论文题目: 携带人NIS基因和TPO基因的重组腺病毒联合转染肝癌细胞介导放射性碘摄取和有机化的基础研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 影像医学与核医学
作者: 黄蕤
导师: 匡安仁
关键词: 碘同向转运体,甲状腺过氧化物酶,重组腺病毒,基因治疗,放射性,核素治疗
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的: NIS基因转染非甲状腺肿瘤介导放射性核素内放射治疗成为肿瘤基因治疗的又一研究方向。尽管转染了NIS基因的肿瘤细胞或病灶,均能迅速大量摄取放射性碘,但碘在细胞或病灶内停留时间短,疗效不理想。我们利用腺病毒载体将NIS和TPO基因联合转染肝癌细胞,试图延长放射性碘在转染细胞内的储留时间,达到提高疗效的目的。 方法: 1.用RT-PCR方法从Graves’甲亢病人甲状腺组织中扩增出hNIS和hTPO基因,亚克隆到质粒载体,构建成pGEM-Teasy-NIS重组质粒和PBK-CMV-TPO重组质粒,通过酶切和DNA序列分析进行鉴定。 2.将hNIS和hTPO基因分别克隆到腺病毒AdEasier系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,通过在大肠杆菌BJ51 83内同骨架质粒pAdEasy-1同源重组、并在293细胞中包装、扩增,纯化、构建携带hNIS和hTPO的重组腺病毒AdNIS和AdTPO,测定病毒滴度。Western-Blotting检测重组腺病毒AdNIS和AdTPO的表达。 3.AdNIS单独转染,AdNIS和AdTPO联合转染肝癌细胞HepG2,确定最适MOI,动态检测125I的摄取、观测NaClO4对碘摄取抑制情况、TCA蛋白沉淀检测碘化蛋白、动态检测碘排泄情况,细胞克隆形成实验评价单独和联合转染131I细胞毒性作用。
论文目录:
论文部分
缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人 NIS、TPO基因的克隆与序列分析
材料与方法
结果
讨论
第二部分 重组腺病毒 AdNIS和 AdTPO构建和鉴定
材料与方法
结果
讨论
第三部分 AdNIS和 AdTPO体外转染 HepG2介导放射性碘摄取和有机化的研究
材料与方法
结果
讨论
第四部分 AdNIS荷瘤裸鼠体内介导放射性碘摄取和显像的初步研究
材料与方法
结果
讨论
全文总结
参考文献
文献综述
NIS 基因转染肿瘤细胞介导~(131)I治疗
参考文献
基因转染介导核素内放射治疗恶性肿瘤
参考文献
致谢
在校期间发表文章
附录
发布时间: 2005-11-09
相关论文
- [1].人甲状腺钠/碘共转运体基因的克隆、表达质粒的构建及其转染卵巢癌细胞后介导的～（131）I治疗的研究[D]. 崔景秋.天津医科大学2004
- [2].PET-CT脑功能成像对足太阳膀胱经、足阳明胃经入脑后定位的实验研究[D]. 邵广瑞.山东大学2005
- [3].长循环脂质体介导放射反义治疗乳腺癌基础研究[D]. 马超.四川大学2005
- [4].功能CT评价肝硬化储备功能及其与肝癌肿瘤血管生成相关性的研究[D]. 杨汉丰.四川大学2005
- [5].噬菌体随机环7肽库筛选胰岛素受体高亲和肽作为肝细胞癌靶向载体[D]. 唐恭顺.四川大学2005
- [6].～（131）Ⅰ照射与甲状腺癌失分化关系的研究及其失分化相关基因的筛查[D]. 李志刚.第四军医大学2006
- [7].维甲酸和曲古抑素联合诱导甲状腺癌细胞分化基础研究及维甲酸诱导分化型甲状腺癌的初步临床应用[D]. 袁耿彪.四川大学2006
- [8].hNIS基因组织特异性表达介导肝癌核素显像与治疗[D]. 陈立波.上海交通大学2007
- [9].Egr-IFNγ基因治疗联合放射性核素～（125）I-脱氧尿嘧啶核苷治疗抑瘤效应的实验研究[D]. 赵敬国.吉林大学2007
- [10].重组腺病毒感染钠碘转运蛋白基因治疗前列腺癌[D]. 丁晔磊.第二军医大学2007