论文摘要
目的:宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一。据统计,2000 年全球宫颈癌新发病例47 万,死亡病例23 万,现患病例140 万。目前认为人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌的主要致病原因。早期宫颈癌不论手术还是放疗,疗效均满意,但中晚期宫颈癌治疗效果差,因此寻找合理的综合治疗方法是一个迫切需要解决的问题。顺铂作为治疗肿瘤的首选化疗药物,对于宫颈癌的疗效是肯定的。但作为化疗药物如果长期大量的应用,药物在作用于肿瘤的同时还会引起严重的副反应,而且可导致肿瘤对化疗药物产生耐药反应。因此,寻找一些毒性小、副反应少且有一定疗效的天然药物治疗肿瘤,或者利用它们增加化疗药物的敏感性就显得极其重要。大蒜素是具有多种生物活性的化合物,近年来,动物实验和体外研究均已证实了大蒜素中的活性物质具有抗癌作用。本实验室前期的研究发现:大蒜素对化疗药物有增敏作用,而且大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞中的HPV18病毒基因序列中的癌基因E6 的表达。本研究在实验室前期研究的基础上,探讨了大蒜素与顺铂单独及联合应用对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并且观察这两种药物是否能对整合入Hela 细胞中的HPV18 病毒基因序列中的癌基因E6的表达产生影响,以期对临床上药物治疗与预防宫颈癌寻找更加完善的途径。方法1 细胞培养:常规方法复苏冻存于液氮罐中的宫颈癌Hela 细胞,接种于含10%胎牛血清的RPMI-1640 培养液中培养,置于37℃、5%二氧化碳饱和湿度培养箱内培养,密切观察细胞生长情况,待细胞生长至70%融合时（约2～3天）EDTA 消化传代。2 接种裸鼠:BALB/c-nu 裸鼠30 只,4～6 周龄,18～22g,雌性,于河北医科大学动物中心适应性生长3 天后,取对数生长期的人宫颈癌Hela 细胞,用EDTA 消化后配制成2×107/ml 单细胞悬液,在无菌条件下于裸鼠背侧近右后肢处皮下接种0.2ml/只。接种后14 天可见肿瘤生长,肿瘤呈菜花状,色红、质硬,表面不平,可活动。3 体内裸鼠移植瘤实验:肿瘤细胞植入皮下后第15 天,将裸鼠称重后用随机数字表法分成四大组,6 小组,每小组5 只,进行尾静脉注射,隔日一次,共7 次。药物浓度及具体分组如下:⑴对照组:0.2ml 生理盐水;⑵顺铂组:0.2ml浓度为5mg/kg 的顺铂;⑶大蒜素组:0.2ml 浓度为25mg/kg大蒜素;⑷大蒜素与顺铂联合组:又分为①顺铂+大蒜素低浓度组:0.2ml 浓度为5mg/kg 的顺铂+10mg/kg 大蒜素;②顺铂+大蒜素中浓度组:0.2ml浓度为5mg/kg的顺铂+25mg/kg大蒜素;③顺铂+大蒜素高浓度组:0.2ml 浓度为5mg/kg 的顺铂+40mg/kg 大蒜素。4 肿瘤生长监测:分别于接种第14 天（用药前）、接种第21 天及接种第28 天（停药后）测量肿瘤大小,于用药前后测量裸鼠体重。用游标卡尺测量瘤体最长径（a）与最短径（b）,肿瘤的体积为V（mm3）=πab2/6,描绘移植瘤生长曲
论文目录
相关论文文献
- [1].环氧化酶2抑制剂对宫颈癌Hela细胞中HPV18-E6和COX-2表达的影响[J]. 现代肿瘤医学 2016(24)
- [2].HPV18-E6基因SiRNA对喉癌细胞的生长抑制作用[J]. 现代生物医学进展 2008(10)