中华卵索线虫寄生对棉铃虫血细胞包囊作用的影响

论文摘要

昆虫血细胞具有高效包囊入侵物的能力,但许多寄生蜂或寄生线虫能以不同的方式避免宿主昆虫的包囊作用。目前人们对于寄生蜂和斯氏线虫避免宿主昆虫包囊作用的机理已研究的较为清楚,而对于索科线虫这类昆虫寄生虫避免宿主昆虫包囊作用机理的研究还很少。在本项研究中,建立了中华卵索线虫/棉铃虫寄生体系,通过注射Sephadex A-25凝胶珠的方法研究了中华卵索线虫寄生对棉铃虫血细胞包囊能力的影响。由于包囊是一种细胞免疫反应,血细胞的数量将直接影响到包囊过程能否正常进行,因此我们也研究了线虫寄生对宿主血细胞数（包括血细胞总数、浆细胞数、粒细胞数、珠细胞数）的影响。浆细胞是参与包囊的最主要的细胞,它的延展功能以及相关的细胞骨架的功能是包囊形成的基本条件,因此我们也研究了线虫寄生对浆细胞延展和浆细胞骨架的影响。主要实验结果如下:1)中华卵索线虫寄生显著抑制了棉铃虫的包囊能力。线虫寄生后,反映包囊能力的包囊指数与对照组相比,在48h达显著（P.≤0.05）,24h,72h,96h达到极显著（P≤0.01）。随着感染时间的延长,感染组包囊指数不断下降,在96h仅为对照组的一半。2)中华卵索线虫显著提高了血细胞总数和浆细胞数。在寄生后的所有时间点,寄生组的血细胞总数均显著高于对照组:在24h72h,寄生组的血细胞总数呈上升的趋势并在72h达最大值;72h之后,呈下降趋势并在144h达到最低。浆细胞的数量在寄生后的所有时间点均高于对照组。粒细胞在寄生后72h显著高于对照。珠细胞数在24h显著高于对照。3)中华卵索线虫寄生对浆细胞的延展率影响不显著,但浆细胞的延展形态出现异常。在感染后120h、144h浆细胞中出现大量排列整齐的圆形颗粒,但这种颗粒的本质还不清楚。4)浆细胞骨架出现异常。感染24h、48h,浆细胞骨架出现环形点状结构,在144h浆细胞骨架出现大量空泡样结构,在相差镜下也存在相同的结构。通过上述实验,我们初步揭示了中华卵索线虫避免棉铃虫包囊作用的机理:中华卵索线虫主动抑制棉铃虫的包囊作用;抑制的方式可能是通过破坏宿主血细胞的细胞骨架,从而降低血细胞的延展能力及形成包囊的能力。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 昆虫免疫系统简介
• 1.1.1 昆虫体液免疫系统
• 1.1.2 昆虫细胞免疫系统
• 1.1.3 鳞翅目昆虫血细胞的类型
• 1.1.4 免疫系统对病原体的识别
• 1.1.5 包囊形成过程
• 1.2 寄生物避免包囊的机制
• 1.3 包囊的研究方法
• 1.4 本课题的背景和意义
• 第二章 实验材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验昆虫及线虫
• 2.1.2 主要药品与试剂
• 2.1.3 溶液的配制
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 试验设计
• 2.2.2 棉铃虫血细胞形态的观察与鉴定
• 2.2.3 线虫寄生对棉铃虫血细胞包囊能力的影响
• 2.2.4 线虫寄生对棉铃虫血细胞数量的影响
• 2.2.5 线虫寄生对棉铃虫浆细胞延展率的影响
• 2.2.6 线虫寄生对棉铃虫浆细胞骨架的影响
• 2.2.7 实验数据分析
• 第三章 实验结果与分析
• 3.1 棉铃虫血细胞种类的观察与确定
• 3.2 线虫寄生对棉铃虫血细胞包囊能力的影响
• 3.3 线虫寄生对棉铃虫血细胞数量的影响
• 3.3.1 线虫寄生对棉铃虫血细胞总数的影响
• 3.3.2 线虫寄生对棉铃虫浆细胞数量的影响
• 3.3.3 线虫寄生对棉铃虫粒细胞数量的影响
• 3.3.4 线虫寄生对棉铃虫珠细胞数量的影响
• 3.4 线虫寄生对棉铃虫浆细胞延展率的影响
• 3.5 线虫寄生对棉铃虫浆细胞细胞骨架的影响
• 第四章 讨论
• 4.1 棉铃虫血淋巴的采集和血细胞的特点
• 4.2 线虫主动抑制棉铃虫血细胞包囊
• 4.2.1 包囊指数的意义
• 4.2.2 线虫以主动的方式抑制血细胞的包囊
• 4.3 线虫寄生影响棉铃虫血细胞数量
• 4.3.1 线虫影响血细胞总数
• 4.3.2 线虫影响浆细胞数量
• 4.3.3 线虫影响粒细胞数量
• 4.3.4 线虫影响珠细胞数量
• 4.4 线虫寄生影响浆细胞延展率
• 4.5 线虫寄生影响了浆细胞骨架
• 4.6 小结
• 参考文献
• 待发表论文
• 致谢