pH-热再生型两水相体系中固定化青霉素酰化酶相转移催化头孢菌素G裂解为7-ADCA

pH-热再生型两水相体系中固定化青霉素酰化酶相转移催化头孢菌素G裂解为7-ADCA

论文摘要

两水相体系由于聚合物回收的困难,在一定程度上阻碍了两水相萃取技术的应用。本课题使用温敏型可回收聚合物PNB及pH敏感型聚合物PADB组成两水相系统进行头孢菌素G的裂解反应,可以解除酶的底物,产物抑制,提高转化率,两水相系统的回收可大大减少成本及环境压力.此两水相体系应用于青霉素酰化酶催化裂解头孢菌素G生成7-氨基-3-去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)。考察了几种常见的无机盐LiCl, NaCl, KCl, KSCN, Li2SO4, (NH4) 2SO4, Na2SO4, K2SO4, Na3PO4, K3PO4, NaC104对7-ADCA、苯乙酸和头孢菌素G分配系数的影响。发现整个体系在30mM (NH4) 2SO4的存在下,底物和产物达到较好的分配,7-ADCA、苯乙酸和头孢菌素G的分配系数为分别为3.56,1.57和5.34。在此体系中进行固定化青霉素酰化酶的催化反应,底物与产物富集在上相,固定化酶分配在下相,底物头孢菌素G从上相扩散到下相经酶裂解生成产物7-ADCA口苯乙酸转移到上相,从而解除底物和产物抑制,提高酶催化效率。最终抗生素中间体7-ADCA的得率为93.00%。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第1章 前言
  • 1.1 两水相萃取技术概论
  • 1.1.1 两水相萃取技术概论
  • 1.1.2 两水相系统的分配理论及影响因素
  • 1.1.2.1 表面能的影响
  • 1.1.2.2 电荷的影响
  • 1.1.2.3 影响分配的参数
  • 1.1.3 传统两水相系统的应用
  • 1.1.4 新型两水相系统及其应用
  • 1.1.4.1 pH敏感两水相体系
  • 1.1.4.2 温敏感两水相体系
  • 1.1.4.3 压力敏感两水相体系
  • 1.1.4.4 光敏感两水相体系
  • 1.1.4.5 磁敏感两水相体系
  • 1.2 7-ADCA的合成
  • 1.3 青霉素酰化酶及其固定化
  • 1.4 课题研究目的、课题内容
  • NB/PADB两水相系统中头孢G酸的相转移催化研究'>第2章 PNB/PADB两水相系统中头孢G酸的相转移催化研究
  • 2.1 引言
  • 2.2 实验仪器和试剂
  • 2.3 实验方法
  • NB/PADB两水相中的分配'>2.3.1 头孢菌素G、7-ADCA和苯乙酸在PNB/PADB两水相中的分配
  • 2.3.1.1 分配体系的配置
  • 2.3.1.2 测量条件的选择
  • 2.3.1.3 头孢菌素G、7-ADCA和苯乙酸标准曲线的绘制
  • 2.3.2 头孢菌素G在两水相中的相转移催化反应
  • 2.3.2.1 改变底物浓度的反应
  • 2.3.2.2 改变酶用量的反应
  • 2.4 结果与讨论
  • 2.4.1 头孢菌素G、7-ADCA和苯乙酸标准曲线的绘制
  • 2.4.2 头孢菌素G,7-ADCA和苯乙酸分配系数的调整及优化
  • 2.4.3 头孢菌素G在两水相中的相转移催化反应
  • 2.4.3.1 改变底物浓度的反应
  • 2.4.3.2 改变酶用量的反应
  • 2.5 小结
  • ADB2.6的制备及其在头孢菌素G相转移催化反应中的应用'>第3章 PADB2.6的制备及其在头孢菌素G相转移催化反应中的应用
  • 3.1 实验仪器及试剂
  • 3.2 实验方法
  • ADB2.6的制备'>3.2.1 PADB2.6的制备
  • ADB2.6等电点及回收率的测量'>3.2.2 PADB2.6等电点及回收率的测量
  • NB成相实验'>3.2.3 PAD2B.6与温敏型聚合物PNB成相实验
  • ADB2.6的红外光谱表征'>3.2.4 PADB2.6的红外光谱表征
  • ADB2.6应用于头孢菌素G的相转移催化反应'>3.2.6 PADB2.6应用于头孢菌素G的相转移催化反应
  • NB/PADB2.6两水相中的分配'>3.2.6.1 头孢菌素G、7-ADCA和苯乙酸在PNB/PADB2.6两水相中的分配
  • NB/PADB2.6两水相中的相转移催化反应'>3.2.6.2 头孢菌素G在PNB/PADB2.6两水相中的相转移催化反应
  • 3.2.6.3 头孢菌素G在硼酸缓冲液单水相中的反应
  • 3.2.7 从反应液中分离产物7-ADCA
  • 3.3 实验结果
  • ADB2.6的制备'>3.3.1 PADB2.6的制备
  • ADB2.6的红外光谱表征'>3.3.2 PADB2.6的红外光谱表征
  • NB/PADB2.6两水相中的分配'>3.3.3 头孢菌素G、7-ADCA和苯乙酸在PNB/PADB2.6两水相中的分配
  • NB/PADB2.6两水相中的相转移催化反应'>3.3.4 头孢菌素G在PNB/PADB2.6两水相中的相转移催化反应
  • 3.3.5 头孢菌素G在硼酸缓冲液单水相中的反应
  • 3.3.6 从反应液中分离产物7-ADCA
  • 3.4 小结
  • 第4章 结论与展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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