雌二醇代谢产物对肝星状细胞增殖和TGF-β1、CTGF表达的影响

论文摘要

研究背景肝纤维化是慢性肝病的共同病理特征,是肝硬化的前期表现,严重威胁着人类的身体健康,目前尚无有效的治疗方法。肝纤维化的主要表现为细胞外基质过度沉积,常伴随着肝星状细胞的活化和增殖。转化生长因子-β1（TGF-β1）被认为是最强的致纤维化细胞因子,TGF-β1及其下游信号分子结缔组织生长因子（CTGF）在调控肝纤维化的过程中起着重要的作用。临床流行病学资料显示肝硬化及其并发症存在性别差异。在肝纤维化的细胞模型和动物模型也证实雌激素具有抗肝纤维化的作用。雌激素通常是通过雌激素和雌激素受体（ER）的相互作用发挥重要的生理功能,过量长期使用也将产生相应的副作用。近来有研究证明雌二醇代谢产物具有抑制内皮细胞的增殖和抗氧化作用,具有一定的心、肾保护作用,推测雌激素抗肝纤维化的作用也有可能是通过代谢产物发挥的。国内外的学者已经证实,雌二醇代谢产物不能与ER结合,对生物体不会产生雌性化效应,故适用于男女性患者,可以避免雌二醇雌性化的副作用,因此在疾病防治方面有其更广泛的应用前景。研究目的研究雌二醇代谢产物:2-羟雌二醇（2OHE）、2—甲氧雌二醇（2MeOE）、4-羟雌二醇（4OHE）对人肝星状细胞（LX-2）增殖、对转化生长因子β1（TGF-β1）及结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响,进一步探讨雌二醇代谢产物抗肝纤维化的作用机制,为雌二醇代谢产物临床治疗肝纤维化提供理论基础。研究方法人肝星状细胞（LX-2）随机分为13组,分别加入三种不同浓度(10-9M,10-8M,10-7M)的雌二醇（E2）、雌二醇代谢产物（2OHE,4OHE,2MeOE）,并设阳性对照组。孵育48h后,检测以下指标:1)MTT法检测雌二醇及代谢产物对LX-2增殖的影响;2)采用RT-PCR技术方法检测细胞因子TGF-β1、CTGFmRNA的表达;3)采用细胞免疫化学法检测细胞因子TGF-β1、CTGF蛋白的表达,以明确雌二醇代谢产物抗肝纤维化的作用机理。研究结果1)药物浓度在10-9M～10-7M的作用下,雌二醇代谢产物具有抑制LX-2增殖的作用,并成剂量依赖关系（P=0.000）;在同一药物浓度干预下,雌二醇代谢产物与E2组相比,差别有显著性（P＜0.05）,其中2MeOE组的生物学活性最强（P＜0.01）,但2OHE组和4OHE组比较无显著性差异（P＞0.05）。2)药物浓度在10-9M～10-7M的作用下,雌二醇代谢产物能抑制细胞因子TGF-β1、CTGFmRNA的表达,并成剂量依赖关系（P=0.000）;在同一药物浓度干预下,雌二醇代谢产物与E2组相比,差别显著（P＜0.05）,2MeOE组的生物学活性最强（P＜0.05）,但2OHE组和4OHE组无显著性差异（P＞0.05）。3)药物浓度在10-7M的作用下,各实验组的TGF-β1、CTGF的蛋白表达均下降,2MeOE的生物学活性最强（P＜0.05）,但2OHE组和4OHE组比较无统计学差异。研究结论1)雌二醇代谢产物对HSCs的增殖具有抑制作用。2)雌二醇代谢产物可以抑制HSCs TGF-β1及其下游信号CTGFmRNA和蛋白的表达。3)与普通的雌二醇比较,雌二醇代谢产物对HSCs增殖的抑制,及对HSCsTGF-β1、CTGF表达的抑制作用也更强,其中2MeOE的作用最强。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词表
• 前言
• 第一部分:雌二醇代谢产物对肝星状细胞增殖的影响
• 背景
• 材料与方法
• 结果
• 第二部分 雌二醇代谢产物对肝星状细胞TGF-B1、CTGF表达的影响
• 背景
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述一
• 综述二
• 致谢