全反式维甲酸对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预的实验研究

论文摘要

目的：观察全反式维甲酸（All-trans retinoic acid, ATRA）对博莱霉素（Bleomycin,BLM）诱导的小鼠肺间质纤维化（Idiopathic pulmonary fibrosis, IPF）干预的结果；探讨白细胞介素-17（interleukin-17, IL-17）在肺纤维化（Pulmonary fibrosis, PF）发病机制中的作用及意义。方法：60只体重18-22g雄性C57BL/6小鼠（周龄,6-8周）随机分为对照组（A组）、肺纤维化模型组（B组）、地塞米松干预组（C组）、不同剂量全反式维甲酸干预组（分别为D、E、F组）。A、B每组20只,C、D、E、F每组5只。A组第0天气管内灌注生理盐水作为对照；B、C、D、E、F组第0天气管内灌注博莱霉素建立肺纤维化模型；C组在第0天灌注博莱霉素之后开始腹腔注射地塞米松1mg/kg,每天一次；D、E、F组分别在第0天灌注博莱霉素之后开始腹腔注射全反式维甲酸0.25mg、0.5mg、0.75mg,每周三次。A、B组分别于第3,7,14,28天随机各处死5只小鼠。C、D、E、F组第28天将小鼠全部处死。进行小鼠肺组织大体标本和肺系数观察；苏木素—伊红（Hematoxylin-eosin, HE）染色和Masson染色判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度；肺组织匀浆测定羟脯氨酸（Hydroxyproline, HYP）含量；通过免疫组织化学方法检测肺组织IL-17A蛋白在各组中不同时间点的表达水平。结果:1对照组（A组）在各时间点肺部炎性细胞较少,无成纤维细胞增殖,无纤维化形成。肺纤维化模型组（B组）在第7天肺组织病变以肺泡炎为主,第14天肺组织炎症减轻,肺内有纤维化病灶形成,第28天肺内大量纤维组织呈条索样分布,肺纤维化明显形成。肺纤维化模型组（B组）的肺泡炎和肺纤维化在第7、14、28天高于对照组（A组）（P<0.05）。2与肺纤维化模型组（B组）相比,各药物治疗组（C、D、E、F组）肺泡炎、肺纤维化、肺系数和羟脯氨酸（HYP）含量降低明显（P<0.05）；C、D、E、F各治疗组间LSD法两两比较中：E组较其他治疗组效果显著,有统计学差异（P<0.05）,余各组之间两两比较,未见明显差异（P>0.05）。3免疫组织化学显示：B组与A组相比,小鼠肺组织的IL-17A蛋白免疫组化灰度值第3天虽有所下降,但未见明显变化,无统计学意义（P>0.05）；第7、14天IL-17A蛋白免疫组化灰度值下降明显,第28天有所上升,但B组与A组相比第7、14、28天都有明显差异,有统计学意义（P<0.05）。治疗组比模型组IL-17A蛋白免疫组化灰度值升高明显（P<0.05）。结论：1、IL-17在肺纤维化形成过程中存在高表达,可能在肺纤维化形成过程中发挥重要作用。2、全反式维甲酸可减轻博莱霉素所致小鼠的肺泡炎和肺间质纤维化,可能是通过降低IL-17的表达减轻肺纤维化的形成。3、全反式维甲酸对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的疗效与浓度有相关性。4、地塞米松、不同剂量全反式维甲酸干预组均能不同程度地减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。地塞米松与全反式维甲酸（D、F）组对肺纤维化的改善程度无明显差异。而全反式维甲酸（E）组对小鼠肺纤维化治疗效果最为显著。

论文目录

• 主要中英文缩略词
• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 硕士期间发表的文章
• 致谢