降低H2O2处理的细胞中促凋亡因子Caspase-9,Bax,Caspase-3的mRNA表达以及升高抗凋亡因子Bcl-2 mRNA的表达水平。并且显著降低H2O2处理的细胞中Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平,而Bcl-2的表达进一步升高。由此可确定,NMCP-2处理H2O2诱导的HEK-293T细胞后,细胞内部促进细胞凋亡的蛋白表达量减少,抑制细胞凋亡的蛋白表达量进一步增加,细胞的氧化应激受到抑制。（4）NMCP-2的一级结构的鉴定。采用液相色谱,气相色谱,红外光谱,核磁共振的检测方法,对NMCP-2的结构进行分析。NMCP-2相对平均分子量为48.3 kDa,且由甘露糖,葡萄糖,半乳糖和木糖组成,摩尔比为3.35:19.57:1.00:3.14。NMCP-2由7个单糖残基组成,分别为→4)-α-D-Glup-（1→,→6）-α-D-Glup-（1→,→4,6）-α-D-Glup-（1→,α-T-Manp,→3）-β-Manp-（1→,→4）-β-D-Xylp-（1→和→4）-β-D-Galp-（1→。NMCP-2是以α吡喃葡萄糖残基为主链,并有少量β吡喃半乳糖,木糖残基存在于主链;α甘露糖位于糖链的末端;→4,6）-α-D-Glup-(1→为糖链的分支点。本研究为尖顶羊肚菌多糖的开发,分子结构的研究和抑制氧化应激的凋亡作用的研究提供了理论基础。
Abstract
yang du jun shi yi chong ying yang jia zhi feng fu ,zhen gui xi shao ,yi yong jia zhi gao de shi yong jun he yao yong jun 。ju you du te de feng wei he xing tai ,zai gong neng xing shi pin ,zhong yao ,bao jian pin deng ling yu bei shou guan zhu 。yang du jun zhong han you hen duo sheng wu huo xing wu zhi ,bao gua duo tang ,dan bai zhi ,zhi fang ,kuang wu yuan su ,shan shi qian wei deng 。ji zhong ,yang du jun zhong duo tang shi han liang zui duo bing ju ju you duo chong sheng wu huo xing de ying yang cheng fen ,ji sheng wu huo xing bao gua kang yang hua te xing ,mian yi diao jie huo xing ,bao gan huo xing he kang zhong liu huo xing deng 。yang du jun duo tang duo you chuan tong di qu fang fa jin hang di qu ,bi ru ,re shui jin di fa 。dan re shui jin di fa ju you wen du gao ,di qu shi jian chang ,xiao hao geng duo neng yuan de que dian ,xu yao xin xing di qu fang fa jin hang ti dai ,ben wen cai yong chao sheng wei bo xie tong di qu fa （UMSE）dui yang du jun duo tang jin hang di qu 。ci wai ,sui ran you yan jiu biao ming yang du jun cu duo tang de kang yang hua xing ,dan shi dui chun hua hou de yang du jun duo tang de kang yang hua xing he yi zhi yang hua ying ji sun shang de zuo yong hen shao jin hang shen ru yan jiu 。ben wen dui jian ding yang du jun zi shi ti chun duo tang de fen zi jie gou he kang yang hua huo xing jin hang le ji tong yan jiu ,zhu yao yan jiu de nei rong he jie lun ru xia :（1）jian ding yang du jun duo tang chao sheng wei bo xie tong di qu fa gong yi tiao jian de you hua he ji ta di qu fang fa de bi jiao 。jing guo chan yin su shi yan ,xiang ying mian Box-Behnkenshe ji dui shi yan jin hang you hua ,yang du jun cu duo tang （MCP）di qu guo cheng tiao jian you hua de zui jia gong yi tiao jian ru xia :wei bo gong lv wei 211 w,ye liao bi wei 41:1,di qu shi jian wei 127 s。you UMSE,chao sheng bo di qu fa （UAE）he wei bo di qu fa （MAE）san chong fang fa di qu yang du jun duo tang de ping jun di qu lv fen bie wei 7.53±0.17%,6.62±0.08%,5.86±0.03%。UMSExiang bi yu UAEhe MAE,ju you zui da de yang du jun duo tang di qu lv 。zai yang du jun di qu ye fen xi zhong ,UMSEde di qu ye bi ji ta liang chong di qu fang fa ju you geng gao de zhuo du zhi ,rong ye yan se geng shen 。biao ming UMSEbi UAEhe MAEde di qu ye ju you geng duo de rong chu wu 。zai yang du jun can zha fen xi zhong ,yong sao miao dian zi xian wei jing （SEM）guan cha yang du jun jun si de wei guan xing tai fa xian jing guo UAEzhi cheng xian chu jun si de lie hen te zheng ,MAEcheng xian chu jun si de kong dong te zheng ,bing ju dou neng fen bian chu jun si de da zhi xing tai ,dan jing UMSEchu li hou de yang du jun jun si wan quan po sui ,wan quan fen bian bu chu jun si de lun kuo ,bing ju jie ge MAEhe UAEde de te dian ,jun si cheng xian chu ji you duo kong jie gou you you lie hen de te zheng 。biao ming UMSEdui yang du jun jun si de po sui cheng du geng da 。（2）yang du jun duo tang zu fen de ti wai kang yang hua ping jia he yang du jun cu tang dui yang hua ying ji sun shang bao hu zuo yong de chu bu yan jiu 。yang du jun duo tang jing qian wei su DEAE-52li zi jiao huan zhu fen li chu liang ge zu fen ,fen bie wei suan xing duo tang （AMCP）he zhong xing duo tang （NMCP）,jiang NMCPjing Sephadex G100ning jiao zhu chun hua hou fen li chu NMCP-1yu NMCP-2liang chong zu fen 。dui MCP,NMCP-1,NMCP-2de ti wai kang yang hua huo xing jin hang ping jia ,cai yong 1,1-er ben ji -2-san xiao ji ben jing （DPPH）zi you ji qing chu huo xing ,ya tie li zi ao ge zuo yong ,hai yuan li shi yan ,yi zhi ya you suan zi dong yang hua neng li shi yan 。zai zhe si zu shi yan zhong ,kang yang hua huo xing zui jiang de shi NMCP-2,ji ci shi NMCP-1,zui hou shi MCP。dui MCPjin hang yang hua xi bao bao hu zuo yong shi yan jie guo biao ming 。MCPjia ru H2O2chu li de xi bao hou ,neng xian zhe yi zhi xi bao nei H2O2yin qi de zhi zhi yang hua ,dang MCPzeng jia dao 50μg/mLshi ,bing er quan （MDA）han liang xian zhe jiang di dao 5.10±0.45 nmol/mg。MCPneng gou zeng jia xi bao nei gu guang gan tai guo yang hua wu mei （GSH-px）de huo xing 。dang MCPnong du dao da 50μg/mLshi ,mei huo xing wei 40.4±3.8 U/mg。（3）NMCP-2dui bao hu yang hua ying ji sun shang HEK-293Txi bao de zuo yong xiao guo de yan jiu 。NMCP-2neng xian zhe jiang di H2O2you dao de yang hua ying ji xi bao zhong ROSde chan sheng ,neng xian zhe jiang di xi bao nei xian li ti mo dian wei （MMP）shui ping ,ming xian jian shao H2O2you dao chan sheng de xi bao diao wang ,bing ju xian li ti de tou she dian jing tu xian shi ,NMCP-2ming xian gai shan you H2O2you dao de HEK-293 Txi bao chan sheng de xian li ti ji po lie huo que shi 。xian zhe jiang di H2O2chu li de xi bao zhong cu diao wang yin zi Caspase-9,Bax,Caspase-3de mRNAbiao da yi ji sheng gao kang diao wang yin zi Bcl-2 mRNAde biao da shui ping 。bing ju xian zhe jiang di H2O2chu li de xi bao zhong Baxhe Cleaved Caspase-3dan bai biao da shui ping ,er Bcl-2de biao da jin yi bu sheng gao 。you ci ke que ding ,NMCP-2chu li H2O2you dao de HEK-293Txi bao hou ,xi bao nei bu cu jin xi bao diao wang de dan bai biao da liang jian shao ,yi zhi xi bao diao wang de dan bai biao da liang jin yi bu zeng jia ,xi bao de yang hua ying ji shou dao yi zhi 。（4）NMCP-2de yi ji jie gou de jian ding 。cai yong ye xiang se pu ,qi xiang se pu ,gong wai guang pu ,he ci gong zhen de jian ce fang fa ,dui NMCP-2de jie gou jin hang fen xi 。NMCP-2xiang dui ping jun fen zi liang wei 48.3 kDa,ju you gan lou tang ,pu tao tang ,ban ru tang he mu tang zu cheng ,ma er bi wei 3.35:19.57:1.00:3.14。NMCP-2you 7ge chan tang can ji zu cheng ,fen bie wei →4)-α-D-Glup-（1→,→6）-α-D-Glup-（1→,→4,6）-α-D-Glup-（1→,α-T-Manp,→3）-β-Manp-（1→,→4）-β-D-Xylp-（1→he →4）-β-D-Galp-（1→。NMCP-2shi yi αbi nan pu tao tang can ji wei zhu lian ,bing you shao liang βbi nan ban ru tang ,mu tang can ji cun zai yu zhu lian ;αgan lou tang wei yu tang lian de mo duan ;→4,6）-α-D-Glup-(1→wei tang lian de fen zhi dian 。ben yan jiu wei jian ding yang du jun duo tang de kai fa ,fen zi jie gou de yan jiu he yi zhi yang hua ying ji de diao wang zuo yong de yan jiu di gong le li lun ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自吉林大学的徐娜，发表于刊物吉林大学2019-06-25论文，是一篇关于羊肚菌多糖论文,超声微波协同提取论文,抗氧化性论文,氧化应激论文,分子结构论文,吉林大学2019-06-25论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自吉林大学2019-06-25论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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