食管癌细胞株高侵袭力亚系的建立及其生物学特性研究

论文摘要

目的：筛选建立具有不同转移潜能高侵袭能力食管癌细胞株的亚系并研究其生物特性。方法：利用Transwell侵袭小室从人食管鳞癌Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系，通过HE染色比较两系的细胞形态；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖能力的变化；流式细胞术（FCM）检测两系的细胞周期；蛋白质印迹法检测与侵袭能力相关基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶抑制因子-2（TIMP-2）蛋白表达。结果：用Transwell侵袭小室成功从食管癌细胞株Eca-109中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系，命名为Eca-109T4。两系在细胞形态上没有明显差异；MTT法检测显示亚系Eca-109T4增殖能力强；细胞周期显示亚系增殖指数（Proliferation Index，PI）高，PI=41%；且MMP-2蛋白表达相比增高（P=0.023,P＜0.05），差异有统计学意义；TIMP-2蛋白表达相比增高,差异无统计学意义（P=0.392, P＞0.05）。结论：筛选出具有不同转移潜能高侵袭能力食管癌细胞株亚系，为探讨食管癌转移机制的研究奠定了实验基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 肿瘤细胞
• 1.2 主要仪器设备
• 1.3 主要试剂与耗材
• 1.4 主要试剂配置方法
• 2 方法
• 2.1 细胞培养
• 2.2 Transwell 侵袭小室筛选高侵袭能力食管癌细胞株
• 2.3 苏木素-伊红（HE）染色法
• 2.4 四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验方法
• 2.5 流式细胞仪检测细胞周期
• 2.6 划痕愈合实验
• 2.7 Western blot 检测 MMP-2 及 TIMP-2 蛋白表达
• 3 质量控制
• 4 统计分析
• 附技术路线图
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学位论文
• 导师评阅表