论文摘要
缺氧是一种常见的损伤因素,海马是中枢神经系统对缺氧最敏感的部位之一。本实验采用急性完全缺氧模型和低压缺氧模型,应用膜片钳技术和免疫组化技术对大鼠海马CA1区锥体细胞的基本电生理特性、正常条件下P2X受体的药理学特性、缺氧情况下P2X受体功能及表达的变化进行了研究,探讨P2X受体各亚型在大鼠海马CA1区的表达及缺氧对其功能和表达影响的可能机制,结果如下:1.显微镜下急性分离出的完整的神经元表面光洁,折光性好,胞体呈锥形,细胞突起完整,能迅速贴壁。2.状态良好的锥体细胞易于封接形成全细胞记录并且能维持较长时间,平均静息膜电位（RMP）为-54.96±5.24 mV,在电流钳下给予一系列由去极化至超极化的跃阶电流刺激（-60—+40pA,step=10,时长200ms）,得到电压-电流曲线,阈值37.119±4.5342mV,时程8.9571±2.1506ms动作电位幅度83.04±10.45mV（n=45）。3.ATP有反应的细胞占总数的95%（38/40）,给予梯度浓度的ATP,结果显示有明显的量效关系,应用浓度分别为0.1,1,10,100,1000μmol/L的ATP诱发的电流值为-2.019±0.508, -3.114±0.682, -9.529±3.928, -17.642±5.451, -18.4175±6.2406应用P2X受体抑制剂suramin对ATP诱发的电流有显著抑制作用,在应用P2X受体调节剂IVM（100μmol/L）与低pH（pH=6.5）的条件下,不同细胞有不同的反应。4.缺氧情况下,ATP诱发的内向电流幅度减弱,但是此内向电流对ATP的浓度依赖性依然存在,suramin对该电流依然有抑制作用。5.免疫组化实验结果显示在大鼠海马CA1区有多种P2X受体亚型的表达,低压缺氧可以引起P2X受体各个亚型表达的上调。综合以上结果:在大鼠海马CA1区P2X受体有多亚型的广泛表达,根据电生理学和药理学特性,可以对P2X受体进行亚型分析,缺氧影响下P2X受体功能的下调与长期缺氧P2X受体表达的上调相关联。
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