江利
郴州市第一人民医院湖南郴州423000
【摘要】目的：观察分析精索静脉曲张男性不育症患者外科治疗后精浆瘦素水平与精子凋亡率的改变情况。方法：择取我院在2015年6月至2017年6月间接诊的47例精索静脉曲张行外科手术治疗的男性不育症患者组成A组，另择取健康男性精液45份作为B组对照，对各组患者的精液参数进行常规检测，并以放射免疫法检测精浆瘦素水平，以Annexin+PI法测定精子凋亡率，比较精索静脉曲张男性不育症患者治疗前后上述指标的变化情况。结果：A组精索静脉曲张不育症患者手术前其精子凋亡率及精浆瘦素水平明显高于B组健康精液（P<0.05）。手术后，A组患者的精子凋亡率、精浆瘦素水平明显低于手术前（P<0.05）。结论：精浆瘦素水平与精子凋亡率之间存在正比关系，外科手术可有效的改善精索静脉曲张不育症患者的精液质量，降低精浆瘦素水平及精子凋亡率。
【关键词】精索静脉曲张；外科；精浆瘦素；精子凋亡
精索静脉曲张是临床男科常见的疾病，是导致男性不育的重要病因。精子的凋亡是生精过程中的必要部分，但因各种疾病因素诱发的精子过度凋亡而导致的精子凋亡率增加却在男性不育中起着重要作用。瘦素是肥胖基因的蛋白产物，目前被认为是调节能量代谢的重要激素，目前研究显示，瘦素在男性生殖功能中发挥着重要的调控作用。研究显示，精索静脉曲张动脉模型及精索静脉曲张不育症患者的精浆瘦素水平等，这在一定程度上反应了睾丸的生精功能障碍[1]。但精索静脉曲张不育症患者的精浆瘦素水平与精子凋亡之间是否存在关联及外科手术对精浆瘦素水平、精子凋亡率的改变情况目前临床研究尚少，本文就这一问题进行了研究，现将结果分析报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料：择取我院在2015年6月至2017年6月间接诊的47例精索静脉曲张不育症患者组成A组，该组均在院接受精索静脉高位结扎手术治疗，患者均符合WHO少、弱精子症诊断标准，并通过体检和彩色多普勒超声检查诊断显示明确诊断。同时排除了合并恶性肿瘤并接受放、化疗的患者，其他因素导致的不育症患者及患有严重慢性疾病的患者。入选患者年龄24岁到41岁不等，平均年龄（30.72.1）岁。另择取我院同期采集的45份正常精液标本组成B组，标本来源于23岁到43岁健康男性，男性平均年龄（31.21.8）岁。两组间年龄构成对比无明显差异，具有可比性（P>0.05）。
1.2方法：
1.2.1标本分析：A、B两组均采取手淫法收集精液，精液收集前均禁欲一周。精液收取后进行离心分离，分离出精子及精浆，精浆存于-80℃冰箱统一待检。
1.2.2精浆瘦素检验：应用北京福瑞生物工程公司生产的瘦素放射免疫测定试剂盒待检精浆进行检测，全部操作严格按照试剂盒使用说明书进行。选用上海核所日环光电仪器有限公司生产的SN695B型全自动放射免疫γ计数器度数。
1.2.3精子凋亡率检测：将离心分离后的精子重新混悬于AnnexinV/PI凋亡检测专用的Buufer液中，用Makler板计数后将密度调节为（10-20）105/ml，取混合后的细胞液100μl，加入5μlAnnexinV及1μlPI试剂，室温下避光孵育15分钟后测定染色体情况，激发波长为488nm，绿色荧光采取FL1通道检测，红色荧光采取FL2通道检测。将“AN+/PI—”群判定早期凋亡精子，“AN+/PI+”群判定为精子坏死或晚期凋亡精子，“AN—/PI—I”群判定为坏死精子，“AN—/PI+”群判定为非坏死或凋亡精子。
1.3统计学处理：数据应用统计学软件SPSS20.0进行处理，均数以（）表示，检验方式采取X2检验，组间比较采取t检验，以P<0.05表示具有统计学意义。
2结果
A组精索静脉曲张不育症患者手术前其精子凋亡率及精浆瘦素水平明显高于B组健康精液（P<0.05）；手术后，A组患者的精子凋亡率、精浆瘦素水平明显低于手术前（P<0.05），详见表1。
注：手术前与B组比较，#P<0.05；手术后与手术前比较，*P<0.05，均具有统计学意义。
3讨论
精索静脉曲张是导致男性不育症患者的常见因素，其是指精索内蔓状静脉丛因血液回流不畅或瓣膜功能受损而形成的异常扩张、伸长、迂曲，通常伴有睾丸体积的萎缩、精液质量的降低及睾丸间质细胞的损伤。关于精索静脉曲张引起不育症的机制目前尚无明确统一的定论，多认为可能与精子DNA损伤、氧化应激、生精小管退行性改变及局部免疫反应增加有关[2]，认为精索静脉曲张的发生会引起生精细胞、精子细胞凋亡的异常增加，最终导致患者不育。此次研究显示，精索静脉曲张患者的精子凋亡率明显高于正常精液的精子凋亡率，结果提示细胞凋亡在男性生殖中起着重要作用[3]，认为如果去除诱发凋亡的因素，对于提高精液质量可能会有一定的帮助。
瘦素是有肥胖基因编码的167个氨基酸组成的蛋白质类激素，其可以调节能量储存及调节机体的营养状况，若其水平异常则会导致机体能量代谢及脂肪代谢发生紊乱，从而发生肥胖及糖尿病等情况的发生。瘦素存在6种亚型，其不仅存在于下丘脑、垂体前叶及脂肪组织中，还广泛存在于睾丸组织中，并参与男性的生殖功能。研究显示，精浆瘦素水平与精子的活力呈负相关性[4]，同时大量研究也显示，精浆瘦素与睾丸的生精功能及精液质量存在着关联。本研究显示，精索静脉曲张不育症患者的精浆瘦素水平与精子凋亡率之间存在着显著的正比关系，认为精浆瘦素在睾丸内可能是促进精子凋亡的因子之一。精索静脉高位结扎术（改良Palomo术）是临床治疗精索静脉曲张不育症的经典术式，具有较高的安全性、可靠性[5]，该术式的实施可以使超过半数的精索静脉曲张不育症患者的临床症状得到改善，并有效的提高怀孕率。此次研究显示，A组的47例精索静脉曲张患者在实施手术治疗后其精浆瘦素水平明显降低、精子凋亡率也明显降低，提示精索静脉高位结扎术的实施可在一定程度上改善患者的睾丸生精环境，有助于精子的生成。
综上所述，精索静脉曲张不育症患者的精浆瘦素与精子凋亡率显著的增高，两者间呈正比关系，临床测定精浆瘦素水平有助于判断精子凋亡程度及诊断少、弱精子症。精索静脉高位结扎术（改良Palomo术）可有效的改善精索静脉曲张不育症患者的精液质量，降低精浆瘦素水平及精子凋亡率，是临床治疗精索静脉曲张不育症的有效手段，值得临床推广应用。
参考文献：
[1]ChenB，GUOJH，LuYN，etal.Leptinandvaricocele-relatedspermatogenesisdysfunction：animalexperimentandclinicalstudy.IntJAndrol，2009，32（5）：532-541.
[2]CelikO，KutluO，TekcanM，etal.RoleofTNF-relatedapoptosis-inducingligand（TRAIL）inthepathogencsisofvaricocele-inducedtesticulardysfunction.AsianJAndrol，2013，15（2）：269-274.
[3]SaidTM，PaaschU，GlanderHJ，etal.Roleofcaspasesinmaleinfertility.HumReprodUpdate.2004，10（1）：39-51.
[4]TaneliF，ErsoyB，OzhanB，etal.Theeffectofobesityontesticularfunctionbyinsulin-likefactor3，inhibinB，andlepinconcentrationsinobeseadolescentsaccordiongtopubertalstages.ClinBiochem.2010，43（15）：1236-1240.
[5]金鹏，杨罗艳，彭佑共.显微手术治疗精索静脉曲张疗效和安全性的系统评价[J].中国询证医学杂志，2009，9（6）：674-680.