抗巨细胞病毒人源化抗体的研究

论文题目: 抗巨细胞病毒人源化抗体的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学

作者: 顾长国

导师: 李磊

关键词: 巨细胞病毒,糖蛋白,表位,人源化抗体,噬菌体展示技术

文献来源: 第三军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的意义人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)是Smith等在1956年首先从一名死亡婴儿的颌下腺中分离出来的一种病毒,1964年正式命名为巨细胞病毒。它属β亚科疱疹病毒,为双链DNA病毒,直径约180～250nm,是一种广泛传播的种属特异性病毒。人类感染该病毒后多呈亚临床感染或潜伏感染。在多数免疫功能正常个体中一般不产生明显的临床表现,然而却能持续排放病毒,造成广泛传播。但是,巨细胞病毒对免疫低下患者、育龄妇女及儿童危害极大。在免疫功能低下人群中,潜伏感染的病毒常会被激活,导致严重的甚至是致命性的后果。因此,关于巨细胞病毒的预防和治疗研究日益受到重视(1)。HCMV也同其它病毒一样,通过吸附、侵入细胞、复制及释放这一循环方式在人体内存活,能逃逸免疫识别并持续感染。病毒吸附到宿主细胞上是病毒感染和扩散的起点,阻断病毒的吸附对于防止病毒感染具有至关重要的意义。HCMV糖蛋白B(gB, glycoprotein B)为HCMV包膜中最丰富的糖蛋白,占包膜蛋白的50 %以上。gB是由跨膜蛋白gp55(glycoprotein 55)和表面蛋白gp116(glycoprotein 116)组成的Ⅰ型膜糖蛋白。gp55位于羧基端,携带占免疫优势的抗原决定簇,gp116位于氨基端,亦携带抗原决定簇,蛋白复合物总长为906个氨基酸。gB的主要致病机制在于提高病毒体穿透力,促进细胞间感染的扩散。研究表明, HCMV gB的中和抗体能阻断病毒感染。吸附抑制和感染力中和实验表明这些抗体能阻止病毒体向细胞穿透。电镜分析显示,抗体能阻断感染的扩散,抗体中和的HCMV病毒体滞留在细胞表面,细胞内的病毒颗粒减少。因此gB是一个非常重要的HCMV治疗靶标。目前HCMVgB抗原性的研究已较为清楚,已发现的三个线性抗体结合位点中,其中两个是病毒中和抗体的靶位。AD1是gB中首要的抗体结合位点,该抗原决定簇由位于552-635氨基酸间的84个氨基酸组成。HCMV感染的病人血清中gB特异性抗体反应中50 %以上直接针对AD1。gB的第二重要的抗体结合位点为AD2,该抗原决定簇由位于50-86氨基酸间的37个氨基酸组成。HCMV感染的病人血清中gB特异性抗体反应中30 %以上针对AD2 (2,3,4)。目前在临床上治疗CMV 的常用药物,如ganciclovir、valganciclovir、

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论文正文抗巨细胞病毒人源化抗体的研究

前言

实验一临床患者外周血标本收集

实验目的

实验材料

实验步骤

实验结果

讨论

实验二 RNA 提取、抗体可变区的扩增和连接以及抗体库的构建

实验目的

实验材料

实验步骤

实验结果

讨论

实验三巨细胞病毒糖蛋白 B 表位肽的选择

实验目的

实验材料

实验步骤

实验结果

讨论

实验四抗体库筛选及阳性克隆的初步鉴定

实验目的

实验材料

实验步骤

实验结果

讨论

全文讨论

参考文献

致谢

文献综述一

参考文献

文献综述二

参考文献

博士研究生期间文章发表和课题参与情况

附表一人巨细胞病毒基因组简要分析

发布时间: 2005-11-08

参考文献

[1].抗人纤维蛋白单链抗体的人源化及其链亲和素融合蛋白的研究[D]. 李文平.中国协和医科大学1999
[2].抗CD3人源化抗体的制备及生物学特性研究[D]. 李博华.第二军医大学2002
[3].新型血管生长因子抗体药物开发及抗肾肿瘤机制研究[D]. 余燕岚.浙江大学2009

抗巨细胞病毒人源化抗体的研究

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