参芪复方对GK大鼠2型糖尿病大血管病变血管内皮细胞保护的实验研究

论文摘要

目的：研究参芪复方对2型糖尿病大血管病变血管内皮保护的作用机理，为以益气养阴、活血化瘀为治疗原则的参芪复方在临床的广泛应用提供理论依据。方法：GK大鼠腹腔注射N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）2周，同时给高脂饮食4周造模。实验按GK大鼠随机血糖分为模型组、雷米普利组（简称为西药组）、参芪复方低剂量组（简称为中药低剂量组）、参芪复方高剂量组（简称为中药高剂量组）各11只，Wistar大鼠11只作为正常对照（简称为空白组），共5组。L-NAME注射2周后开始给药，连续28天。观察一般状况、摄食量、饮水量及体重变化。实验结束时果糖胺法测糖化血清蛋白（GSP）、放射免疫法测血清胰岛素（INS）、血清白细胞介素-6（IL-6）、血浆内皮素-1（ET-1）的含量；化学比色法测血清一氧化氮（NO）、血清一氧化氮合酶（NOS）的含量；酶联免疫吸附法测定血清氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）、血清细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的含量；用Real-Time PCR测定胸主动脉ICAM-1mRNA及清道夫受体CD36mRNA的表达；并观察光镜下的病理形态变化。比较NO和ET-1、ox-LDL和CD36mRNA的相关性。结果：中药高、低剂量组动物在实验结束后多饮及消瘦的症状较模型组有所缓解（p＜0.01）。中药高低剂量组IL-6、ET-1、INS、GSP、ICAM-1、ox-LDL的含量均较模型组有显著下降（p＜0.01或p＜0.05）。中药高、低剂量组的NO及NOS较模型组有明显升高（p＜0.01）。ICAM-1mRNA及CD36mRNA的表达也较模型组明显降低（p＜0.01）。NO和ET-1呈线性负相关（r=-0.90），ox-LDL和CD36mRNA的Ct值呈线性负相关（r=-0.60）。中药高、低剂量组动物胸主动脉内膜病变数目及程度均有明显减少（p＜0.01）。结论：参芪复方对T2DM大血管病变血管内皮具有保护的作用。其作用可能是通过以下机制完成：①降低血清IL-6的含量；②降低血清ICAM-1的含量及抑制主动脉ICAM-1mRNA的表达；③升高血清NO和NOS含量，降低血浆ET-1含量；④降低血清ox-LDL的含量；⑤降低主动脉CD36mRNA的表达；⑥减轻胰岛素抵抗。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 目录
• 缩略词表
• 前言
• 实验研究
• 1 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 饲养条件
• 1.3 饲料及饮水
• 1.4 实验用药品
• 1.5 实验用主要试剂
• 1.6 主要仪器
• 2 方法
• 2.1 造模及分组
• 2.2 给药方法
• 2.3 取材
• 2.4 观察指标及检测方法
• 2.4.1 大鼠的一般状况
• 2.4.2 随机血糖
• 2.4.3 糖化血清蛋白（GSP）含量
• 2.4.4 血清INS的含量
• 2.4.5 血清ox-LDL的测定
• 2.4.6 血清IL-6的测定
• 2.4.7 血清NO的测定
• 2.4.8 血清NOS的测定
• 2.4.9 血浆ET-1含量的测定
• 2.4.10 血清ICAM-1含量的测定
• 2.4.11 胸主动脉ICAM-1mRNA及CD-36mRNA的表达
• 2.4.12 胸主动脉光镜病理形态
• 2.5 统计方法
• 3 结果
• 3.1 动物一般状况的观察
• 3.2 给药前随机血糖和体重情况
• 3.3 饮水量情况
• 3.4 摄食量情况
• 3.5 体重的变化情况
• 3.6 对血清IL-6含量的影响
• 3.7 对血清GSP含量的影响
• 3.8 对血清INS含量、IRI、IAI的影响
• 3.9 对血清NO、NOS含量的影响
• 3.10 对血浆ET-1含量的影响
• 3.11 对血清ICAM-1含量、胸主动脉ICAM-1mRNA表达的影响
• 3.12 对血清ox-LDL含量的影响
• 3.13 对胸主动脉CD36mRNA表达的影响
• 3.14 血清NO和血浆ET-1的相关性分析
• 3.15 血清ox-LDL与胸主动脉CD36mRNA表达的相关性分析
• 3.16 对胸主动脉形态学的影响
• 4 讨论
• 4.1 实验动物模型的讨论
• 4.1.1 本实验对实验动物模型的要求
• 4.1.2 T2DM动物模型的讨论
• 4.1.3 AS动物模型的讨论
• 4.1.4 阳性对照药的确定
• 4.2 T2DM大血管病变与血管内皮结构及功能紊乱
• 4.2.1 T2DM大血管病变的流行病学研究
• 4.2.2 DM大血管病变血管内皮结构及功能紊乱的发病机制
• 4.2.3 DM大血管病变相关基因的研究
• 4.2.4 DM大血管病变的病理改变
• 4.3 中医对DM大血管病变的认识
• 4.3.1 中医对DM大血管病变病因的认识
• 4.3.2 DM大血管病变的病机
• 4.3.3 DM大血管病变的临床表现
• 4.3.4 DM大血管病变的辨证论治
• 4.4 参芪复方对T2DM大血管病变血管内皮保护的中医机制
• 4.4.1 参芪复方的组方原理
• 4.4.2 现代药理学的研究成果
• 4.4.3 参芪复方对T2DM大血管病变血管内皮保护的中医机制
• 4.5 参芪复方对T2DM大血管病变血管内皮保护的作用机理
• 4.5.1 降低血清IL-6的含量
• 4.5.2 降低血清ICAM-1的含量及抑制主动脉ICAM-1mRNA的表达
• 4.5.3 升高血清NO和NOS含量,降低血浆ET-1含量
• 4.5.4 降低血清ox-LDL的含量
• 4.5.5 降低主动脉CD36mRNA的表达
• 4.5.6 减轻胰岛素抵抗
• 4.5.7 对GSP的影响
• 4.5.8 参芪复方对GK大鼠摄食量、饮水量、体重及精神状况的影响
• 5 问题与展望
• 5.1 存在的问题
• 5.1.1 动物模型方面
• 5.1.2 实验方面
• 5.2 对未来的展望
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述：中医药对血管内皮形态和功能影响的研究进展
• 附图
• 附件一：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
• 附件二：申明