大肠杆菌F18菌毛FedE亚单位单克隆抗体的制备及鉴定

论文摘要

断奶仔猪水肿病或腹泻病是由表达F18菌毛的大肠杆菌引起的仔猪常见的传染病,在养猪业的生产中具有重要的影响。F18菌毛分为两个血清型变种F18ab和F18ac,分别介导产肠毒素大肠杆菌（ETEC）和产Vero细胞毒素大肠杆菌（VTEC）在仔猪肠道里的定居,进而繁殖导致相应的病理变化。F18菌毛蛋白结构主要有五个部分:A、B、C、E、F。其中A亚单位是菌毛的主要结构亚单位构成菌毛的主干,B、C亚单位在菌毛的成熟,装配及合成中起伴侣或推进作用,F亚单位是菌毛的黏附单位,E亚单位是否与黏附有关还不清楚。 本研究通过利用重组蛋白（GST-FedE）制备的免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,采用间接ELISA筛选出两株稳定分泌针对FedE亚单位的单克隆抗体D5,E2,ELISA效价分别为12log2,14log2。通过间接免疫荧光试验和小肠上皮细胞黏附阻抑试验,结果表明抗FedE单抗具有识别F18天然菌毛的生物活性,可以用于实际检测,但是不能阻断F18细菌对小肠上皮细胞的黏附,进而推断此亚单位不是F18菌毛的黏附功能单位。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 综述
• 参考文献
• 前言
• 研究一 免疫抗原的准备
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 研究二 FedE单克隆抗体的制备
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 研究三 抗FedE单抗活性鉴定
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢