沂蒙黑山羊子宫中GTH受体及其mRNA在发情周期内的表达规律

沂蒙黑山羊子宫中GTH受体及其mRNA在发情周期内的表达规律

论文摘要

沂蒙黑山羊是山东省地方优良品种,属绒、皮、肉兼用型,以体格大,肉质好,产绒量高而著称,但其繁殖率低,产羔平均为110%,因此提高其繁殖率对畜牧业的发展具有非常重要的意义。促卵泡素(FSH)主要刺激卵巢卵泡的发育和成熟以及颗粒细胞产生雌激素及通过影响睾丸支持细胞的功能进而间接影响精子的形成。促黄体素(LH)则主要刺激卵巢膜细胞雄激素的产生,为卵巢颗粒细胞提供合成雌激素的底物,以及启动动物的排卵和维持黄体孕酮产生,在睾丸则刺激Ledig细胞产生雄激素,为精子的发育提供适宜的雄激素环境。促性腺激素与这些性腺器官的靶细胞膜的特异性受体结合,引起受体构型变化,调节腺苷酸环化酶的活性,催化三磷酸腺苷(ATP)转化为环一磷酸腺苷(cAMP),进而激活依赖cAMP的蛋白激酶,合成相应的mRNA,产生其受体蛋白。目前关于山羊FSHR和LHR在性腺外组织表达的研究报道很少。为了探讨低繁山羊子宫中FSHR和LHR受体的分布及其mRNA的表达变化规律,本研究从沂蒙黑山羊子宫中提取总RNA,使用相同的RT-QPCR方法,分别对处于发情周期不同阶段沂蒙黑山羊子宫各段中FSHR基因和LHR基因在mRNA水平上进行定量分析。运用免疫组织化学方法研究沂蒙黑山羊发情周期不同阶段FSHR和LHR蛋白在子宫不同部位中的位置分布。主要结果如下:1. FSHRmRNA和LHRmRNA在整个发情周期的子宫各段中都有表达。FSHRmRNA的整体表达量水平均高于LHRmRNA的表达量;FSHRmRNA在子宫角发情后期表达量最高,渐低至发情前期最低;子宫肉阜间情期表达量最高,至发情前期最低,四时期之间差异不显著(P>0.05);子宫颈在发情期表达量最高,间情期表达量最低,与其它时期差异显著(P<0.05)。LHRmRNA在子宫角、子宫肉阜、子宫颈均在间情期表达量最高,且与其它三个时期差异显著(P<0.05)。两基因在子宫体的表达量较低且规律不明显。2.在发情前期和发情期子宫角和子宫肉阜固有层中有散在的免疫阳性反应;在子宫内膜上皮,子宫腺的腺细胞和血管内皮的上皮细胞未发现有阳性着色;在子宫体和子宫颈中腺上皮细胞和腔上皮细胞等都显示为阴性反应;发情周期其它时期FSHR阳性反应较弱。在间情期子宫角和子宫肉阜内膜腔上皮细胞,呈现强阳性LHR反应;在固有层、肌肉层和浆膜层均未发现有阳性反应;子宫体和子宫颈同样为阴性反应;发情周期其它时期LHR阳性反应较弱。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 1 卵泡刺激素和黄体生成素及其受体
  • 2 卵泡刺激素及其受体国内外研究进展简介
  • 2.1 卵泡刺激素及其受体简介
  • 2.2 FSH 的研究进展
  • 2.3 FSHR 分布的研究进展
  • 3 黄体生成素及其受体国内外研究进展简介
  • 3.1 黄体生成素及其受体简介
  • 3.2 黄体生成素的研究进展
  • 3.3 黄体生成素受体的研究进展
  • 4 哺乳动物发情周期的划分
  • 5 RT-PCR 技术
  • 5.1 RT-PCR 方法的原理及其特点
  • 5.2 本试验所运用的方法--SYBR Green I 荧光染料法
  • 5.3 定量方法
  • 6 本研究目的和意义
  • 沂蒙黑山羊子宫中GTH受体及其mRNA 在发情周期内的表达规律
  • 1 材料与方法
  • 1.1 试验材料
  • 1.2 试验方法之荧光定量PCR
  • 1.3 试验方法之免疫组织化学
  • 2 结果与分析
  • 2.1 RT-QPCR 结果
  • 2.2 免疫组织化学结果
  • 3 讨论
  • 3.1 关于FSHR 及其mRNA 在子宫中的表达规律与介导子宫功能调节中的作用
  • 3.2 关于LHR 及其mRNA 在子宫中的表达规律与介导子宫功能调节中作用
  • 3.3 GTH 受体及其mRNA 在子宫中的表达规律之间联系与子宫功能调节的关系
  • 4 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表论文情况
  • 附件
  • 相关论文文献

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