依达拉奉对脑死亡状态下SD大鼠血清TNF-α、IL-6变化及肝脏NF-κB的表达的影响

依达拉奉对脑死亡状态下SD大鼠血清TNF-α、IL-6变化及肝脏NF-κB的表达的影响

论文摘要

目的利用脑死亡供者提供器官进行移植成为缓解供体来源短缺的有效途径,而目前对于脑死亡状态对各个器官功能影响的机制,研究仍不深入。本实验旨在探讨脑死亡动物模型的建立和维持,观察依达拉奉对脑死亡状态下SD大鼠肝脏功能、形态,血清TNF-α、IL-6及肝脏核因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法健康成年SD大鼠24只,雌雄不拘,体重220-280克,3-4月龄,随机分成四组(n=6),假手术组(C组);脑死亡组(B组);依达拉奉干预组1(I1组,3mg/kgiv脑死亡诱导前给药);依达拉奉干预组2(I2组,3mg/kgiv确认脑死亡后给药)。所有大鼠行气管切开后行气管内插管,颅骨钻孔置管,股、动静脉置管后,B组、I1组、I2组应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型并在判定为脑死亡后维持6h,C组假手术后维持6h。于脑死亡诱导前(T1),判定为脑死亡时(T2,C组在假手术后1h采血),确认脑死亡后6h(T3),股动脉采血测血清AST、ALT、IL-6、TNF-α水平。首次确认脑死亡6h后开腹取肝脏组织苏木素-伊红染色观察肝脏组织形态变化。免疫组化染色观察NF-κB蛋白的表达水平。结果与C组比较,T3时B组、I1组、I2组血清ALT、AST水平升高(P<0.05);与B组比较,T3时I1组、I2组血清ALT、AST水平升高幅度较小(P<0.05);与T1比较,T3时B组、I1组、I2组ALT、AST水平明显升高(P<0.05)。与C组比较,B组、I1组、I2组血清TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05);与B组比较,I1组、I2组血清TNF-α和IL-6水平升高幅度较小(P<0.05);与T1比较,B组、I1组、I2组TNF-α和IL-6水平白T2时即有升高,T3时升高幅度较T2时大(P<0.05)。肝脏NF-κB蛋白表达的改变:肝脏组织中NF-κB在C组表达弱且分散,B组、I1组、I2组与C组相比NF-κB表达均有增高(P<0.05);B组表达明显强于I1组、I2组(P<0.05)。光镜下:C组肝细胞形态结构正常;B组肝细胞体积变大,胞浆疏松,部分细胞水肿明显;I1、I2组可见肝细胞轻度水肿,基本形态正常。结论1.应用改进的缓慢间断颅内加压法并持续监测AAI制作SD大鼠脑死亡模型,成功率和可重复性高,更符合临床脑死亡的发展过程,经有效的呼吸和循环支持,脑死亡状态可稳定维持。2.脑死亡可导致SD大鼠肝脏的损伤,随着脑死亡时间的延长可出现形态学改变。3.脑死亡可导致SD大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-6释放增加,肝脏组织NF-κB蛋白表达增加,使用依达拉奉干预后炎症因子TNF-α、IL-6释放减少,肝脏组织NF-κB蛋白表达降低。4.依达拉奉对SD大鼠脑死亡肝损伤具有一定保护作用。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 目录
  • 缩略词表
  • 第一章 前言
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 仪器与试剂
  • 2.2 动物选择及分组
  • 2.3 SD大鼠脑死亡模型的建立
  • 2.4 观察及检测指标
  • 2.5 统计方法
  • 第三章 实验结果
  • 3.1 SD大鼠脑死亡模型的建立情况
  • 3.2 血清ALT、AST水平
  • 3.3 血清TNF-α、IL-6水平
  • 3.4 肝脏NF-κB蛋白表达的改变
  • 3.5 光镜下肝脏结构变化
  • 第四章 讨论
  • 4.1 SD大鼠脑死亡模型的建立
  • 4.2 脑死亡后的肝脏功能及形态学变化
  • 4.3 脑死亡与炎症反应
  • 4.4 依达拉奉对肝脏的保护作用
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 综述
  • 致谢
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