附子汤半仿生法实验研究

论文摘要

目的:优选附子汤最佳提取条件,进一步验证半仿生提取法的科学性和实用性。方法:以芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、总生物碱、总糖、挥发油、HPLC梯度洗脱总峰面积、干浸膏为综合评判指标。在药材粒度、提取温度、提取用水量、滤过、浓缩等条件相同的前提下,用均匀设计UL(91×33)优选出半仿生法提取用水的PH值和提取时间;再以上述指标为综合评判指标,对该方中五味药材按君臣佐使分类形成的15种组合方式进行优选;然后采用此条件提取,用比例分割法优选SBE液较佳醇沉浓度;再以上述指标为综合评判指标,优选方药的醇提工艺;然后作SBE法(半仿生提取法)、WE法(水提法)、SBAE法(半仿生提取醇沉法)、WAE法(水提醇沉法)、AE法(醇提法)5种方法提取液的指标成分及兔血清指纹图谱的比较研究。结果:白术挥发油超临界CO2萃取的最佳工艺为:压强30MPa,温度40℃,萃取时间35min。附子汤药效物质用SBE法提取3次,水的PH值依次为:6.0、7.5、8.5,提取时间依次为:90min、45min、25min。以附子、白芍、茯苓、白术、人参混合提取为最佳。方药SBAE法5种醇沉浓度的综合评判值Y为:Y61.25%>Y55%>Y67.5%>Y80%>Y30%。结合生产实际,以调含醇量60%为最佳。方药4种醇提浓度的综合评判值Y为:Y50%>Y30%>Y70%>Y90%。方药5种方法提取液的综合评判值Y为:YSBE液>YWE液>YAE液>YSBAE液>YWAE液。兔血清HPLC指纹图谱研究结果表明,SBE液在体内的吸收速度和作用强度均大于WE液。结论:本研究再一次证明,方药药效物质的提取,半仿生提取法是一种能保持原方特有疗效的方法,有可能取代水提取法,半仿生提取醇沉法有可能取代水提醇沉法;进一步证明了半仿生提取法的科学性和实用性,并为附子汤的二次研究开发打下了坚实的基础。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 文献综述
• 1 附子汤组方研究
• 1.1 附子汤的处方来源及方解
• 1.2 处方各药味主要化学成分及药理作用
• 1.3 附子汤的主要临床应用
• 2 “半仿生提取法”简介及其研究进展
• 2.1 “半仿生提取法”的内涵
• 2.2 “半仿生提取法”的特点
• 2.3 半仿生提取法的应用前景
• 2 流体萃取法”简介及研究进展'>3 “超临界CO₂流体萃取法”简介及研究进展
• 2 流体萃取法”的原理及优越性'>3.1 “超临界CO₂流体萃取法”的原理及优越性
• 2 流体萃取法”研究进展'>3.2 “超临界CO₂流体萃取法”研究进展
• 2萃取工艺的优化'>第二部分 白术挥发油超临界CO₂萃取工艺的优化
• 1 试验仪器与材料
• 2 试验方法与结果
• 2.1 正交试验设计
• 2 萃取'>2.2 超临界CO₂萃取
• 2.3 正交试验结果见表2-2
• 2.4 正交试验结果分析
• 2.5 正交试验的验证及补充实验
• 3 小结与讨论
• 第三部分 附子汤半仿生提取法工艺条件的优选
• 1 仪器与材料
• 2 试验设计
• 3 试验方法与结果
• 3.1 样品液的制备
• 3.2 供试液的制备
• 3.3 对照液的制备
• 3.4 滴定液的配制与标定
• 3.5 芍药苷的含量测定
• 3.6 乌头总生物碱的含量测定
• 3.7 人参皂苷Rg1 和人参皂苷Re 的含量测定
• 3.8 总糖的含量测定
• 3.9 HPLC 梯度洗脱总积分面积的测定
• 3.10 干浸膏的测定
• 3.11 试验结果的处理
• 4 小结与讨论
• 第四部分 附子汤用半仿生提取法药材组合方式的优选
• 1 仪器与材料
• 2 试验方法与结果
• 2.1 方中药材的组合方式
• 2.2 不同药材组合方式的提取
• 2.3 供试液的制备
• 2.4 对照液的制备
• 2.5 滴定液的配制与标定
• 2.6 芍药苷的含量测定
• 2.7 乌头总生物碱的含量测定
• 2.8 人参皂苷Rg1 和人参皂苷Re 的含量测定
• 2.9 总糖的含量测定
• 2.10 HPLC 梯度洗脱总积分面积的比较
• 2.11 干浸膏得率的测定
• 2.12 15 种组合方式的综合评判方法与结果
• 3 小结与讨论
• 第五部分 附子汤SBE 液不同醇沉浓度的优选
• 1 仪器与材料
• 2 样品液的制备
• 3 试验方法与结果
• 4 小结与讨论
• 第六部分 附子汤醇提工艺的优选
• 1 仪器与材料
• 2 试验方法与结果
• 2.1 样品液的制备
• 2.2 供试液的制备
• 2.3 各指标成分的测定及结果
• 3 小结与讨论
• 第七部分 附子汤5 种提取方法的成分比较
• 1 仪器与材料
• 2 试验方法与结果
• 2.1 样品液的制备
• 2.2 供试液的制备
• 2.3 乌头总碱的含量测定
• 2.4 芍药苷的含量测定
• 2.5 人参皂苷Rg1 和人参皂苷Re 的含量测定
• 2.6 总糖的含量测定
• 2.7 乙醇精制液梯度洗脱总峰面积的测定
• 2.8 干浸膏的测定
• 2.9 5 种方法提取液指标成分的综合评价
• 2.10 五种不同提取液HPLC 指纹图谱的比较
• 3 小结与讨论
• 第八部分 附子汤SBE 液和WE 液的兔血清指纹图谱研究
• 1 仪器与实验材料
• 2 受试药液的制备
• 3 血样的制备
• 4 HPLC 血清指纹图谱的测绘
• 4.1 HPLC 分析条件
• 4.2 HPLC 分析结果
• 4.3 数据分析
• 5 小结与讨论
• 结语
• 1 本课题采用半仿生提取法对附子汤进行实验研究
• 2 本课题特色
• 3 本课题存在的问题
• 参考文献
• 致谢
• 科技查新报告