论文摘要
目的:荨麻疹是皮肤科常见的过敏性疾病,特征性表现为皮肤粘膜反复发生风团伴剧烈瘙痒。病程超过6-8周的为慢性荨麻疹,临床表现迁延难愈,严重影响患者的生活质量,甚至可发生喉头水肿或休克危及患者生命。其具体发病机制尚不完全清楚。近年来有研究发现,慢性荨麻疹患者存在IFN-γ低表达,IL-4高表达,提示慢性荨麻疹可能存在Th亚群失衡。T辅助细胞（Th细胞）可极化为Th1和Th2两个功能性亚群。Th1分泌干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、白细胞介素（inteleukine,IL）-12等细胞因子,主要参与细胞免疫。Th2分泌IL-4、IL-5、IL-13等细胞因子,主要参与体液免疫。Th1/Th2极化是免疫应答中的关键环节,生理状态下维持着动态平衡,当Th1/Th2极化异常或缺陷时可导致疾病。T细胞表达的T盒（T box expressed in T cells, T-bet）是2000年发现的一个重要的Th1转录因子,选择性在Th1谱系细胞中表达。T-bet不仅可转录激活IFN-γ基因,诱导内源性IFN-γ的生成和IFN-γ等位基因的染色质重排,导致IFN-γ显著表达,而且在促进Th1分化同时抑制IL- 4、IL-5等Th2型细胞因子生成。GATA连接蛋白-3 （GATA binding protein-3, GATA-3）是锌指结构家族成员的转录因子之一,是Th2细胞特异的转录因子。不仅是所有关键性Th2型细胞因子转录所必需而且能极化已极化的Th1细胞。因此T-bet和GATA-3作为Th细胞分化过程中作用相反的两个特异性转录因子,是决定Th1/Th2分化的关键因素,替代了以往的细胞因子模式。本试验拟通过研究33例慢性荨麻疹患者和20例健康对照者外周血PBMCs中T-bet和GATA-3表达水平及T-bet/GATA-3的比率变化对Th1/Th2分化失衡的调节作用,进一步从转录水平阐述慢性荨麻疹发病机制。探讨是否可以以T-bet/GATA-3为靶点,从细胞分化的源头上进行干预,以促使Th1/Th2处于动态平衡,为临床治疗慢性荨麻疹提供一个特异性更强,副作用更小的策略。方法:患者组33例患者均来自河北医科大学第二医院皮肤科门诊。患者组（慢性荨麻疹患者组）入选标准:（1）所有患者均为典型的慢性荨麻疹患者。（2）病程超过8周,每周发作不少于2次。（3）近2个月内未用皮质类固醇激素或免疫抑制剂等影响全身免疫功能的药物。1个月内未服用息斯敏（阿司咪唑）,1周内未使用抗组胺药者。（4）年龄18-60岁者。排除标准:（1）食物、药物、感染等致敏,临床上有明确原因者。（2）人工性荨麻疹、寒冷性荨麻疹、胆碱能性荨麻疹、日光性荨麻疹、压迫性荨麻疹及血管性水肿者。（3）孕妇或哺乳妇。（4）同时患有红斑狼疮、天疱疮、皮肌炎、风湿性关节炎等自身免疫性疾病以及肿瘤和其他严重系统疾病及其他过敏性疾病、皮肤病的患者。对照组:来自本院健康医护人员,共20例。均无过敏性疾患和自身免疫性疾病及家族史。经t检验,性别、年龄与病例组无显著差异。各抽取外周静脉血6ml ,各加乙二胺四乙酸（ethylenediamine-tetraacetic acid, EDTA） 0.8 ml抗凝,按照密度梯度离心法分离PBMCs、提取RNA,再应用逆转录多聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血单个核细胞T-bet和GATA-3 mRNA表达强度。具体操作严格按照各试剂说明书进行。统计学方法:采用SPSS14.0统计软件处理。采用卡方检验T-bet和GATA-3在慢性荨麻疹患者组与在健康正常对照组中的表达频率有无显著性差异。由于T-bet和GATA-3 mRNA在慢性荨麻疹患者组与在健康对照组中的表达强度的资料不满足正态分布和方差齐性条件,因此采用两个独立样本比较的Wilcoxon秩和检验来分析其有无统计学差异。P<0.05有统计学意义。结果:1.慢性荨麻疹患者组及对照组PBMCs中T-bet mRNA表达强度的中位数分别为18.70%,28.55%,患者组较对照组低表达。两组表达强度采用秩和检验,差异有统计学意义（P=0.000）;2.慢性荨麻疹患者组及对照组PBMCs中GATA-3mRNA表达强度的中位数分别为58.48%,22.47%,患者组明显呈高表达,差异有统计学意义（P=0.006）;3.慢性荨麻疹患者组及对照组患者组T-bet/GATA-3的比率较对照组明显降低,差异有统计学意义（P=0.025）;结论:1.慢性荨麻疹患者T-bet mRNA的表达强度较对照组减弱,而GATA-3 mRNA的表达强度较对照组显著增强;反映了慢性荨麻疹患者存在Th1细胞亚群低表达,Th2细胞亚群高表达,Th1/Th2失衡在慢性荨麻疹的发病中具有重要作用。2.T-bet / GATA-3 mRNA的比率较对照组显著降低。T-bet / GATA-3 mRNA比率的失衡是慢性荨麻疹发病机制的重要环节,如果通过调节T-bet /GATA-3来逆转Th1/Th2细胞失衡,从转录水平上对产生的炎性因子的总体环节进行控制,能更有效的干预慢性荨麻疹。
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