论文摘要
目的:研究亚砷酸钠（NaAsO2）对正常人淋巴细胞活力的影响,观察砷对抗氧化物质及抗氧化酶的作用,探讨砷对过氧化氢酶（CAT）的RNA表达的影响。方法:不同浓度的NaAsO2（2、5、10、15、30、60μmol/L）作用于淋巴细胞24h,48h,72h,用四噻唑兰（MTT）还原法观察淋巴细胞生长情况;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测淋巴细胞中谷胱甘肽（GSH）含量、黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）活力、硫代巴比妥法（TBA）检测丙二醛（MDA）含量、紫外分光法检测CAT活力。NaAsO2作用淋巴细胞72h后,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CAT的RNA表达水平。结果:1.与对照组相比,2、5μmol/L染毒组淋巴细胞活力增强,10μmol/L以上染毒组淋巴细胞活力降低,且存在时间-剂量交互效应（F=2.023,P<0.05）;2. 2～10μmol/L染毒组淋巴细胞GSH含量增加,GSH含量在24、48、72h明显高于对照组（P<0.05）,SOD活力提高、MDA含量降低、CAT活力提高;与2、5μmol/L染毒组比较,15～60μmol/L染毒组淋巴细胞GSH含量降低,SOD活力降低,MDA含量增加、CAT活力降低,各染毒组在24hCAT含量差异均有统计学意义（P<0.05）,且存在时间-剂量交互效应（F分别为12.382,4.212,3.498,2.149,P均<0.01）;3. GSH含量和SOD活力之间存在正相关性（r=0.977,P<0.01）,与MDA含量之间存在负相关性（r=-0.956,P<0.01）,SOD活力和MDA含量之间存在负相关性（r=-0.924,P<0.01）;4. CAT活力和GSH含量（r=0.784,P =0.000）、SOD活力（r=0.765,P=0.000）之间存在正相关性,并和MDA含量（r=-0.814,P=0.000）之间存在负相关性;5. RT-PCR电泳结果可见,210μmol/L染毒组淋巴细胞CAT/β-actin吸光度比值与对照组比较轻微上升,1560μmol/L染毒组淋巴细胞CAT/β-actin吸光度比值与对照组比较明显下降,且呈剂量-反应关系。结论:15μmol/L以上NaAsO2可降低淋巴细胞内CAT基因的RNA表达水平并可抑制淋巴细胞生长,砷通过降低抗氧化物质含量、抗氧化酶活力,诱导抗氧化基因表达下调,引起抗氧化反应水平增高。CAT的诱导下降与地方性砷中毒易感性有关,可以考虑作为地方性砷中毒易感标志物。