兔骨髓间充质干细胞与髓核细胞共同培养后对髓核细胞的影响

论文摘要

目的：将兔骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymalstem cells，BMSCs）与髓核（nucleus pulposus，NP）细胞共同培养，通过观测其对髓核样细胞增殖能力的影响，探讨其作为体外大量培养髓核样细胞方法的可行性。方法：：分别分离乳兔BMSCs和NP细胞，将BMSCs传代后取第三代与原代NP细胞分组共同培养，按NP细胞与BMSCs比例的不同分组：A组为NP对照组（全为NP细胞），B组为BMSCs对照组（全为BMSCs），C组NP细胞与BMSCs比例为3：1，D组比例为2：1，E组比例为1：1，F组比例为1：2，G组比例为1：3。对共同培养后各组细胞进行细胞计数，了解其增殖情况，并对各组细胞进行Ⅱ型胶原染色，计算阳性细胞百分比，观察培养前后阳性细胞的改变。结果：NP细胞与BMSCs共同培养后，A组细胞数低于B～G组（P＜0.01）；B组低于C～G组（P＜0.01）；C组高于E，F，G组（P＜0.01），但于D组无显著性差异（P＞0.05）；E组高于F，G组（P＜0.01）；F组高于G组（P＜0.01）。Ⅱ型胶原染色后，A组细胞呈阳性，B组细胞呈阴性，其余各组阳性细胞与阴性细胞共存，其中C组共同培养前后的阳性细胞增长高于E，F，G组（P＜0.01），而与D组无显著性差异；E组阳性细胞增长高于F组（P＜0.01）；F组高于G组（P＜0.01）。结论：兔BMSCs与兔NP细胞共同培养后，能促进髓核样细胞的增殖；在NP细胞与BMSCs比例为1：3至2：1之间时，髓核样细胞的增长随着其比例的增加而降低；当NP细胞与BMSCs比例为2：1与3：1时，髓核样细胞增长量与细胞比例无明显关系。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语
• 第一章 前言
• 第二章 实验材料
• 2.1 实验动物
• 2.2 试剂
• 2.3 重要器械及器材
• 第三章 试验方法与步骤
• 3.1 兔骨髓间充质干细胞分离与培养
• 3.2 兔髓核细胞分离与培养
• 3.3 兔骨髓间充质干细胞与髓核细胞共同培养
• 3.4 细胞增殖能力检测
• 3.5 免疫组化检测
• 3.6 统计学处理
• 第四章 结果
• 4.1 骨髓间充质干细胞的分离和体外培养
• 4.2 髓核细胞的分离和体外培养
• 4.3 髓核细胞与骨髓间充质干细胞共同培养后细胞增殖能力的检测
• 4.4 髓核细胞与骨髓间充质干细胞共同培养后免疫组化结果
• 第五章 讨论
• 5.1 间充质干细胞的分离与培养
• 5.2 髓核细胞的分离与培养
• 5.3 MSCs的生物学特性
• 5.4 细胞直接接触对细胞增殖及表型的影响
• 5.5 细胞比例与细胞增殖间的关系
• 第六章 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 致谢