桔梗质量控制关键技术与质量评价体系的研究

论文摘要

目的:桔梗是我国的大宗药材产品,山东为桔梗的主产区,淄博、临沂等地均有大面积种植。由于质量控制方法和质量评价标准至今尚不完善,严重影响了桔梗的现代化与国际化市场的需要。鉴于此,我们在中医药学理论指导下,对不同产地、不同部位、不同生长年限的桔梗药材,进行系统的本草考证、资源考察、生物学鉴定、质量评价方法与指标、指纹图谱以及与桔梗药材质量相关的其他研究,寻找并逐步建立更为完善、可靠、科学的中药材质量评价方法,构建完善的桔梗质量控制关键技术与质量评价体系。实现桔梗药材质量的安全、有效、稳定、可控,为中药现代化、国际化奠定良好的基础。方法:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对不同产地和不同生长年限的桔梗进行了蛋白质、过氧化物同工酶、酯酶同工酶的生物学鉴别分析。对不同产地、不同部位和不同生长年限的桔梗进行了浸出物、水分、灰分及农残重金属含量的检测分析,采用现代分析技术比较了其中糖类、氨基酸、总皂苷、桔梗皂苷D等有效成分含量;初步研究了桔梗药材的HPLC指纹图谱的建立方法,进行了相似度分析。结果与结论:不同产地、不同生长年限的桔梗药材蛋白质PAGE结果相同,但同工酶POD-PAGE结果具有较大差异。综合比较有效成分含量与农药重金属残留,山东淄博产桔梗药材有效成分含量较高,质量最好。本文首次对桔梗进行指纹图谱研究,首次对不同产地、不同部位及不同生长年限的桔梗药材进行了糖类、氨基酸、桔梗皂苷D等有效成分含量及浸出物、灰分、水分、农残重金属含量的比较分析。根据实验结果,起草了更完善的桔梗质量控制方法和评价体系,为桔梗的现代化发展提供了科学依据。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 国内外文献综述
• 1 本草考证
• 2 种质资源
• 3 采收加工与炮制
• 4 化学成分
• 4.1 皂苷类
• 4.2 多聚糖
• 4.3 氨基酸
• 4.4 脂肪油、脂肪酸
• 4.5 维生素
• 4.6 无机元素
• 4.7 其他
• 5 药理药效
• 5.1 镇痛、抗炎作用
• 5.2 抗癌作用
• 5.3 溶血作用
• 5.4 其它药效
• 6 临床应用
• 7 毒副作用
• 8 质量研究
• 第二部分 桔梗资源考察与生药学研究
• 1 资源调查
• 2 生药学研究
• 2.1 基源鉴别
• 2.2 性状鉴别
• 2.3 显微鉴别
• 2.4 理化鉴别
• 3 桔梗的生物学研究
• 3.1 桔梗的 Pro-PAGE 鉴别分析
• 3.2 桔梗的POD-PAGE 鉴别分析
• 3.3 桔梗的EST-PAGE 鉴别分析
• 第三部分 桔梗不同产地、生境与药材质量的相关性研究
• 1 多糖类成分含量测定
• 1.1 仪器和试药
• 1.2 对照品溶液的制备
• 1.3 显色剂的配制
• 1.4 最大吸收波长的测定
• 1.5 多糖稳定性考察
• 1.6 仪器精密度考察
• 1.7 标准曲线的绘制
• 1.8 加样回收试验
• 1.9 供试品的制备
• 1.10 样品测定
• 1.11 总糖的计算
• 1.12 结果
• 2 氨基酸含量测定
• 2.1 仪器及试药
• 2.2 试验方法
• 2.3 结果
• 3 总皂苷含量测定
• 3.1 仪器与试药
• 3.2 桔梗总皂苷提取方法研究
• 3.3 索氏提取和超声提取的差异比较
• 3.4 超声提取条件优选
• 3.5 结果
• 4 桔梗皂苷D 含量测定
• 4.1 仪器与试药
• 4.2 提取方法的考察
• 4.3 对照品溶液的制备
• 4.4 HPLC 色谱条件的选择
• 4.5 测定方法
• 4.6 方法学考察
• 4.7 样品测定
• 4.8 结果
• 4.9 讨论
• 5 小结
• 第四部分 桔梗不同采收期与药材质量的相关性研究
• 1 多糖类成分含量测定
• 1.1 仪器与试药
• 1.2 供试品溶液的制备
• 1.3 样品测定
• 1.4 结果
• 2 总皂苷含量测定
• 2.1 仪器与试药
• 2.2 桔梗总皂苷的提取
• 2.3 结果
• 3 桔梗皂苷D 含量测定
• 3.1 仪器与试药
• 3.2 供试品溶液的制备
• 3.3 样品测定
• 3.4 结果
• 4 小结
• 第五部分 桔梗不同部位有效成分与药材质量的相关性研究
• 1 多糖类成分含量测定
• 1.1 仪器与试药
• 1.2 供试品溶液的制备
• 1.3 样品测定
• 1.4 结果
• 2 总皂苷含量测定
• 2.1 仪器与试药
• 2.2 桔梗总皂苷的提取
• 2.3 结果
• 3 桔梗皂苷D 含量测定
• 3.1 仪器与试药
• 3.2 供试品溶液的制备
• 3.3 样品测定
• 3.4 结果
• 4 小结
• 第六部分 桔梗常规检查项目研究
• 1 水分检查
• 1.1 试验材料、仪器和试药
• 1.2 试验方法
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 2 灰分检查
• 2.1 试验材料、仪器和试药
• 2.2 试验方法
• 2.3 结果与讨论
• 3 浸出物检查
• 3.1 试验材料、仪器和试药
• 3.2 水溶性浸出物测定
• 3.3 醇溶性浸出物测定
• 3.4 结果
• 3.5 讨论
• 4 农残重金属检测
• 4.1 材料
• 4.2 桔梗农残的检测
• 4.3 结果
• 4.4 重金属的检测
• 4.5 结果
• 第七部分 桔梗的指纹图谱研究
• 1 仪器与试剂
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂药品
• 2 实验方法
• 2.1 提取溶剂的考察
• 2.2 提取方法的考察
• 2.3 提取方法小结
• 3 色谱条件优选
• 3.1 梯度洗脱条件的选择
• 3.2 检测波长的选择
• 3.3 检测条件的小结
• 4 方法学的考察
• 4.1 标准品的考察
• 4.2 精密度的考察
• 4.3 稳定性的考察
• 4.4 重复性的考察
• 5 不同批次样品的指纹图谱
• 6 共有指纹峰的标定
• 7 共有峰保留时间的比值（RT）
• 8 共有峰面积的比值（RA）
• 9 非共有峰面积
• 10 相似度的计算
• 11 桔梗不同部位的指纹图谱比较
• 12 不同栽培品种桔梗的指纹图谱比较
• 13 不同生长年限桔梗的指纹图谱比较
• 14 小结
• 14.1 供试品制备方法的研究
• 14.2 参照物的选定
• 14.3 测定方法的研究
• 15 讨论
• 第八部分 桔梗药材质量控制规范（草案）及起草说明
• 桔梗药材质量标准（草案）
• 桔梗质量标准（草案）起草说明
• 第九部分 课题创新点
• 第十部分 社会经济效益分析及推广应用前景
• 1 为建立优质桔梗药材原料生产基地（GAP）提供技术标准
• 2 为新一版药典的制定提供新内容、新方法
• 3 为山东桔梗的现代化、国际化提供技术支撑
• 第十一部分 结语
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 查新报告