碗莲茎尖组织培养技术的初步研究

碗莲茎尖组织培养技术的初步研究

论文摘要

本研究以碗莲茎尖为外植体,探讨了不同生长调节物质在茎尖的诱导、增殖以及诱导生根过程中的作用,分析不同培养过程中主要影响因子及其有效浓度范围;同时以碗莲幼嫩叶片、藕节、叶柄基部为外植体,探讨其愈伤组织的诱导,意为碗莲的快速繁殖提供参考。实验结果如下:1)采用0.10%升汞和75%酒精为消毒剂对外植体进行处理时,茎尖的适宜消毒时间在10 min左右。2)最佳取材时间为10月份至12月份。3)碗莲启动培养的适宜培养基为:1.00 mg·L-1 6-BA +0.25 mg·L-1NAA +1.00 mg·L-1 GA3,启动率可达87.5%,主要影响因素是赤霉素NAA和GA3。4)固液培养状态:上层为5ml厚的MS + 1.0 mg·L-1 6-BA + 0.25 mg·L-1 NAA + 1.0 mg·L-1 GA3液态培养基,下层为1cm厚的MS + 1.0 mg·L-1 6-BA +0.25 mg·L-1 NAA + 1.0 mg·L-1 GA3固态培养基,更有利于芽诱导。5)适宜的增殖培养基为MS+2.0 mg·L-16-BA+ 0.25 mg·L-1 NAA。增殖系数最高为3.3,且芽苗叶柄较长,叶色浓绿,叶片伸展较多。6)四种碳源对增殖影响的大小排序为:葡萄糖>蔗糖>果糖>麦芽糖。葡萄糖效果最好。7)碗莲的继代时间以40 d为宜。8)生根的适宜培养基为:MS+1.00 m g·L-1 IBA,平均根数为11.68个,平均根长为42.00mm.。9) 4月初进行炼苗移栽,成活率可达100%。10)培养过程中污染的芽苗用75%酒精1min、0.1%HgCl210min灭菌效果最好。11)本试验用叶片柄基部、藕节做外植体进行诱导愈伤组织,但均未成功。

论文目录

  • 致谢
  • 摘要
  • 缩略词表
  • 1 文献综述
  • 1.1 碗莲的概述
  • 1.2 莲属植物组织培养技术的研究现状
  • 1.2.1 外植体
  • 1.2.2 取材时间
  • 1.2.3 培养基
  • 1.2.4 愈伤组织的诱导
  • 1.2.5 碳源
  • 1.2.6 培养条件
  • 1.2.7 其他影响因素
  • 1.3 问题与展望
  • 2 引言
  • 3 材料与方法
  • 3.1 试验材料
  • 3.2 试验设计
  • 3.2.1 技术路线
  • 3.2.2 外植体选择
  • 3.2.3 初代培养
  • 3.2.4 增殖培养
  • 3.2.5 生根培养
  • 3.2.6 组培苗的炼苗和移栽
  • 3.2.7 愈伤组织的诱导
  • 3.3 培养条件
  • 3.4 数据统计分析方法
  • 4 结果与分析
  • 4.1 外植体的消毒
  • 4.1.1 消毒时间对茎尖污染率的影响
  • 4.2 启动培养
  • 4.2.1 不同处理组合对碗莲茎尖诱导率的影响
  • 4.2.2 取材季节对碗莲茎尖诱导的影响
  • 4.2.3 培养基状态对碗莲茎尖诱导的影响
  • 4.2.4 不同处理方法对芽苗污染的防治
  • 4.3 增殖培养
  • 4.3.1 不同处理组合对试管苗增殖的影响
  • 4.3.2 6-BA 对碗莲增殖的影响
  • 4.3.3 不同碳源对碗莲增殖的影响
  • 4.3.4 继代周期对碗莲增殖的影响
  • 4.4 生根培养
  • 4.4.1 不同激素浓度配比对碗莲生根的影响
  • 4.4.2 不同浓度IBA 对碗莲生根的影响
  • 4.5 炼苗及移栽试验
  • 4.6 愈伤组织的诱导
  • 4.6.1 叶片基部对愈伤组织的诱导
  • 4.6.2 藕节对愈伤组织的诱导
  • 5 结论与讨论
  • 5.1 结论
  • 5.2 讨论
  • 5.2.1 外植体的影响
  • 5.2.2 植物生长调节剂的影响
  • 5.2.3 培养基状态的影响
  • 5.2.4 污染的防治
  • 5.2.5 糖的影响
  • 5.2.6 愈伤组织培养
  • 5.3 进一步研究内容
  • 参考文献
  • ABSTRACT
  • 附图
  • 相关论文文献

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