鸭脂联素及其受体基因的克隆、表达和功能的研究

论文摘要

本文以昆山麻鸭、樱桃谷鸭、高邮鸭、荆江麻鸭、金定鸭、山麻鸭、龙白鸭和白羽番鸭为实验材料,通过对鸭脂联素及其受体基因的克隆、表达规律、脂联素基因的多态性及其与脂肪等性状相关性的研究。主要研究结果如下:（1）克隆了鸭脂联素基因的DNA序列及其受体AdipoR1、AdipoR2的cDNA序列（Accession No:DQ452618、DQ872901、DQ355029）,并与鸡及哺乳类动物等物种脂联素及其受体基因的同源性比较及进化分析,表明这些基因的进化与物种进化相一致,反映了这些基因在进化中的保守性及生理功能的重要性。（2）半定量PCR揭示鸭脂联素及其受体基因在所测组织中均表达。脂联素基因高度表达于脂肪、肌胃、小肠、心、骨骼肌,中度表达于肺、腺胃、卵巢、脾组织中,而在肝、肾、间脑组织中为低度表达;AdipoR1基因高度表达于脾、脂肪和肺组织,中度表达于心、腺胃、肌胃、卵巢,而在肝、骨骼肌、小肠、间脑、肾组织中表达较低;AdipoR2基因高度表达于脂肪和肺组织,在其它组织中表现为中度表达,且组织间差异不大。这些结果说明了脂联素及其受体基因在动物各组织中所起的重要性。（3）根据鸭脂联素基因开放阅读框序列设计5对引物,用PCR-SSCP方法进行单核苷酸多态性分析。结果发现引物4扩增片段上共检测到G430A、A457G、C507T、T523C、T540C、C576T、C579T 7个单碱基突变,前3个突变导致氨基酸A144T、I153V、Y175H 3处发生有义突变。鸭群中表现出8种基因型（AA、AB、AC、BB、BC、CC、DD、DE）。统计结果发现8种基因型在8个鸭品种间分布存在极显著的差异（P<0.01）。除金定鸭外,其他品种均处于Hardy-Weinberg平衡状态。群体遗传分析表明金定鸭的纯合度最高,高邮鸭最低,其他各群体的纯合度较相近;金定鸭为低度多态,高邮鸭为高度多态,其他品种为中度多态。（4）将昆山麻鸭、樱桃谷鸭的不同基因型的腹脂等屠宰性状进行方差分析,结果昆山麻鸭的AA型皮脂重和皮脂率显著高于AC;樱桃谷鸭的BC型皮脂率、腹脂重、腹脂率显著高于AC、CC型。表明脂联素基因可能是影响鸭脂肪代谢的主效基因或与控制该性状的主效基因连锁,能够用于对鸭脂肪性状进行分子标记辅助选择。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一部分文献综述
• 1.1 鸭体脂沉积原理及控制方法
• 1.2 脂联素基因研究进展
• 1.3 分子遗传标记在育种中的应用
• 1.4 本研究的目的、意义和主要内容
• 第二部分材料与方法
• 2.1 实验用鸭种来源及性状测定
• 2.2 主要仪器设备
• 2.3 主要试剂和药品
• 2.4 主要实验方法
• 2.5 实验数据的统计分析
• 第三部分结果与分析
• 3.1 脂联素基因克隆、序列分析和 Southern 杂交
• 3.2 AdipoR1 基因克隆和序列分析
• 3.3 AdipoR2 基因克隆和序列分析
• 3.4 脂联素基因的表达规律
• 3.5 AdipoR1 基因的表达规律
• 3.6 AdipoR2 基因的表达规律
• 3.7 脂联素基因与脂肪等性状的相关性分析
• 第四部分讨论
• 4.1 鸭脂联素和脂联素受体的基因克隆及序列分析
• 4.2 鸭脂联素和脂联素受体基因表达的半定量 RT-PCR 分析
• 4.3 脂联素基因单核苷酸多态性及基因型频率在不同品种间的差异
• 4.4 脂联素基因多态性与鸭体组成性状的关系
• 第五部分 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文及序列目录