内侧隔核胆碱能神经在海洛因成瘾和复吸中的作用

论文摘要

目的观察选择性损伤内侧隔核胆碱能神经对大鼠海洛因自身给药获得、消退、复吸及空间学习记忆的影响；并观察损伤内侧隔核投射至海马腹侧下托胆碱能神经对海洛因成瘾大鼠复吸及空间学习记忆的影响。方法实验一：雄性SD大鼠随机分为损伤组（n=8）和对照组（n=7），损伤组注射192IgG-Saporin（0.25μg）至内侧隔核（AP+0.4, ML0, DV－5.5），对照组注射等量无菌生理盐水；注射后恢复一周，动物进行FR1海洛因自身给药获得测试（4h），之后进行消退（2h）和线索诱导的海洛因觅药行为测试（2h）；消退2～4天后进行海洛因诱导的觅药行为恢复测试（2h），测试前10min腹腔注射海洛因（0.25mg/kg）；之后用Morris水迷宫测试空间定位航行能力和空间探索能力观察两组大鼠空间学习记忆能力，并与未成瘾组大鼠（n=8）进行比较；免疫组化ABC法染色Chat阳性细胞，观察内侧隔核胆碱能神经元损伤程度。实验二：雄性SD大鼠构建海洛因自身给药模型，戒断2周；戒断期中枢埋管至海马腹侧下托（AP+0.4, ML0, DV－5.5），随机分为损伤组（n=7）和对照组（n=6），损伤组双侧注射192IgG-Saporin（每侧0.25μg），对照组注射等量无菌盐水；一周后进行海洛因觅药行为测试，消退2～4天后进行海洛因诱导的觅药行为测试，测试前10min腹腔注射海洛因（0.25mg/kg）；之后两组动物进行Morris水迷宫测试，测试后动物用免疫组化观察胆碱能神经的损伤程度。结果实验一：内侧隔核胆碱能神经损伤后在海洛因自身给药训练的获得测试中的有效鼻触数较对照组没有显著性差异，海洛因给药次数在前期没有差异，随着训练时间延长，损伤组给药次数显著高于对照组（P＜0.05）；在消退训练和线索诱导的海洛因觅药行为测试中两组的触鼻数没有显著性差异；而海洛因诱导的觅药行为测试中，损伤组有效触鼻数（2h）较对照组显著升高（P＜0.05）；Morris水迷宫测试中损伤组和对照组潜伏期、总运动路程和穿越平台次数没有显著性差异，但两组在定位航行试验和空间探索试验中表现均差于未成瘾组大鼠（P＜0.05）。实验二：海马腹侧下托损伤组和对照组在线索诱导的海洛因觅药行为测试和海洛因诱导的觅药行为测试中的有效鼻触数没有显著性差异；Morris水迷宫测试中两组潜伏期、总运动路程、平均速度和穿越平台次数也没有显著性差异。结论内侧隔核胆碱能神经损伤可增加海洛因自身给药行为，促进海洛因诱导的觅药行为恢复，可见内侧胆碱能神经损伤改变了海洛因的奖赏效应，促进了对海洛因的渴求，提示胆碱能神经可能对药物奖赏和复吸有一定的调节作用。内侧隔核胆碱能神经损伤大鼠在海洛因诱导的觅药行为测试中表现出后期觅药行为增强，提示或因抑制控制能力减弱。海洛因成瘾损害了正常的空间学习记忆功能，或是内侧隔核胆碱能神经大鼠海洛因成瘾后的空间学习记忆与对照组没有显著性差异的原因。内侧隔核投射至腹侧下托的胆碱能损伤对海洛因复吸行为没有影响，提示内侧隔核投射至腹侧下托的胆碱能神经投射可能不参与海洛因复吸过程。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 1 实验器材
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验试剂及溶液配置
• 1.3 主要仪器设备
• 2 实验方法
• 2.1 静脉插管手术
• 2.2 中枢核团埋管手术
• 2.3 核团微注射
• 2.4 自身给药训练
• 2.5 消退
• 2.6 海洛因觅药行为测试
• 2.7 自发活动度测试
• 2.8 Morris 水迷宫测试
• 2.9 免疫组化检测胆碱能损伤程度
• 2.10 确定中枢给药部位
• 2.11 统计分析
• 3 实验安排
• 3.1 实验一内侧隔核（MS）胆碱能神经损伤对大鼠海洛因自身给药、消退、觅药行为及空间学习记忆的影响
• 3.2 实验二内侧隔核至腹侧下托（vSUB）胆碱能神经损伤对海洛因成瘾大鼠复吸及空间学习记忆的影响
• 4 实验结果
• 4.1 实验一内侧隔核（MS）胆碱能神经损伤对大鼠海洛因自身给药、消退、觅药行为及空间学习记忆的影响
• 4.1.1 MS 胆碱能神经损伤对大鼠自身给药行为的影响
• 4.1.2 MS 胆碱能神经损伤对消退的影响
• 4.1.3 MS 胆碱能神经损伤对海洛因觅药行为的影响
• 4.1.4 MS 胆碱能神经损伤对空间学习记忆的影响
• 4.1.5 MS 胆碱能神经损伤程度
• 4.1.6 中枢给药部位
• 4.2 实验二内侧隔核投射至腹侧下托（vSUB）的胆碱能神经损伤对海洛因成瘾大鼠复吸及空间学习记忆的影响
• 4.2.1 海洛因自身给药模型
• 4.2.2 vSUB 胆碱能神经损伤后对海洛因觅药行为的影响
• 4.2.3 192IgG-Saporin 损伤 MS 胆碱能神经对自发活动度的影响
• 4.2.4 vSUB 胆碱能神经损伤对空间学习记忆的影响
• 4.2.5 内侧隔核胆碱能神经损伤程度
• 4.2.6 中枢给药部位
• 5 讨论
• 6 结论
• 参考文献
• 附录A 缩略词中英文对照表
• 附录B 综述
• 参考文献
• 在学研究成果
• 致谢