论文摘要
目的:观察不剂量含碘中药复方对于实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠血清中的甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化酶抗体(TpoAb)、白介素-1、4、6及TNF-α以及甲状腺组织的超微结构,甲状腺组织病理形态学,甲状腺细胞凋亡相关调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的影响,进而筛选出治疗AIT的最佳含碘中药复方剂量,并从多靶点探讨其作用机制。材料与方法:选取普通级SD雌性大鼠75只,随后一周进行适应性喂养,然后随机选取15只做为正常对照组,剩余的做为造模组。第二周对照组饮用蒸馏水,造模组饮用的高碘水,浓度为500g/L。第四周起造模组进行初次免疫,应用由完全弗氏佐剂(CFA)和TG(TG:CFA=1:1)进行充分乳化成油包水状,在双后足皮下进行多点注射两次,间隔两天后再进行一次,每次每只大鼠注射100μg。于第五周在后背皮下予以多点注射经不完全弗氏佐剂(IFA)乳化的TG(TG:IFA=1:1),每次每只注射100μg,并连续进行四周,作为加强免疫。第八周成模。将成模的大鼠随机分为模型对照组(13只)、中药治疗低剂量组(14只),中药治疗中剂量组(14只),中药治疗高剂量组(14只)。分组后进行中药复方灌胃治疗6周后,处死大鼠,经腹主动脉取血并采用以下方法进行检测:(1)酶联免疫法(ELISA法):用来检测各组大鼠的血清中的TgAb、TpoAb、TNF-α、IL-1、4、6的变化(2)免疫组化法:用来检测各组大鼠的甲状腺组织中的细胞凋亡相关调控蛋白Fas/FasL和Bcl-2/Bax的变化;(3)取出大鼠的双侧甲状腺,应用电子秤进行称量,观察得出各组的重量并进行统计学分析。(4)光镜下观察各组大鼠的甲状腺组织病理形态学的变化;(5)电镜下观察各组大鼠的甲状腺组织超微结构改变(6)采用SPSS13·0统计软件,并满足方差齐性和正态性,采用方差分析进行组间的比较,各组数据采用x±s进行表示,并对各组的检测结果进行统计学分析。结果:中药高、中、低剂量组与模型组比较:中药各治疗组大鼠的血清中的甲状腺自身抗体TgAb、TpoAb以及IL-1、4、6、TNF-α的水平均有明显的降低,甲状腺组织的Fas/FasL、Bax的表达均减少,甲状腺组织的Bcl-2的表达增多,大鼠的甲状腺重量明显减轻。光镜下观察中药治疗组的甲状腺组织结构的损伤轻于模型组。电镜下观察甲状腺组织的超微结构改变中药治疗组轻于模型组。以上数据中,中药高,中剂量组的作用均优于低剂量组,且高,中剂量组之间无明显差异。结论1.不同剂量的软坚消瘿汤具有降低EAT大鼠的血清中的甲状腺自身抗体水平及相关细胞因子水平的作用。2.不同剂量的软坚消瘿汤具有减轻EAT大鼠甲状腺超微病理损伤的作用。3.不同剂量的软坚消瘿汤具有减轻EAT大鼠甲状腺病理损伤的作用。4.不同剂量的软坚消瘿汤具有减轻EAT大鼠甲状腺细胞凋亡的作用。在以上实验结果中,中药中,高剂量组作用均优于低剂量组,高,中剂量组之间无明显差异。
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