马芳洁(江苏省扬中市人民医院医院检验科212200)
【中图分类号】R446.12【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)16-0071-03
【摘要】目的分析IQ-200尿沉渣分析仪检测尿有形成分的影响因素,寻找导致其结果误判的原因及解决对策。方法采用IQ-200尿沉渣分析仪和尿沉渣镜检对600例临床尿液标本进行检测,对尿中RBC、WBC、CAST、上皮细胞等检测结果进行比较,分析引起IQ-200尿沉渣分析仪结果误判的原因,建立复核标准。结果IQ-200尿沉渣分析仪检测红细胞假阳性率为20.9%,白细胞假阳性率为11.3%,上皮细胞假阳性率为8.2%,管型假阳性率、假阴性率分别为24.5%、3.5%,结晶假阳性率为8.7%。一定量的结晶、细菌和酵母样菌易被仪器误报告为红细胞,小圆上皮细胞、大量细菌和非晶形结晶是引起白细胞误判的主要原因,黏液丝是引起管型误判的最主要原因。讨论多种因素可以影响尿沉渣分析仪对尿液有形成分的检测结果,因此应用IQ-200尿沉渣分析仪检测尿液有形成分只能作为一种初步筛查方法,当尿液病理成分检测结果提示增多,同时上述干扰成分亦呈阳性或增多时,尿沉渣镜检十分重要。
【关键词】IQ-200尿沉渣分析仪尿沉渣镜检结果误判
前言
尿沉渣检查是检测尿液有形成分的主要手段,对诊断肾脏疾病的病情进展和预后判断具有极其重要的意义,也是对泌尿系统疾病做出诊断和鉴别的主要方法之一。尿沉渣检查又称尿有形成分检查,尿液有形成分检查经典的方法是在显微镜下进行人工判别。人工镜检最大的问题是速度慢,在当前临床检查的尿液标本不断增加的大医院,每份尿都进行人工镜检难以做到。
近些年,随着检验技术的飞速发展,全自动的尿沉渣分析仪逐渐在各大医院检验科中得以应用。由于全自动尿沉渣分析仪去除了繁琐的离心方法,具有操作规范化、检测的自动化、速度快、重复性好、一次可以检测多个参数等优点,被临床广泛应用。我院引进了IQ-200全自动尿沉渣分析仪,其采用数字成像和自动粒子识别(APRTM)软件来分类和定量12大类尿液有形成分。其定量报告包括:红细胞、白细胞、透明管型、病理管型、鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细胞、细菌、结晶和精子等,可同时给出直观、清晰的各种有形成分的图像信息。但由于尿液成分的多样性、复杂性以及仪器本身检测的局限性,常导致某些检测项目存在一定程度的结果误判,即假阳性、假阴性。如果不予以及时发现和纠正将会误导临床对疾病的诊断和治疗[1]。因此,我们将IQ-200尿沉渣分析仪与显微镜镜检法的检测结果进行对比观察,统计仪器的误判率,分析IQ-200检测结果的影响因素,提出结果误判的解决对策,确定复检标准,对保证检验结果的准确性具有重要价值。
1材料和方法
1.1标本来源
标本来自苏大附二院住院患者,用一次性清洁尿杯采集晨尿共900例。
1.2仪器与试剂
1.2.1仪器、器材
IRISIQ-200全自动尿沉渣分析仪,OLYMPUS显微镜,离心机,尿沉渣离心管,玻片、盖玻片等。
1.2.2试剂
IQ-200使用原装试剂,阳性质控物,阴性质控物,校准物和调焦物。
1.3方法
1.3.1IQ-200检测
IQ-200尿沉渣分析仪按仪器操作规程要求进行操作,每日工作前对IQ-200分析仪进行Focus调焦并同时运行阴性、阳性质控(仪器配套),质控后进行标本的检测(共600例),记录各有形成分的测定值。
1.3.2显微镜检测
取另一管尿液标本,以相对离心力400g离心5min,然后手持离心管45~90°吸弃上清液,保留0.2mL沉渣量,轻轻摇匀,用一次性滴管取1滴(20μL)置于清洁载玻片上,加盖玻片,于高倍镜下连续计数至少10个视野中红、白细胞、上皮细胞数,于低倍镜下连续计数至少20个视野中管型数,分别取其平均值,所有操作在2h内完成[2]。
1.3.3计算、分析
根据两种方法的测定结果,统计IQ-200检测各有形成分的假阳性率、假阴性率。对尿沉渣分析仪法与显微镜法测定结果不符的标本,再用显微镜复查尿沉渣,分析影响仪器检测尿液有形成分的影响因素,建立IQ-200复检标准。
1.3.4统计复检率
另随即抽取300份住院患者的尿液标本,用IQ-200尿沉渣分析仪进行分析,根据以上所建立的复检标准,统计IQ-200检测尿液有形成分的复检率。
2结果
2.1参考值范围
(1)IQ-200由Iris公司提供:RBC0~17/μl,WBC0~28/μl,透明管型0~1/μl,鳞状上皮0~28/μl,高于此范围视为阳性。(2)尿沉渣镜检结果参照《全国临床检验操作规程》[2];RBC0~3个/HP,WBC0~5个/HP,管型0~偶见/LP。阳性结果以显微镜法为标准,即IQ-200判为阳性,而镜检为阴性的则认为是假阳性,IQ-200判为阴性,而镜检为阳性的则认为是假阴性。
2.2IQ-200与显微镜法检测结果的对比分析
IQ-200尿沉渣分析法和显微镜法对300例临床尿液标本尿沉渣检测结果见表1。由表1可见,IQ-200检测各有形成分存在着一定的结果误判,红细胞、白细胞、管型、上皮细胞的假阳性率分别为20.9%、11.3%、24.5%、8.2%。其中管型的假阳性率最高,其次为红细胞、白细胞、上皮细胞;仪器检测的假阴性率较低,但管型的假阴性率最高,容易漏检。
表1IQ-200尿沉渣分析仪检测结果的误判率
2.3尿沉渣分析仪假阳性、假阴性标本的原因分析
IQ-200、UF-1000尿沉渣分析仪假阳性、假阴性的标本,再用显微镜法复查尿沉渣,结果见表2。
表2IQ-200检测600例尿液标本产生假阳性、假阴性的影响因素
2.4结果误判的解决对策、复核标准的建立
IQ-200尿沉渣分析仪:(1)当仪器测定与干化学检测结果不一致时,镜检解决RBC和WBC的假阳性、管型的假阴性问题;(2)人工修饰应浏览所有图片包括NCLS库,当出现可疑成分应显微镜观察后报告;(3)对于未分类成分中有大量异形红细胞和草酸钙结晶时定量不准确,需人工镜检;(4)由于管型数量少,且受拍摄图片的有限易漏检,或者只能拍到管型的某个片段,且形态不宜辨认,因此对于所有图片中有类管型的物质必须人工镜检后报告;(5)对于所有图片中见到非鳞上皮及不能确定的成分时均应镜检;(6)对于高浓度标本,由于大量结晶、杂质的干扰导致计数不准确,应镜检后以显微镜结果报告。
2.5复检率
按照以上标准,IQ-200尿沉渣分析仪的复检率为27.3%(82/300)。
3讨论
目前全自动尿沉渣分析仪中美国的YellowIRIS尿沉渣分析技术,IRISiQ200是其最新型,其主要特点是采用高速频闪光源(stroboscopiclamp)(24次/s)和电视摄像(videocamera)的光学系统,每个检测标本由动力学液流进样到一个流动的标本室,在位相差显微镜下,由数码相机拍摄500个高倍视野照片,再由计算机进行图像分析等技术,对尿中有形成分的大小、对比度、形状、质地特征进行提取,运用形态识别软件和网络技术进行有形成分的分类和定量报告。每种成分均可在荧光屏上显示其形态,并可任意选取可疑的成分进行人工复核,是一种全新的分析技术,国外文献近几年对其性能及检测结果均有较高评价[3-5]。IQ-200尿液分析仪检测时尿液无需离心,可以实现尿液分析的全自动化和标准化,具有高效、简便快速、无携带污染和结果较为准确的性能。然而,IQ-200尿沉渣分析仪仍存在一些不足。对杂质含量较少的标本其分析结果均比较准确,但对含杂质多,如结晶、非结晶型盐类多的标本,其出现假阳性的比例比较高[6]。IQ-200测定尿液有形成分时有诸多的影响因素,现分析如下:
3.1红细胞的检测
IQ-200尿沉渣分析仪红细胞的假阳性通常由脱落的霉菌孢子、圆形草酸钙结晶、细菌引起。特别是尿液放置时间过久后,草酸钙结晶会呈哑铃型,其形态与RBC形态很相似,此时一定要仔细审核红细胞的分类图像。由于小圆形草酸钙结晶、脱落的霉菌孢子、细菌和酵母菌的大小、对比度及材质和RBC类似,自动微粒识别软件分析时得不到准确的信息,即使是人工审核修饰以后,由于图像清晰度的限制仍可能导致RBC的结果假阳性。IQ-200检测阴性而尿沉渣镜检阳性的标本,由于大量异形RBC会漏检到未分类成分中,而引起假阴性。
3.2白细胞的检测
IQ-200检测时,肾小管上皮细胞、裸核EC、盐类结晶的析出,精子、滴虫等可造成WBC假性增高。由于白细胞与肾小管上皮细胞的大小、核物质含量相似,仪器进行荧光流式细胞分析时难以将其区分,因此会影响白细胞的检测。检测假阴性的标本可能是由于不典型WBC的存在,即使经过人工修饰仍不能辨别;此外低浓度的标本,经镜检发现有少量的白细胞团和散在的几个白细胞,由于IQ-200拍摄图片过少而造成假阴性。
3.3管型的检测
由表1可知,IQ-200检测管型的假阳性率较假阴性率高。IQ-200会将尿中黏液丝、包裹的上皮细胞、类管型物质误认为管型,由于仪器对这些物质的形态大小分析不准而误认为是管型,引起假阳性。IQ-200存在管型的漏检,因为仪器拍摄的图片数量有限,对于低浓度标本含管型的数量少,受拍摄面积的局限就不一定能拍摄到管型成分,或者只能拍到管型的某个片段,人工修饰时形态不宜辨认就会漏检,所以假阴性较高,本文假阴性率达3.5%,漏检率达32.2%。
3.4上皮细胞的检测
IQ-200检测上皮细胞的误判率较低,该仪器只能分类鳞状上皮与非鳞状上皮,对于异形上皮、肾小管上皮等却不能分类,由于图像不清晰导致肾小管上皮、异形上皮难以准确辨认,引起结果误判。因此在图像中见到类小圆的上皮细胞就应该对NCLS库中图像编辑审核,进行显微镜复检,以防漏检。
3.5结晶的检测
IQ-200对于结晶的检测结果的假阳可能由于杂质的存在,图像不清晰而误判为结晶;其假阴性见于少量的小圆形草酸钙结晶被分类到红细胞成分中,或者由于拍摄的图片量有限而漏检。
综上所述,尽管IQ-200尿液分析仪能快速、准确地测定尿中的多项参数,但因尿中有形成分种类较多、形态差异,仪器自身原理的局限性,标本的采集、处理等因素均影响尿中有形成分的测定。IQ-200尿沉渣分析仪优点是能给出直观的尿液有形成分的图片,一定程度上可以取代显微镜观察,人工还能对结果进行审核修饰从而提高结果的准确性。该仪器主要不足是图像不够清晰容易导致形态的误认;只能拍摄五百张图片容易造成低浓度标本的漏检,因此管型的漏检率比较高。IQ-200除了有些结晶和霉菌容易被误认为红细胞以外,像肿瘤细胞、胱氨酸和酪氨酸结晶、脂肪滴或药物结晶以及各类管型的分型等还是需要依靠人工镜检[3-5]。多种因素可以影响尿沉渣分析仪对尿液有形成分的检测结果,因此应用IQ-200尿沉渣分析仪检测尿液有形成分只能作为一种初步筛查方法,当尿液病理成分检测结果提示增多,同时上述干扰成分亦呈阳性或增多时,尿沉渣镜检十分重要。我们应严格执行本文提出的复检标准,从而减少误判率。目前任何自动分析仪器仍不能完全替代人工镜检。
参考文献
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