山荆子叶中有效成分含量测定及其药理活性研究

论文摘要

本研究测定山荆子鲜叶、青果及茎皮中根皮苷的含量。采用的方法是HPLC法，色谱柱为大连依利特HypersilODS2（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水（25:75）为流动相，流速为1.0ml·min-1，柱温为30℃，检测波长为285nm。结果表明，山荆子鲜叶、青果及茎皮中根皮苷的含量分别为1.199%、0.117%和2.124%，根皮苷的线性范围为20.0～100.0μg·ml-1，其鲜叶、茎皮及青果的加样回收率的平均值为98.7%、100.3%和97.3%（n=5），其RSD分别为2.37%、3.27%和2.67%。本方法操作简单，重复性好，结果准确，可用于山荆子的质量评价。本文测定了山荆子叶中其他类黄酮的含量。所采用的方法是HPLC法，色谱柱为大连依利特HypersilODS2（250mm×4.6mm,5μm）；柱温：35℃；流动相：甲醇-0.2%磷酸水（0-40min，甲醇10%-50%；40-50min，甲醇50%），流速：1.0mL·min-1；检测波长：285nm；进样量：20μL。结果表明，山荆子叶中含有芦丁、根皮苷、槲皮素及根皮素等其他类黄酮，其含量分别为9.72mg·g-1、51.04mg·g-1、9.44mg·g-1和2.73mg·g-1。本方法能够完全使所分离的物质基线达到分离，重复性好，操作简单。本研究山荆子叶醇提物的体外抗氧化活性及体内四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。在体外，通过DPPH清除自由基、ABTS清除自由基、还原力、FTC及TBA法测定脂质过氧化来测定山荆子叶醇提取的体外抗氧化活性；体内四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用，60只小鼠随机分为6组，分别为正常对照组、模型对照组、联苯双酯组、山荆子醇提物高、中、低（500、300、100mg·kg-1）剂量组，每组10只，各组灌胃给药，给药组给药14天，第14天灌胃结束后腹腔注射10%（用橄榄油稀释）的四氯化碳（1mL·kg-1BW），建立急性肝损伤模型。6h后，眼球取血，离心血液，血清用于测定ALT、AST，肝脏匀浆，测定肝匀浆中SOD、MDA和GSH的含量。体外抗氧化实验表明山荆子叶醇提物具有较好的抗氧化活性；体内保肝实验中，山荆子叶醇提物给药组，均能降低血清中ALT、AST的升高，肝匀浆中，降低MDA含量，提高SOD活性和GSH含量。山荆子乙醇提取物的这种活性可能归结于其内的黄酮和多酚类化合物，其保护机制可能与清除自由基，减轻脂质过氧化，保护细胞结构和功能的完整性有关。本文研究了山荆子叶醇提物（MBE）对链脲佐菌素（STZ）致糖尿病小鼠的降糖、降脂作用。采用STZ（100mg·kg-1） ip注射诱导形成糖尿病小鼠模型。实验小鼠分正常对照组、模型组、阳性对照组（盐酸二甲双胍，250mg·kg-1）、MBE高剂量组（500mg·kg-1）、MBE低剂量组（300mg·kg-1）。MBE灌胃四周，每天测量体重、饮食、饮水，并测量三次空腹血糖，最后测量小鼠葡萄糖口服糖耐量。实验结束时处死小鼠，取肝脏、脾脏、肾脏和胸腺称重计算脏器指数,收集血液，离心，血清用于测定血脂。结果表明，MBE高剂量能显著降低小鼠空腹血糖和提高葡萄糖口服糖耐量AUC下面积（P<0.05），低剂量在一定程度上能降低血糖；高、低剂量均能显著降低小鼠血清中TG、TC水平，改善HDL-C水平；高、低剂量也可以很好地修复小鼠脏器受到的损伤。MBE可以明显改善糖尿病小鼠血糖和血脂的紊乱。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 山荆子的研究概况
• 1.1 山荆子的形态及分布
• 1.2 山荆子果的化学成分
• 1.3 山荆子叶和花中化学成分
• 第二章 抗氧化活性研究概况
• 2.1 黄酮类化合物
• 2.2 多糖类化合物
• 2.3 皂苷类化合物
• 2.4 生物碱
• 2.5 其他类
• 第三章 抗糖尿病活性研究概况
• 3.1 糖尿病的临床症状及危害
• 3.2 西药治疗糖尿病
• 3.3 中药抗糖尿病
• 3.4 运动疗法
• 第二篇 研究内容
• 第一章 HPLC 测定山荆子鲜叶、青果及茎皮中根皮苷含量
• 1.1 仪器与试剂
• 1.2 方法与结果
• 1.3 讨论
• 第二章 山荆子叶中黄酮类成分含量测定
• 2.1 实验材料
• 2.2 方法与结果
• 2.3 小结与讨论
• 第三章 山荆子叶醇提物体外抗氧化活性研究
• 3.1 实验部分
• 3.2 抗氧化活性测定
• 3.3 结果
• 3.4 小结
• 4致小鼠急性肝损伤的保护作用'>第四章 山荆子叶醇提物对 CCl₄致小鼠急性肝损伤的保护作用
• 4.1 材料
• 4.2 方法
• 4.3 统计学分析
• 4.4 结果
• 4.5 小结与讨论
• 第五章 山荆子叶醇提物对糖尿病小鼠血糖和血脂的影响
• 5.1 材料
• 5.2 方法
• 5.3 指标检测
• 5.4 数据处理
• 5.5 结果
• 5.6 小结和讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 作者简介
• 致谢