Sorafenib联合紫杉醇对人肝癌细胞株BEL-7402抑制作用的基础研究

论文摘要

原发性肝癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,目前在肝癌的治疗上,尤其对于晚期肝癌,药物为主要的治疗手段之一。Sorafenib是多靶点抗肿瘤药,具有抑制肿瘤细胞的生长和肿瘤血管形成的双重抗肿瘤作用。它是首个可以延长晚期肝癌患者总生存时间的靶向治疗药物。但是靶向药物单药有效率仅有15%-19%,因此其与传统化疗药物的联合效应成为临床研究中的重要课题。国内外文献报道,靶向药物与化疗药物的联合不仅是简单的叠加效应,而可能存在最合理的联合方案和最佳给药顺序。因此,研究Sorafenib与传统化疗药物的联合作用机制,寻找能够进一步提高疗效的最佳给药方案,对于肝癌及其他的实体肿瘤的综合治疗具有很大的现实意义。目的:研究Sorafenib联合紫杉醇不同给药顺序作用于人肝癌细胞株BEL-7402产生的不同抑制效应,初步探讨产生这种差异的机制,为原发性肝癌的综合治疗提供基础理论依据。方法:用透射电镜观察经Sorafenib处理后的人肝癌细胞株BEL-7402的细胞形态;采用MTT的方法检测Sorafenib对BEL-7402在24h、48h及72h的IC50,绘制抑制率-浓度曲线。流式细胞术检测Sorafenib不同给药顺序对BEL-7402细胞周期和凋亡率的影响。Western印迹分析法检测不同给药顺序处理后的BEL-7402细胞Bcl-2的表达情况。结果:1.透射电镜观察经Sorafenib处理后的人肝癌细胞株BEL-7402,细胞染色质固缩边集,核碎裂,形成凋亡小体。2.MTT法检测Sorafenib对BEL-7402在24h、48h及72h的IC50分别为9.17μg/ml,2.43μg/ml,0.52μg/ml,且相同的处理时间内随药物浓度的增加抑制率逐渐增加。3.流式细胞术检测不同给药顺序对细胞周期和凋亡率的影响发现:单独紫杉醇作用组使细胞主要阻滞在G2-M期;单独Sorafenib作用组S期细胞比例明显增高,G0-G1期比例明显减少。在Sorafenib和紫杉醇不同给药顺序的联合处理组,发现各组的G0-G1期均不同程度的缩短,在后加Sorafenib组G2-M期延长,S期变化不明显,凋亡率显著增加;先加Sorafenib组S期显著的延长（84.01%）,而G2-M期变化不明显,凋亡率显著低于后加Sorafenib组;同时加入两药组S期和G2-M期均有延长,凋亡率介于其他两组之间。4. Western印迹分析不同给药顺序细胞表达Bcl-2的水平发现在紫杉之后给予Sorafenib的细胞Bcl-2明显降低,其余组未见明显差别。结论:1.Sorafenib能够影响人肝癌细胞株BEL-7402的细胞周期,诱导其凋亡,且降低Bcl-2的表达可能为Sorafenib诱导凋亡的机制之一。2.Sorafenib能够抑制BEL-7402的增殖,且这种抑制作用呈时间和剂量的依赖性。3.Sorafenib联合紫杉醇作用于BEL-7402,先给予Sorafenib组细胞凋亡率相对低,而先给予紫杉醇组能够获得较高的凋亡率和较低的Bcl-2的表达,产生这种作用可能是因为两种药物作用于细胞的不同周期,且对Bcl-2表达的影响不同。因此提示在原发性肝癌的临床综合治疗中,先应用紫杉醇诱导再序贯给予Sorafenib可能获得更好疗效。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢