鼠纤维介素论文-王鸣,习东,叶华丽,刘君慧,马文文

鼠纤维介素论文-王鸣,习东,叶华丽,刘君慧,马文文

导读:本文包含了鼠纤维介素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:重型肝炎,RNA干扰,纤维介素蛋白2,微小RNA

鼠纤维介素论文文献综述

王鸣,习东,叶华丽,刘君慧,马文文[1](2012)在《小鼠纤维介素蛋白2微小RNA表达质粒的构建及其对体内外相应基因的干预效应》一文中研究指出目的:探讨小鼠纤维介素蛋白2(fgl2)的miRNA(微小RNA)表达质粒在体外对相应基因表达的干预效应及在体内对重型肝炎小鼠的治疗作用。方法:分别构建产生小鼠fgl2-miRNA的表达载体(P-mfgl2-miRNA),将其转染到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中。实验分组:将P-mfgl2-miRNA与小鼠fgl2的表达质粒(pcDNA3.1-mfgl2)共转染到CHO细胞作为干预组,无关序列miRNA表达质粒(irrelevant P-miRNA)与pcDNA3.1-mfgl2共转染为非相关对照组,仅转染pcDNA3.1-mfgl2为阳性对照组,未转染任何质粒为空白对照组。通过实时荧光定量PCR及Western blot观察fgl2在基因转录水平及蛋白水平表达量的改变。建立重型肝炎小鼠模型,通过尾静脉高压注射P-mfgl2-miRNA者为治疗组,注射irrelevant P-miRNA者为非相关组,注射相同剂量生理盐水者为阴性对照组,观察P-mfgl2-miRNA对重型肝炎小鼠的治疗作用。结果:成功构建了针对小鼠fgl2的miRNA。在CHO细胞中,干预组fgl2在RNA水平及蛋白水平的表达均较非相关对照组显着降低。P-mfgl2-miRNA可提高重型肝炎小鼠生存率至8.3%。结论:Fgl2可作为重型肝炎基因治疗的靶点,利用miRNA沉默fgl2基因将有利于重型肝炎的治疗,为后续的进一步研究奠定了基础。(本文来源于《中西医结合肝病杂志》期刊2012年03期)

汪之沫,严伟明,习东,朱传龙,罗小平[2](2006)在《小鼠纤维介素基因shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰》一文中研究指出目的探讨纤维介素蛋白(fg12)的双链RNA(dsRNA)在体外对fg12凝血酶原酶基因表达的干扰作用及其规律。方法构建能产生鼠垃12(mfg12)的发夹状双链RNA(shRNA)的载体p-mfg12shRNA,将其与mfg12- EGFP融合基因表达质粒pEGFP-mfg12共转染(用量比为1:5)到中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)作为实验组,另仅转染pEGFP-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pEGFP-mfg12(用量比为1:5)作为对照组。转染24、48、 72 h后,观察mfg12-EGFP融合蛋白在CHO细胞中的表达情况,并通过流式细胞仪检测荧光细胞阳性率。分别将p- mfg12shRNA和mfg12cDNA表达质粒pcDNA3.1-mfg12共转染(用量比为1:5)到CHO细胞和人宫颈癌细胞(Hela 细胞),作为试验组,另转染pcDNA3.1-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pcDNA3.1-mfg12(用量比为1:5) 或不转染任何质粒作为对照组。通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学检测mfg12在CHO和Hela这两种细胞株中表达的情况。结果实验组较对照组的绿色荧光强度明显减弱,荧光细胞数明显减少。在CHO和Hela两种细胞株,均显示mfg12shRNA显着抑制mfg12 mRNA和蛋白质的表达。结论本研究所构建的mfg12shRNA表达质粒p-mfg12shRNA 可在体外高效特异地抑制mfg12的表达,为进一步的体内实验奠定了基础。(本文来源于《中华肝脏病杂志》期刊2006年05期)

汪之沫,宁琴,罗小平[3](2005)在《小鼠纤维介素基因shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰研究》一文中研究指出纤维介素蛋白(fibrinogen-like protein 2,fg12)又称fg12凝血酶原酶,是新近发现的一种凝血因子, 它通过直接激活凝血酶原启动凝血过程。fg12凝血酶原酶最初是在感染鼠3型肝炎病毒(murine hetatitis virus strain-3,MHV-3)的小鼠体内发现的,随后又观察到该基因及其编码的fg12凝血酶的高表达与人类重症型肝炎的发生有关。对fg12进行基因干预研究,将为进一步地探索重症肝炎基因治疗奠定基础。(本文来源于《中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编》期刊2005-05-01)

汪之沫,宁琴[4](2005)在《绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达》一文中研究指出目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体,在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达,为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法:用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段,插入到GFP表达载体pEGFP N2中GFP基因序列的上游,构建成GFP mfgl2融合基因表达载体pEGFP mfgl2,将该载体转染到CHO细胞后24~48h,通过荧光显微镜观察并摄片。结果:扩增出长约1.3kb的基因片段,经双酶切鉴定和测序鉴定无误;重组载体转染CHO细胞后,在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论:成功构建了pEGFP mfgl2融合基因表达载体;重组载体可在CHO细胞中表达出GFP mfgl2融合蛋白,为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2005年04期)

孙奕,宁琴,李锦文,严伟明,陈忠华[5](2003)在《鼠纤维介素在小鼠心脏移植急性排斥反应中的表达及其意义》一文中研究指出目的 探讨小鼠同种心脏移植急性排斥反应期间鼠纤维介素 (mfgl2 )在移植心脏组织中的表达及其与组织病理学改变的关系。方法 采用BALB/c小鼠到C5 7BL/ 6小鼠的颈部异位心脏移植作为同种排斥反应模型 ,以抗mgfl2多克隆抗体干预 ,并设同系小鼠心脏移植对照组。采集移植心组织标本作病理学检查 ,以免疫组织化学方法测定mfgl2在移植心脏组织细胞上的表达 ,并对mgfl2的表达进行半定量分析。结果 同系移植对照组移植心脏组织结构正常 ,未见mfgl2表达 ;同种移植组移植心脏组织出现进行性坏死 ,大量单个核细胞浸润 ,并伴有mfgl2的表达 ,且血管内皮细胞表达mfgl2 ;抗mfgl2抗体干预组移植心脏组织损伤较轻 ,移植物的存活时间延长 (P <0 .0 1) ,巨噬细胞、淋巴细胞的浸润和mfgl2表达量也显着减少。结论 mfgl2表达水平与排斥反应所致移植心脏病理损害程度相关 ;抗mfgl2抗体干预能显着减少移植心脏巨噬细胞、淋巴细胞的浸润 ,明显延长移植心脏存活时间。(本文来源于《中华器官移植杂志》期刊2003年05期)

鼠纤维介素论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨纤维介素蛋白(fg12)的双链RNA(dsRNA)在体外对fg12凝血酶原酶基因表达的干扰作用及其规律。方法构建能产生鼠垃12(mfg12)的发夹状双链RNA(shRNA)的载体p-mfg12shRNA,将其与mfg12- EGFP融合基因表达质粒pEGFP-mfg12共转染(用量比为1:5)到中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)作为实验组,另仅转染pEGFP-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pEGFP-mfg12(用量比为1:5)作为对照组。转染24、48、 72 h后,观察mfg12-EGFP融合蛋白在CHO细胞中的表达情况,并通过流式细胞仪检测荧光细胞阳性率。分别将p- mfg12shRNA和mfg12cDNA表达质粒pcDNA3.1-mfg12共转染(用量比为1:5)到CHO细胞和人宫颈癌细胞(Hela 细胞),作为试验组,另转染pcDNA3.1-mfg12或共转染无关序列shRNA表达质粒和pcDNA3.1-mfg12(用量比为1:5) 或不转染任何质粒作为对照组。通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学检测mfg12在CHO和Hela这两种细胞株中表达的情况。结果实验组较对照组的绿色荧光强度明显减弱,荧光细胞数明显减少。在CHO和Hela两种细胞株,均显示mfg12shRNA显着抑制mfg12 mRNA和蛋白质的表达。结论本研究所构建的mfg12shRNA表达质粒p-mfg12shRNA 可在体外高效特异地抑制mfg12的表达,为进一步的体内实验奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

鼠纤维介素论文参考文献

[1].王鸣,习东,叶华丽,刘君慧,马文文.小鼠纤维介素蛋白2微小RNA表达质粒的构建及其对体内外相应基因的干预效应[J].中西医结合肝病杂志.2012

[2].汪之沫,严伟明,习东,朱传龙,罗小平.小鼠纤维介素基因shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰[J].中华肝脏病杂志.2006

[3].汪之沫,宁琴,罗小平.小鼠纤维介素基因shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰研究[C].中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编.2005

[4].汪之沫,宁琴.绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达[J].医学研究生学报.2005

[5].孙奕,宁琴,李锦文,严伟明,陈忠华.鼠纤维介素在小鼠心脏移植急性排斥反应中的表达及其意义[J].中华器官移植杂志.2003

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