论文摘要
天然沸石是一种性质独特、用途广泛的功能性材料,在生命科学领域中极具应用潜力。本研究以天然斜发沸石为试验材料,采用化学和X射线衍射法对其原料矿粉和改性产品品位及在体外模拟消化道pH环境中的稳定性进行分析评价；比较不同品位与粒度以及改性天然斜发沸石对肉鸡的营养和其它生物学效应；从肉鸡生产性能、血清二胺氧化酶与一氧化氮、胸腺细胞凋亡等方面研究沸石对产气荚膜梭菌感染所致负面影响的缓解作用,并探索相关机制；从肉鸡生产性能、铅在肌肉中的残留、血清HSP70的0D值、细胞凋亡相关基因的表达等指标着手,探讨天然斜发沸石对铅毒性的减控作用及相关机制。1、天然沸石的品位及稳定性评价采集两种天然沸石样品,进行改性处理和模拟消化道pH环境以及加NH4+处理,采用X射线衍射、阳离子交换容量（吸铵值）和电镜扫描进行测定分析。结果表明：样品I的主成分为斜发沸石,含量达50%以上,其杂质主要是长石和水云母,并含有部分闪石和二氧化硅,化学成分主要是Si和Al,并含有一定量的Ca、Fe、K、Mg、Na;样品Ⅱ的斜发沸石含量较低,杂质主要是长石和蒙脱石。经模拟消化道环境处理后,样品I斜发沸石的含量稍有下降,Pb含量分别下降了39.2%和36.8%；样品II斜发沸石含量未改变,但出现了海泡石。改性提高了沸石的阳离子交换容量；结果提示试验所用沸石具有良好的稳定性。2、不同品位及改性沸石对肉鸡生产性能、养分表观代谢率、血液生化指标的影响将504只1日龄AA肉鸡随机分为四个处理,每个处理6个重复,分别饲喂对照日粮,对照日粮添加5%普通沸石、高品位沸石和高品位改性沸石的试验日粮,研究不同品位沸石及改性沸石对肉鸡生产性能、养分表观消化率、血液生化指标的影响。结果表明：添加沸石后肉鸡后期的体增重分别比对照组提高了2.05%、7.62%（P<0.05）和4.73%（P<0.05）,饲料转化率改善了0.98%、5.39%（P<0.05）和3.43%（P<0.05）；高品位和改性高品位沸石使肉鸡全期的体重提高了4.10%和2.41%,饲料转化率均改善1.56%；但添加沸石降低了肉鸡前期体重,而提高了饲料转化率（P<0.05）。与对照组相比,三种沸石使饲料干物质的表观消化率分别提高了4.05%、5.86%及3.03%,粗蛋白消化率分别提高了2.25%、6.16%和11.410%,能量消化率分别提高了3.59%、7.60%和7.16%；但未能提高钙的消化率,高品位和改性高品位沸石提高了磷的消化率；除蛋氨酸外,添加沸石提高了其他氨基酸的消化率,分别使总必需氨基酸表观消化率提高了2.69%、4.79%和4.53%（P>0.05）,总非必需氨基酸表观消化率提高了2.77%、7.56%和6.080%（P>0.05）,总氨基酸表观消化率提高了2.74%、6.1l%和5.26%（P>0.05）；改性高品位沸石降低了肉鸡粪便中的水分含量；沸石对肉鸡血液生化指标无明显影响。3、不同品位及改性沸石对肉鸡肠道消化酶活性、DNA与RNA含量及黏膜形态的影响就普通沸石、高品位沸石和高品位改性沸石对肉鸡肠道粘膜中的RNA及DNA含量、消化酶活性和形态结构的影响进行了测定分析。结果表明,日粮中分别添加5%普通沸石、高品位沸石和高品位改性沸石,可提高肉鸡前期和后期肠道粘膜中RNA含量及后期空肠粘膜中的DNA含量；普通和高品位沸石使肉鸡前期空肠粘膜中的DNA含量有所提高（P>0.05）,但均降低了前期回肠粘膜中的DNA含量（P>0.05）;对肉鸡后期肠道粘膜中的DNA含量则影响不一。饲料中添加三种沸石分别使肉鸡前期肠道淀粉酶和蛋白酶活性提高了23.4%、8.3%、15.9%和17.4%、17.2%、2.90%,后期蛋白酶活性提高了4.0%、25.2%、22.8%（P>0.05）,普通沸石使肉鸡后期内源淀粉酶活性提高了12.8%,但高品位沸石和改性沸石却使其分别下降了25.1%和14.1%（P>0.05）。结果提示,沸石具有改善肉鸡肠道粘膜形态的功能。4、不同粒度沸石对肉鸡生产性能、肠道菌群及组织重金属残留的影响以及沸石在不同料型饲料中的应用效果在饲料中分别添加三种不同粒度的沸石粉,研究其对肉鸡生产性能、肠道菌群及肝脏与肌肉中重金属残留量的影响及沸石在不同料型饲料中的应用效果。结果表明,与对照组相比,在饲料中添加5%三种不同粒度的沸石均未影响肉鸡增重,但改善了饲料转化率（P<0.05）,降低了死淘率；粗、中、细三种粒度沸石使肉鸡肌肉中的铅含量分别降低了10.06%、43.02%、39.11%,肝脏中砷含量分别下降了34.00%、29.85%、16.12%,粗、中粒度沸石使肝脏中铅含量分别降低了32.61%、24.78%,沸石对肌肉中的砷含量影响不大；沸石降低了血氨浓度及空肠中的大肠杆菌数,使空肠中的乳酸菌数有所提高。饲喂颗粒饲料的肉鸡生产性能明显优于粉料（P<0.05）。颗粒饲料中添加沸石对肉鸡前期生产性能无影响,但在粉料中添加则显著降低了肉鸡生长速度、采食量和饲料转化率（P<0.05）。后期在颗粒饲料中添加沸石则降低了肉鸡生长速度（P<0.05）和饲料转化率（P>0.05）,但不影响采食量；粉料后期对增重无影响,但明显降低了采食量和料重比（P<0.05）。颗粒料和粉料中添加沸石均不影响肉鸡全期增重,但颗粒料的饲料转化率有所上升（P>0.05）,而粉料则明显降低（P<0.05）。5、天然沸石缓解产气荚膜梭茵对肉鸡的有害影响及相关机制研究384只1日龄的AA肉鸡随机分为4个处理,每个处理6个重复,分别为对照组（饲喂基础日粮）、肉鸡感染产气荚膜梭菌组（饲喂基础日粮）、感染产气荚膜梭菌肉鸡饲喂添加杆菌肽锌（40mg.kg-1）日粮和感染产气荚膜梭菌肉鸡饲喂添加5%沸石日粮,研究天然沸石缓解产气荚膜梭菌对肉鸡的有害影响及相关机制。结果表明：沸石明显提高了感染产气荚膜组肉鸡前期的饲料转化率（P<0.05）,但对免疫器官指数和血清各生化指标均影响不明显（P>0.05）。与感染组相比,饲料中添加沸石使肉鸡前期血清SOD极显著提高（P<0.01）,沸石缓解了产气荚膜梭菌对肉鸡造成的氧化损伤；抗生素也有相同效果。产气荚膜梭菌感染明显提高了肉鸡前期NO和后期DAO;沸石显著降低了肉鸡前期血清NO（P<0.01）和后期DAO（P<0.05）,沸石可缓解产气荚膜梭菌对肠道的损伤；抗生素亦具同样作用。沸石和抗生素对肉鸡血清T3、T4、IgA和IgG均无影响（P>0.05）；但添加沸石可减少产气荚膜梭菌导致的胸腺细胞死亡数,提高活细胞数量（P>0.05）。6、沸石对感染产气荚膜梭菌肉鸡生产性能、免疫器官及屠宰性能的影响本试验设5个处理,分别为对照组（饲喂基础日粮）、肉鸡感染产气荚膜梭菌组（饲喂基础日粮）、感染产气荚膜梭菌肉鸡饲喂添加杆菌肽锌（40mg-kg-1）日粮、感染产气荚膜梭菌肉鸡饲喂添加5%沸石日粮和感染产气荚膜梭菌肉鸡饲喂添加5%沸石日粮及杆菌肽锌（40mg.kg-1）,研究沸石对感染产气荚膜梭菌的肉鸡生产性能、免疫器官及屠宰性能的影响。结果表明：添加沸石显著提高了肉鸡前期平均体重和平均日增重（P<0.05）,抗生素明显提高了肉鸡生产性能,但抗生素与沸石同时添加不影响肉鸡各阶段生产性能（P>0.05）。对免疫器官指数影响不明显（P>0.05）。感染产气荚膜梭菌使肉鸡血清唾液酸含量提高了21.64%（P>0.05）,但各处理对感染产气荚膜梭菌肉鸡的血清唾液酸含量影响不明显（P>0.05）。添加抗生素、沸石、抗生素与沸石后则使肉鸡胸肌率和全净膛率均有不同程度的提高（P>0.05）。7、天然沸石缓解饲料中低剂量铅对肉鸡毒性作用及相关机理研究试验一：将720只1日龄AA肉鸡随机分成6组,分别为基础日粮对照组、基础日粮+3%沸石组、基础日粮+5%沸石组、基础日粮+硝酸铅（10mg.kg-1Pb）组、基础日粮+硝酸铅+3%沸石组、基础日粮+硝酸铅+5%沸石组,研究天然沸石和饲料中低剂量铅对肉鸡生产性能及血清HSP70的影响。结果表明：饲料中低剂量污染铅不影响肉鸡生产性能；添加3%沸石、低剂量污染铅并添加3%和5%的沸石则显著提高了肉鸡后期增重和降低了料重比（P<0.05）,低剂量污染铅并添加5%的沸石使肉鸡全期平均日增重、饲料转化率均显著改善（P<0.05）。单独添加沸石和低剂量污染铅均不同程度的提高了肉鸡血清HSP70的（P>0.05）,低剂量污染铅并添加3%和5%的沸石则显著提高了21日龄肉鸡血清HSP70水平（P<0.05）,42日龄时肉鸡血清HSP70水平也有一定程度提高。试验二：本试验设4个处理,分别为基础日粮对照组、基础日粮+硝酸铅（10mg-kg-1Pb）组、基础日粮十5%沸石、基础日粮+硝酸铅+5%沸石（10mg.kg-1Pb）,研究天然沸石和饲料中低剂量铅对肉鸡抗体滴度、肝脏抗氧化功能与金属硫蛋白、胸腺细胞凋亡相关基因表达的影响。结果表明：16日龄时,沸石使肉鸡免疫抗体效价有所提高,37日龄时铅和沸石均显著提高了免疫抗体效价（P<0.05）,其它则无明显差异。沸石可以减少铅在肉鸡肌肉中的残留,且沸石均极显著地降低了42日龄肉鸡肌肉中的铅残留（P<0.01）,但各处理对肉鸡后期肝脏的抗氧化功能影响不大。污染铅显著提高了肉鸡21日龄时肝脏中的金属硫蛋白含量（P<0.05）,添加沸石和污染铅再添加沸石对肉鸡肝脏中金属硫蛋白的含量影响不大（P>0.05）。污染铅显著提高了42日龄肉鸡胸腺bax基因的表达量（P<0.05）；污染铅并添加沸石有下调bax基因表达的趋势,并显著提高了21日龄时肉鸡胸腺bc1-2基因的表达量（P<0.05）,各处理均显著提高了42日龄时bcl-2基因的表达。污染铅和添加沸石均显著降低了肉鸡21日龄时p53基因的表达量（P<0.05）,污染铅使42日龄时的表达量明显提高（P<0.05）,添加沸石则极显著地提高了42日龄时的p53基因表达量（P<0.01）。