精子蛋白质AKAP4、GAPDHS和SPANX与A23187诱发顶体反应率在人工授精中的临床应用价值

论文摘要

目的：从蛋白质水平探讨不同生育能力供精者精子蛋白的改变,寻找几种与供精者精子生育能力相关的可能蛋白质标志物,为更好地筛查供精者提供新的指标。材料和方法：收集在精子库里连续做12个不同受者的AID周期治疗一次也未成功的供精者的精液（低生育组）、AID成功率在20%-30%之间的的供精者的精液（正常对照组）和AID成功率在50%以上的供精者的精液（高生育组）,各10人,每人捐献3次。运用CASA分析精子活力,Percoll密度梯度离心技术分离纯化精子,RIPA裂解结合超声法提取蛋白,BCA试剂盒测定蛋白浓度,SDS-PAGE电泳技术分离不同生育能力供精者精子标本的总蛋白质,结合荧光免疫、Western blotting技术筛选差异蛋白质。结果：随着供精者生育能力的下降,精子中AKAP4、GAPDHS和SPANX这三种蛋白表达减少,且差异蛋白质大多与精子活力有关。结论：综上所述,供精者生育能力与精子蛋白质差异表达有关,主要差异蛋白AKAP4、GAPDHS和SPANX可作为评估男性生育能力的生物标志物;精子的活动力可能与男性生育能力有关。目的：探讨精子顶体反应（AR）与宫腔内人工授精（IUI）临床妊娠率的关系,以期指导IUI临床工作。材料和方法：以我院2010年1月-2010年12月接受IUI治疗的128例患者为研究对象,Percoll密度梯度离心技术分离纯化精子,模拟生理情况下精子进入女性生殖道后的顶体反应,在体外用Ca2+载体A23187诱发AR, FITC-PSA荧光染色,最后在荧光显微镜下观察,计算自发AR率和诱发AR率,收集临床资料,SPSS统计学处理实验数据,分析精子AR率与IUI临床妊娠率的关系。结果：1、妊娠组与非妊娠组相比,自发AR率在统计学上无显著性的差异（P>0.05）,诱发AR率在统计学上有显著性的差异（P<0.05）；2、诱发AR率≤20%、20%-50%和≥50%三组相比,其IUI临床妊娠率在统计学上有显著性的差异（4.8%vs 12.5%vs 18.6%,P<0.05）。结论：自发AR率与IUI临床妊娠率无关,诱发AR率与IUI临床妊娠率有关;诱发AR率≥50%时,可进行IUI,诱发AR率在20%-50%之间时,可进行IUI或IVF,诱发AR率≤20%时,可进行ICSI。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 中英文缩写对照
• 实验技术路线图
• 前言
• 第一章 不同生育能力供精者精子蛋白AKAP4、GAPDHS和SPANX的差异表达研究
• 1 实验材料和实验方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 第二章 A23187诱发顶体反应率在宫腔内人工授精中的临床应用价值
• 1 实验材料和实验方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢