论文摘要
溶菌酶释放蛋白(MRP)是猪链球菌2型重要的毒力因子,为了研究猪链球菌2型MRP的功能片段,本实验经PCR扩增了致病性较强的国内标准株CVCC606及致病性较弱的四川分离株SC-3的mrp截断基因(tmrp),比较该段序列的差异;将CVCC606的tmrp插入pGEX-3x质粒,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,经谷胱甘肽亲和层析纯化GST-TMRP,测定其对BALB/c小鼠抗CVCC606感染的免疫保护性;本实验利用Xa因子切除GST,纯化MRP蛋白片段(TMRP),研究了TMRP介导的CVCC606对猪肾细胞(PK15)的黏附活性。结果表明,两株菌的tmrp基因序列同源性达99.85%,tmrp基因编码的氨基酸序列同源性100%,证实tmrp与SS2致病性差异无相关性;GST-TMRP对BALB/c小鼠抗CVCC606感染的免疫保护率为60%;TMRP蛋白与CVCC606对PK15的黏附活性显著相关,有可能包含MRP的黏附活性功能表位,是MRP的黏附功能片段。