人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织血管细胞粘附分子-1及其mRNA表达的影响

论文摘要

第一部分：改良的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的建立及人工-合成E-选择素对脑梗死体积的影响背景及目的：Zea Longa等应用线栓阻塞大脑前动脉、颈总动脉及后交通动脉的血流,使大脑中动脉闭塞,拔除线栓后可恢复脑组织血流灌注,形成局灶性脑缺血再灌注损伤模型。本实验拟通过对传统Zea Longa法进行部分改进,建立一种模型成功率更高,稳定性更好的模型。应用人工合成E-选择素干预大鼠,研究其对脑梗死体积的影响。方法：90只雄性Sprague-Dawley大鼠（SD大鼠）被随机分为假手术组、模型组和人工合成E-选择素治疗组。参照Zea Longa法,采用颈部旁正中切口,术中不结扎翼腭动脉,从颈总动脉切口进线等改进,制作SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。通过神经行为学评分和2,3,5—氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色结果,来观察模型的可靠性和稳定性,并应用相关软件和公式计算脑梗死体积。结果：模型成功大鼠神经行为学评分为1-3分,缺血区脑组织经TTC染色后呈苍白色,改良后模型成功率为80%。治疗组大鼠脑梗死体积为233±15mm3,较模型组287±19mm3减少（P<0.05）。结论：改良后的模型具有制作简便,稳定性好,模型成功率高的优点,是一种用于研究局灶性脑缺血再灌注损伤理想的实验动物模型。人工合成E-选择素能够减少脑梗死体积,具有脑保护作用。第二部分：人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血管细胞粘附分子-1蛋白和mRNA表达的影响目的：探讨人工合成E-选择素在对大鼠局部脑缺血再灌注损伤中脑组织血管细胞粘附分子-1及其mRNA表达的影响及其作用机制。方法：42只雄性SD大鼠被随机分为假手术组、模型组和人工合成E-选择素治疗组。采用改良的Zea Longa法建立脑缺血再灌注损伤模型,治疗组大鼠用人工合成E-选择素10mg/Kg股静脉注射体内。免疫组化法观察缺血区脑组织中微血管的血管细胞粘附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）阳性细胞数,RT-PCR法观察其mRNA表达。结果：1.假手术组：VCAM-1阳性细胞数少,VCAM-1mRNA表达低。2.模型组：VCAM-1阳性细胞在再灌注2h后开始出现,并持续增多,在24h后达高峰,72h开始下降,各时间点与假手术组比较明显增多（P<0.01）;VCAM-1mRNA在再灌注2h后开始表达,12h后达到高峰,24h开始降低,各时间点与假手术组比较明显增高（P<0.01）。3.治疗组：VCAM-1阳性细胞数较假手术组多（P<0.05）,但较模型组少（P<0.05）；VCAM-1mRNA表达较假手术组高（P<0.05）,但较模型组低（P<0.05）。结论：1.大鼠形成局灶性脑缺血再灌注损伤后,缺血区脑组织中炎性细胞因子积聚,促使血管内皮细胞表面的粘附分子表达上调,表现为VCAM-1mRNA及VCAM-1的表达增多。2.人工合成E-选择素通过降低VCAM-1mRNA及VCAM-1的表达,从而抑制白细胞与血管内皮细胞粘附,减轻炎症反应,减少脑缺血再灌注损伤,起到保护脑组织的作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一部分：改良的大鼠脑缺血再灌注损伤模型的建立及人工合成E-选择素对脑梗死体积的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 第二部分 人工合成E-选择素对脑缺血再灌注损伤后血管细胞粘附分子-1蛋白和mRNA表达的影响
• 第一节 人工合成E-选择素对VCAM-1蛋白表达的影响
• 一 材料
• 二 方法
• 三 结果
• 第二节 人工合成E-选择素对VCAM-1 mRNA表达的影响
• 一 材料
• 二 实验方法
• 三 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 参考文献
• 中英文缩略词表
• 攻读学位期间公开发表的论文
• 致谢