先天性肌性斜颈胸锁乳突肌中凋亡蛋白Caspase-4、Caspase-3的表达及术后随访分析

论文摘要

第一部分先天性肌性斜颈胸锁乳突肌中凋亡蛋白Caspase-4、Caspase-3的表达及临床意义目的探讨凋亡蛋白Caspase-4、Caspase-3在先天性肌性斜颈胸锁乳突肌中的表达,推测其在该病病理变化中的作用和临床意义,探讨其细胞凋亡的可能机制。方法选取深圳市儿童医院斜颈专科门诊2005-2010年接诊,经临床和病理确诊的73例先天性肌性斜颈患儿。HE染色观察先天性肌性斜颈胸锁乳突肌的基本病理变化。Masson胶原染色观察先天性肌性斜颈胸锁乳突肌纤维化程度,每张切片在10×10倍光镜下摄片,利用ImagePro-6.0彩色图像分析系统,以5个视野的胶原纤维/（肌纤维+胶原纤维）均值为每张切片的纤维化程度的面积百分比,将CMT分为①30%～≤50%组,②50%～≤70%组,③>70%组。按年龄将CMT分为CMT为①3月～≤6月组；②6月～≤12月组;③1岁～≤3岁组;④3岁～≤11岁组。免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶连结（S-P）法观察不同年龄组及纤维化组SCM内Caspase-4及活化型Caspase-3蛋白的表达。结果本组年龄的分布,①3月～≤6月组18例;②6月～≤12月组30例；③1岁～≤3岁组16例；④3岁～≤11岁组9例；纤维化程度分布,①30%～≤50%组13例,②50%～≤70%组27例,③>70%组33例。HE染色基本病理变化为,间质增生及纤维化,胸锁乳突肌被致密纤维组织所替代,部分细胞核染色深,肌细胞变性。Masson染色显示病变组织中胶原大量增生,所有病变组织均见大片状增生纤维组织,部分标本可见呈束状的纤维组织,纤维化程度不一；①3月～≤6月组0.79±0.10,②6月～≤12月组0.65±0.17,③1岁～≤3岁组0.69±0.16,④3岁～≤11岁组0.67±0.15,各组之间差异具有显著性（四组之间p<0.05,①②组间p<0.005,①③组间p<0.005,①④组间p<0.005,②③组间p>0.05,②④组间p>0.05,③④组间p>0.05,单因素方差分析,见表1）。免疫组化染色,活化型Caspase-3在不同年龄组分别表达为,①3月～≤6月组为11.46±1.75,②6月～≤12月组为10.33±6.01,③1岁～≤3岁为8.75±2.84,④3岁～≤11岁组为5.13±3.07,各组之间差异具有显著性（四组之间p<0.05,①②组间p>0.005,①③组间>0.005,①④组间p<0.005,②③组间p>0.005,②④组间p<0.005,③④组间p>0.005,单因素方差分析,见表2）；各纤维化程度分组活化型caspase-3阳性表达不同,①30%～≤50%组6.46±3.18,②50%～≤70%组7.67±3.70,③>70%组11.10±4.11,各组之间差异具有显著性（三组之间p<0.05,①②组间p>0.01,①③组间p<0.01,②③组间p<0.01,单因素方差分析,见表3）。Caspase-4阳性细胞在各年龄分组表达不同,①3月～≤6月组8.97±5.02,②6月～≤12月组14.34±5.29,③1岁～≤3岁9.02±4.37,④3岁～≤11岁组7.94±2.71,四组之间比较差异具有显著性（四组之间p<0.05,①②组间p<0.005,①③组间p>0.005,①④组间p>0.005,②③组间p<0.005,②④组间p<0.005,③④组间p>0.005,单因素方差分析,见表2）；Caspase-4阳性细胞在各纤维化程度分组表达不同,①30%～≤50%组9.93±3.49,②50%～≤70%组10.76±3.42,③>70%组11.84±4.65,三组之间差异具有显著性（三组之间p<0.05,①②组间p>0.01,①③组间p<0.01,②③组间p>0.01,单因素方差分析,见表3）。结论1、CMT小年龄及大年龄患儿间质增生或纤维化重,在一岁内的患儿间质增生或纤维程度可随年龄逐渐减轻,大于一岁间质增生或纤维化程度随年龄增加而逐渐加重。2、CMT的SCM组织中细胞存在凋亡,是间质细胞,肌细胞或卫星细胞,可能以间质细胞凋亡为主。细胞凋亡随着年龄的增加而减少,随间质增生或纤维化程度加重而增加,大年龄患儿间质细胞的持续存在可能是CMT不愈的原因。显示随纤维化程度的加重,可能肌细胞或肌卫星细胞凋亡有逐渐加重的趋势。3、CMT的SCM组织中不同细胞可能存在不同凋亡的途径。Caspase依赖性途径可能为细胞的凋亡途径之一。内质网途径可能为肌细胞或肌卫星细胞凋亡途径之一第二部分先天性肌性斜颈患儿的术后随访分析目的对先天性肌性斜颈术后头颈部功能及美容效果的改善情况进行评价。方法采集自2005年至2010年在深圳市儿童医院就诊,并最终经临床和病理确诊的73例婴幼儿先天性肌性斜颈患儿,术后通过门诊及电话进行了（自诊断明确时起）1年至5年的随访,对先天性肌性斜颈术后颈部功能及头面部美容效果观察,制定术后颈部功能及美容恢复及病史的资料调查表,详细记录并收集患者术后的恢复情况资料,按Cheng疗效评分标准对其进行评价,评估婴幼儿先天性肌性斜颈患儿术后疗效。对其行病史资料做回顾性分析。结果得到65例先天性肌性斜颈患儿的术后随访资料,其中男43例,女22例。发病年龄为3月-11岁,中位年龄11月。13例在3月～≤6月间手术,29例在6月～≤12月组间手术,17例在1岁～≤3岁之间手术,6例在3岁～≤11岁之间手术。本组65例随访2-5年,平均4年。优51例（78.4%）,良6例（9.2%）,一般8例（12.3%）,术后再复发率为0%；65例CMT按手术时年龄分3个年龄组,①3月～≤12月组42例,优37例（88%）,良2例（4.7%）,一般3例（7%）劣0例,术后再复发率为0%。②1岁～≤3岁组17例,优12例（71%）,良3例（17.6%）,一般2例（11%）,劣0例,术后再复发率为0%。③3～≤11岁6例,优2例（33%）,良1例（16.7%）,一般3例（50%）,劣0例,术后再复发率为0%(不同年龄组之间比较,p<0.05；组间比较①与②组比较,P>0.05；①与③组比较,P<0.01；②与③组比较,P>0.05。结论胸锁乳突肌切断及部分切除术是治疗先天性肌性斜颈的可靠方法。大部分患儿术后可取得了良好的疗效,大年龄患儿也可取得一定的疗效。保守治疗效果不佳的小年龄的先天性肌性斜颈患儿可早期进行手术治疗,有助于改善CMT的预后。

论文目录

• 英文缩略语
• 摘要
• Abstract
• 第一部分
• 前言
• 实验材料
• 研究内容
• 实验方法
• 统计分析
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分
• 前言
• 材料与方法
• 统计学方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 附录