本文主要研究内容
作者来涛（2019）在《DENV-2感染的HUVECs与巨噬细胞相互作用对主要炎性细胞因子产生的影响》一文中研究指出：目的:研究人原代脐静脉内皮细胞(primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)被登革热2型病毒(Dengue virus 2,DENV-2)感染后,与单核细胞诱导培养的人巨噬细胞(Macrophages,M?)共培养,观察对两种细胞分别产生主要炎性因子的影响。方法:密度梯度离心法从人体外周血浓缩白细胞中分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),贴壁得到单核细胞,通过巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激,流式细胞术检测CD14~+CD11b~+细胞纯度,得到M?。DENV-2感染HUVECs,Real-time PCR检测HUVECs细胞内病毒NS1 mRNA表达量变化。HUVECs被DENV-2感染后,通过Transwell法与M?共培养,对照组用磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate S1P)1型特异性受体激动剂CYM-5442预处理24h去除药物后感染病毒。Real-time PCR分别检测HUVECs产生的IL-6、IL-8 mRNA和M?产生的IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNA的逆转录水平;ELISA双抗体夹心法检测培养上清中上述细胞因子的表达。结果:HUVECs被感染DENV-2后,细胞内NS1基因转录水平逐渐上升,24h时达峰值(2.66±0.53,P<0.05)后下降。流式细胞术检测M?纯度为89.16±2.07%。HUVECs被DENV-2感染后IL-6、IL-8 mRNA转录水平均上调,24h mRNA转录量达到峰值;IL-6为16.1±0.17,IL-8为29.76±0.58。未感染组转录水平IL-6为1.46±0.67,IL-8为1.6±0.54。M?被感染后IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNA表达量均有明显上升,在24h mRNA IL-6表达量为45.82±3.72,IL-8为52.34±1.69(12h),TNF-α为28.94±1.75,IL-1β为30.96±1.44;未感染组转录水平IL-6为1.16±0.22,IL-8为1.15±0.21,TNF-α为1.11±0.09,IL-1β为1.47±0.31。HUVEC与M?共培养后上述细胞因子在各时间点的转录水平有所下降,依然明显高于未感染对照组。CYM-5442预处理后,共培养组感染的HUVEC IL-6、IL-8的mRNA转录水平明显下降(P<0.01),M?中IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNA转录水平也有下调(P<0.01)。DENV-2感染的HUVEC与巨噬细胞共培养与未感染对照组相比,培养上清中IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-α、IL-1β分泌量明显上升。结论:DENV-2能够感染原代HUVECs,且被DENV-2感染的HUVEC能够活化M?并促使其分泌大量的IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β,同时CYM-5442预处理HUVECs后,能够减少病毒感染HUVECs引起的主要细胞因子分泌量,一定程度减轻内皮细胞的损伤。
Abstract
mu de :yan jiu ren yuan dai qi jing mai nei pi xi bao (primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)bei deng ge re 2xing bing du (Dengue virus 2,DENV-2)gan ran hou ,yu chan he xi bao you dao pei yang de ren ju shi xi bao (Macrophages,M?)gong pei yang ,guan cha dui liang chong xi bao fen bie chan sheng zhu yao yan xing yin zi de ying xiang 。fang fa :mi du ti du li xin fa cong ren ti wai zhou xie nong su bai xi bao zhong fen li chan ge he xi bao (peripheral blood mononuclear cell,PBMC),tie bi de dao chan he xi bao ,tong guo ju shi xi bao ji la ci ji yin zi (M-CSF)ci ji ,liu shi xi bao shu jian ce CD14~+CD11b~+xi bao chun du ,de dao M?。DENV-2gan ran HUVECs,Real-time PCRjian ce HUVECsxi bao nei bing du NS1 mRNAbiao da liang bian hua 。HUVECsbei DENV-2gan ran hou ,tong guo Transwellfa yu M?gong pei yang ,dui zhao zu yong lin suan qiao an chun (sphingosine-1-phosphate S1P)1xing te yi xing shou ti ji dong ji CYM-5442yu chu li 24hqu chu yao wu hou gan ran bing du 。Real-time PCRfen bie jian ce HUVECschan sheng de IL-6、IL-8 mRNAhe M?chan sheng de IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNAde ni zhuai lu shui ping ;ELISAshuang kang ti ga xin fa jian ce pei yang shang qing zhong shang shu xi bao yin zi de biao da 。jie guo :HUVECsbei gan ran DENV-2hou ,xi bao nei NS1ji yin zhuai lu shui ping zhu jian shang sheng ,24hshi da feng zhi (2.66±0.53,P<0.05)hou xia jiang 。liu shi xi bao shu jian ce M?chun du wei 89.16±2.07%。HUVECsbei DENV-2gan ran hou IL-6、IL-8 mRNAzhuai lu shui ping jun shang diao ,24h mRNAzhuai lu liang da dao feng zhi ;IL-6wei 16.1±0.17,IL-8wei 29.76±0.58。wei gan ran zu zhuai lu shui ping IL-6wei 1.46±0.67,IL-8wei 1.6±0.54。M?bei gan ran hou IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNAbiao da liang jun you ming xian shang sheng ,zai 24h mRNA IL-6biao da liang wei 45.82±3.72,IL-8wei 52.34±1.69(12h),TNF-αwei 28.94±1.75,IL-1βwei 30.96±1.44;wei gan ran zu zhuai lu shui ping IL-6wei 1.16±0.22,IL-8wei 1.15±0.21,TNF-αwei 1.11±0.09,IL-1βwei 1.47±0.31。HUVECyu M?gong pei yang hou shang shu xi bao yin zi zai ge shi jian dian de zhuai lu shui ping you suo xia jiang ,yi ran ming xian gao yu wei gan ran dui zhao zu 。CYM-5442yu chu li hou ,gong pei yang zu gan ran de HUVEC IL-6、IL-8de mRNAzhuai lu shui ping ming xian xia jiang (P<0.01),M?zhong IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNAzhuai lu shui ping ye you xia diao (P<0.01)。DENV-2gan ran de HUVECyu ju shi xi bao gong pei yang yu wei gan ran dui zhao zu xiang bi ,pei yang shang qing zhong IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-α、IL-1βfen bi liang ming xian shang sheng 。jie lun :DENV-2neng gou gan ran yuan dai HUVECs,ju bei DENV-2gan ran de HUVECneng gou huo hua M?bing cu shi ji fen bi da liang de IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β,tong shi CYM-5442yu chu li HUVECshou ,neng gou jian shao bing du gan ran HUVECsyin qi de zhu yao xi bao yin zi fen bi liang ,yi ding cheng du jian qing nei pi xi bao de sun shang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自贵州医科大学的来涛，发表于刊物贵州医科大学2019-07-01论文，是一篇关于登革热病毒论文,人脐静脉内皮细胞论文,巨噬细胞论文,细胞因子论文,免疫调节论文,贵州医科大学2019-07-01论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自贵州医科大学2019-07-01论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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