聚多曲霉菌提取液对培养人肺鳞癌细胞增殖作用的实验研究

论文摘要

肺癌是目前全世界最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在多数国家居各种癌症的首位,并且呈上升趋势。化疗仍是当前肺癌的主体治疗手段,现有化疗药物的疗效却不尽如人意。寻找安全有效的新的化疗药物成为医学科学工作者面临的一项紧迫任务。长海医院呼吸科在2001年曾收治一位手术后接受放疗、化疗后发生呼吸道真菌感染的肺鳞癌患者,经证实为世界首例由聚多曲霉菌引起的阻塞性支气管曲霉病。对其病程发展及转归进行了完整的随访观察后,我们发现患者在顽固真菌感染的2年余时间里未有肿瘤的复发,而在真菌感染治愈后不久则出现了肿瘤的复发及转移。据此推测聚多曲霉菌及其产物可能对人肺鳞癌细胞的生长具有一定的抑制作用。目前尚未见聚多曲霉菌及其产物对肿瘤细胞生长抑制的相关实验研究报道。本课题以人肺鳞癌细胞系SK-MES1为研究对象,采取体外培养研究方式,比较聚多曲霉菌提取液干预组与生理盐水处理对照组肺癌细胞的生长情况,阐明聚多曲霉菌分泌物对人肺癌细胞生长可能存在的抑制作用,从而为寻找肺癌治疗药物新的切入点提供理论和实验依据。 目的:研究聚多曲霉菌提取液对体外培养的人肺鳞癌细胞系SK-MES1细胞增殖的影响,并初步探讨其作用机理。 方法:1、聚多曲霉菌经产毒培养后用灭菌生理盐水制成孢子菌丝体悬液,高温灭活后充分破碎,离心取上清,滤过除菌备用。2、将SK-MES1细胞分为A、B、C、D、E五组,分别以生理盐水和1、1:2、1:4、1:8共4个不同浓度的聚多曲霉菌提取液处理细胞,观察细胞的形态变化;五组细胞连续培养6天,台盼蓝染色计数活细胞数,绘制生长曲线,比较各组细胞生长情况;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色分析、流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳,比较各组细胞增殖及凋亡情况。 结果:1、高浓度霉菌提取液处理组细胞最早于作用后8h即出现肿胀变圆、

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• 前言
• 材料和仪器
• 方法和步骤
• 结果
• 讨论
• 总结
• 参考文献
• 致谢
• 真菌毒素与肺部疾病