论文摘要
涎腺腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma，ACC）是涎腺较为常见的恶性肿瘤，占全部涎腺恶性肿瘤的第二位。它具有一种重要的生物学行为——极易侵袭神经并沿神经生长。这种嗜神经侵袭的特性给临床上治疗ACC带来了很大的难度。但是，国内外学者对ACC嗜神经侵袭机制的认识尚不清楚；对可能与该机制有关的蛋白在ACC瘤细胞中的表达程度，以及这种表达程度与临床各因素相关性的全面研究还未见报道。目的：本实验观察GFAP、NT-3、Trk及NCAM四种蛋白在ACC中的染色程度与瘤细胞嗜神经侵袭之间的关系，试图从瘤细胞的雪旺细胞分化、神经营养因子及其受体的表达和神经细胞黏附分子的异常表达等四个方面探讨ACC嗜神经侵袭可能的生物学机制，分析四种蛋白在ACC瘤细胞的表达程度，以及这种表达程度与临床各因素的相关性，旨在为有效控制ACC嗜神经侵袭提供一定的理论依据。方法：选取1977年2月至2005年5月天津医科大学附属肿瘤医院头颈科收治的ACC患者94例，依据嗜神经侵袭的病理现象以及术前是否存在神经受累症状分为嗜神经侵袭组和无嗜神经侵袭组。免疫组化染色：调出ACC石蜡组织块94例，选正常腮腺及颌下腺组织各3例、粘液表皮样癌及腺泡细胞癌各10例、神经鞘膜瘤10例作对比研究。对ACC瘤细胞进行GFAP、NT-3、Trk及NCAM的免疫组化染色后，记录这些蛋白在瘤细胞中的染色强度，并收集患者各临床症状，录入数据库。统计学方法采用χ2检验和Logistic回归模型，对GFAP、NT-3、Trk及NCAM的免疫组化染色程度与ACC嗜神经侵袭的关系，以及它们与ACC临床各因素的相关性进行了首次全面的分析。结果：1．GFAP在ACC中呈局灶性强阳性染色，在神经鞘膜瘤中也呈同样的阳性染色，但在粘液表皮样癌中则呈阴性染色。GFAP在嗜神经侵袭组的染色程度高于无嗜神经侵袭组，两组的GFAP染色程度存在显著性差异（P=0.000）。另外，单因素分析得出GFAP在低分化（实体型）ACC中阳性染色程度高于高分化型（筛状型和管状型）ACC，两组的染色程度差异具有统计学意义（P=0.001）。2．NT-3在ACC中呈强阳性染色，而且在嗜神经侵袭组的染色程度显著高于无嗜神经侵袭组，两组的NT-3染色程度存在显著性差（P=0.000）。NT-3在神经鞘膜瘤染色也为阳性染色，但在腺泡细胞癌中则呈阴性染色。单因素分析得出NT-3的染色差异与ACC病理类型、复发、切缘癌浸润具有统计学意义（P＜0.05）。3．Trk在ACC中呈弱阳性染色，在神经鞘膜瘤也呈同样染色，但在腺泡细胞癌中呈阴性染色。Trk在嗜神经侵袭组的染色程度高于无嗜神经侵袭组，两组的Trk染色程度存在显著性差异（P=0.000）；单因素分析得出Trk的染色差异与ACC病理类型、复发具有统计学意义（P=0.049，P=0.011）。4．NCAM在ACC切片中呈现弱阳性染色，并在嗜神经侵袭组的染色程度显著低于无嗜神经侵袭组，两组的NCAM染色程度存在显著性差（P=0.000）。NCAM在神经鞘膜瘤中可见阳性染色，而在腺泡细胞癌中则呈阴性染色。单因素分析得出NCAM的染色差异与ACC病理类型具有统计学意义（P=0.042），管状型和筛状型NCAM染色强度高于实体型。5．多因素Logistic回归模型分析得到GFAP、NT-3、Trk染色程度与ACC嗜神经侵袭呈正相关，而NCAM染色程度与ACCP耆神经侵袭无相关性；GFAP染色程度与ACC病理分型呈负相关，而NT-3、Trk圾NCAM染色程度与ACC病理分型无相关性；NT-3、Trk的染色程度与ACC复发呈负相关，而GFAP和NCAM染色程度与ACC复发无相关性。结论：1 ACC嗜神经侵袭分子机制初步分析：1．1 ACC瘤细胞发生雪旺细胞分化，可能具有亲神经性、导致瘤细胞的嗜神经侵袭。1．2 ACC瘤细胞表达NT-3及其Trk受体，可能诱导神经生成、调节细胞增殖，促进瘤细胞向神经性迁徙。1．3 ACC瘤细胞低表达NCAM，瘤细胞间粘附性下降、细胞增殖性提高，可能出现较高的侵袭倾向。1．4多因素分析结果提示，瘤细胞表达的GFAP、NT-3、Trk可能共同参与了ACC嗜神经浸润的过程；低表达NACM对ACC的嗜神经侵袭可能起到了一定的促进作用。2 GFAP、NT-3、Trk及NCAM染色结果与ACC临床表现相关性初步分析：2．1单因素分析2．1．1瘤细胞GFAP、Trk的染色程度在分化差的瘤细胞中高于在分化好的瘤细胞中，这与实体型ACC具有较差的临床行为趋于一致。2．1．2 ACC瘤细胞高表达NT-3和Trk可能具备分化较差、侵袭性强和易于复发的潜在特性。2．1．3 ACC瘤细胞低表达NCAM可能导致细胞粘附力下降、增值性增强，表现出易于侵袭的特性。2．．2多因素分析分化差的瘤细胞高表达GFAP可能与实体型ACC具有较差的临床生物学行为有关；本研究结果尚不支持瘤细胞NT-3和Tk的高表达能够促进肿瘤的复发。
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