论文摘要
目的:探讨油酸型急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome ARDS)大鼠肺组织中JAK2/STAT1信号通路及其相关细胞因子的表达,以及应用AG490(氰-3,4-二羟基-N-苄基肉桂酰胺)和GCs(糖皮质激素)干预下ARDS及JAK2/STAT1信号通路的变化,以探明JAK2/STAT1信号通路在大鼠ARDS中的表达意义以及AG490和GCs对ARDS的治疗效果和作用机制。同时针对巨噬细胞在炎症及ARDS中的重要作用,用脂多糖(LPS)处理RAW264.7巨噬细胞系,并用AG490和GCs干预,研究在体外炎症情况下,巨噬细胞中JAK2/STAT1通路的表达情况,探讨该通路在其中的作用,为更好地阐明ARDS的发生和治疗机制提供实验依据。方法:成年健康雄性SD大鼠72只,随机分为Ⅰ (ARDS)组、Ⅱ (ARDS+AG490)组、Ⅲ (ARDS+GCs)组、Ⅳ(正常对照)组,每组分为2h、4h、8h三个时间点。腹主动脉取血并进行血气分析(该指标只检测2h时间点),取肺组织做HE染色并进行病理学观察,ELISA法检测大鼠血清中自血病抑制因子(LIF)和肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,Real-time PCR、免疫组化、Western Blot检测大鼠肺组织中STAT1的表达变化。LPS处理RAW264.7巨噬细胞系,LPS浓度分别为0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml,每个浓度处理组分为2h.6h、12h、24h、36h五个时间点。ELISA法检测白介素6(IL-6)的含量,选择出LPS最佳处理浓度,用AG490及GCs干预,RT-PCR检测RAW264.7巨噬细胞STAT1的表达变化。结果:1.体征观察、血气分析和病理学观察确定造模成功,病理观察提示肺组织损伤程度ARDS组最严重,ARDS+AG490组、ARDS+GCs组较轻,正常对照组无变化(表现正常);2.ELISA法检测大鼠血清中LIF和肺组织中TNF-α各时间点含量均为ARDS组>ARDS+AG490组、ARDS+GCs组>正常对照组:3.Real-time PCR、Western-blot等方法检测显示STAT1的mRNA和蛋白表达水平ARDS组>ARDS+AG490组、ARDS+GCs组>正常对照组;4.ELISA法检测RAW264.7巨噬细胞IL-6在各浓度LPS处理组的含量均高于对照组,其中1μg/ml LPS处理组IL-6表达较为稳定;5.RT-PCR检测RAW264.7巨噬细胞STAT1含量在12h为LPS处理组>AG490、GCS干预组>正常对照组。结论:1.JAK2/STAT1信号通路在ARDS和炎症发生过程起重要的作用;2.AG490能够通过抑制(?)JJAK2/STAT1信号通路而减轻ARDS大鼠肺损伤及炎症反应;3.GCs具有抗炎和治疗ARDS的作用,并能抑制JAK2/STAT1信号通路,但其抗炎作用是否通过抑制该通路而实现还不确定。
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标签:急性呼吸窘迫综合征论文; 激酶论文; 信号转导和转录激活因子论文; 二羟基苄基肉桂酰胺论文; 糖皮质激素论文; 巨噬细胞论文;