福寿螺不同地理种群抗药性及其生理生化差异研究

论文摘要

本文研究了广西、海南、广东、湖南等省区的10个福寿螺地理种群对杀螺胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（简称甲维盐）、三苯基乙酸锡和四聚乙醛等4种药剂的抗性水平,并以南宁安吉种群为对象,研究其对上述4种药剂的抗性的季节性变化,初步探索了福寿螺乙酰胆碱酯酶、多功能氧化酶、酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和纤维素酶的活力与抗药性的关系。为开展药剂的抗性风险评价和抗性机理研究打下了基础,为杀螺剂的科学合理使用提供了依据。取得的主要结果如下：1、采用浸泡杀螺法,分别在2009、2010年测定了4种药剂对广西、海南、广东、湖南等省区的10个福寿螺地理种群的毒力。综合两年监测结果,不同地理种群的抗性水平存在着较大差异,而且年际间也存在差异。其中对杀螺胺,抗性水平高低次序依次为：浏阳>横县>安吉>东兴>儋州>桂林>岑溪>融安>百色>珠海,以珠海种群最敏感,其2009年的LC50值为0.2930mg/L,而以浏阳种群的抗性水平最高,与珠海种群比较,其相对抗性倍数达到了3.68倍：对甲维盐,抗性水平高低次序依次为：儋州>安吉>浏阳>横县>珠海>融安>东兴>岑溪>桂林>百色,以百色种群最敏感,其2009年的LC50值为0.0920mg/L,而儋州种群的抗性水平最高,相对抗性倍数达4.81倍；对三苯基乙酸锡,抗性水平高低次序依次为：儋州>浏阳>安吉>桂林>岑溪>横县>东兴>融安>百色,以百色种群最敏感,其LC5o值为0.2543mg/L,儋州种群的抗性水平最高,相对抗性倍数达6.43倍；对四聚乙醛,抗性水平高低次序依次为：安吉>浏阳>儋州>岑溪>融安>横县>桂林>东兴>百色,以百色种群最敏感,其LC5o值为0.4573mg/L,安吉种群的抗药性水平最高,相对抗性倍数达到了4.26倍。2、不同年份、不同季节测定南宁安吉种群对杀螺胺、甲维盐、三苯基乙酸锡和四聚乙醛4种药剂的敏感性结果表明,福寿螺对同一药剂的敏感性在不同季节不相同。其中对杀螺胺的敏感性高低次序为：春季>夏季>秋季、冬季,春季测得的LC50值为0.7026mg/L,冬季测得的LC50值为0.9322mg/L;同一季节不同年份的敏感性差异不大。对甲维盐敏感性高低次序为：夏季>秋季>春季>冬季,夏季测得的LC50值为0.2019mg/L,冬季测得的LC50值为0.7966mg/L;同一季不同年份的敏感性有所差异。三苯基乙酸锡和四聚乙醛的测定结果表明,春季和冬季福寿螺对这两种药剂极不敏感,在药剂最大溶解度浓度下处理,福寿螺死亡率低于3%,而夏季和秋季测得的LC50值为分别0.7003-0.7431mg/L和1.9489-1.9868mg/L,相对毒力倍数相差至少10倍以上。导致季节性敏感性差异的主要原因为温度对福寿螺取食活动及生理代谢的影响。3、对9个福寿螺地理种群的乙酰胆碱酯酶、多功能氧化酶、酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和纤维素酶活性测定结果表明,不同地理种群各类酶的活力存在一定差异,酶活力与福寿螺对药剂的敏感性之间的关系表现很不一致。乙酰胆碱酯酶活力与福寿螺对4种药剂的敏感性之间呈一定的负相关性,其中与四聚乙醛LC50值的相关系数为0.9165,达极显著水平,与三苯基乙酸锡LC50值的相关系数为0.7687,达显著水平；纤维素酶水解活性与福寿螺对4种药剂的敏感性之间呈一定的正相关性,其中与杀螺胺LC50值的相关系数为0.8741,达极显著水平；多功能氧化酶、酯酶、谷胱廿肽-S-转移酶活力与4种药剂LC50值的相关性不显著。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 福寿螺的分布与扩散
• 1.2 福寿螺在我国的危害情况
• 1.3 防治福寿螺的措施
• 1.4 抗药性监测方法研究
• 1.5 纤维素酶的研究
• 1.6 本实验研究意义与内容
• 1.7 本实验技术路线
• 2 材料与方法
• 2.1 供试材料
• 2.1.1 供试福寿螺
• 2.1.2 供试药剂及生化试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 生物测定方法
• 2.2.2 生化测定方法
• 2.2.2.1 蛋白质标准曲线制作
• 2.2.2.2 酶液提取
• 2.2.2.3 酶源蛋白质含量测定
• 2.2.2.4 乙酰胆碱酯酶活性测定
• 2.2.2.5 谷胱甘肽-S-转移酶活性测定
• 2.2.2.6 酯酶活性测定
• 2.2.2.7 多功能氧化酶活性测定
• 2.2.2.8 纤维素酶水解活性测定
• 3 结果与分析
• 3.1 福寿螺对不同药剂的抗性水平
• 3.1.1 福寿螺不同地理种群对杀螺胺的抗性监测结果
• 3.1.2 福寿螺不同地理种群对甲维盐的抗性监测结果
• 3.1.3 福寿螺不同地理种群对三苯基乙酸锡的抗性监测结果
• 3.1.4 福寿螺不同地理种群对四聚乙醛的抗性监测结果
• 3.2 福寿螺对四种药剂敏感性的季节性变化
• 3.2.1 福寿螺对杀螺胺敏感性的季节变化
• 3.2.2 福寿螺对甲维盐敏感性的季节变化
• 3.2.3 福寿螺对三苯基乙酸锡敏感性的季节变化
• 3.2.4 福寿螺对四聚乙醛敏感性的季节变化
• 3.3 福寿螺生理生化指标测定
• 3.3.1 蛋白质标准曲线制作
• 3.3.2 福寿螺不同地理种群乙酰胆碱酯酶活性与药剂的敏感性关系
• 3.3.2.1 福寿螺不同地理种群的乙酰胆碱酯酶活性
• 50值的相关性'>3.3.2.2 福寿螺不同地理种群乙酰胆碱酯酶活性与四种药剂LC₅₀值的相关性
• 3.3.3 福寿螺不同地理种群多功能氧化酶活性与药剂的敏感性关系
• 3.3.3.1 福寿螺不同地理种群多功能氧化酶活性
• 50值的相关性'>3.3.3.2 福寿螺不同地理种群多功能氧化酶活性与四种药剂LC₅₀值的相关性
• 3.3.4 福寿螺不同地理种群酯酶活性与药剂的敏感性关系
• 3.3.4.1 福寿螺不同地理种群酯酶活性
• 50值的相关性'>3.3.4.2 福寿螺不同地理种群酯酶活性与四种药剂LC₅₀值的相关性
• 3.3.5 福寿螺不同地理种群谷胱甘肽-S-转移酶活性与药剂的敏感性关系
• 3.3.5.1 福寿螺不同地理种群谷胱甘肽-S-转移酶活性
• 50值的相关性'>3.3.5.2 福寿螺不同地理种群谷胱甘肽-S-转移酶活性与四种药剂LC₅₀值的相关性
• 3.3.6 福寿螺不同地理种群纤维素酶水解活性与药剂的敏感性关系
• 3.3.6.1 葡萄糖标准曲线的制作
• 3.3.6.2 福寿螺不同地理种群纤维素酶水解活性
• 50值的相关性'>3.3.6.3 福寿螺不同地理种群纤维素酶水解活性与四种药剂的LC₅₀值的相关性
• 4 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.1.1 福寿螺不同地理种群对四种药剂的抗性差异
• 4.1.1.1 福寿螺不同地理种群对杀螺胺的抗性差异
• 4.1.1.2 福寿螺不同地理种群对甲维盐的抗性差异
• 4.1.1.3 福寿螺不同地理种群对三苯基乙酸锡的抗性差异
• 4.1.1.4 福寿螺不同地理种群对四聚乙醛的抗性差异
• 4.1.2 福寿螺对四种药剂敏感性的季节性差异
• 4.1.3 福寿螺抗药性生理生化差异的研究
• 4.2 讨论
• 4.2.1 不同地理种群抗药性监测的意义
• 4.2.2 选择监测药剂的依据
• 4.2.3 抗性水平评价指标的确定
• 4.2.4 抗性水平的季节性、年际性变化
• 4.2.5 福寿螺抗药性与几类酶的关系
• 4.3 本论文的创新之处
• 4.4 有待进一步研究的问题
• 致谢
• 参考文献
• 附录1
• 附录2