正常人及甲状腺相关眼病眼眶前脂肪细胞原代培养及鉴定

论文摘要

目的：建立正常人和甲状腺相关眼病（TAO）患者眼眶前脂肪细胞原代培养模型，以证实TAO患者眼眶中存在前脂肪细胞，为深入研究TAO的发病机制打下基础。方法：采用脂肪组织的组织块培养的方法培养正常人和TAO患者眼眶前脂肪细胞。正常人眶脂肪组织取自眼球摘除术的患者眼眶，TAO患者眶脂肪组织取自行开眶减压术的患者眼眶。通过对细胞形态学的观察，和MTT方法测定生长曲线，研究前脂肪细胞的生长特性。利用流式细胞术测定细胞表面抗原的表达鉴定培养的细胞。结果：成功培养了正常人和TAO患者眼眶前脂肪细胞，分离培养的正常人及TAO患者眼眶前脂肪细胞形态均一，增殖，分化旺盛。细胞为长梭形，形态与成纤维细胞类似。正常人和TAO患者眼眶前脂肪细胞相比，后者增殖更为旺盛，细胞形态基本一致。两种前脂肪细胞原代均生长较慢，2，3代后生长加快。原代培养3-5天后可见组织块周围有细胞游出，20天左右可以进行第一次传代。两种来源的前脂肪细胞生长曲线基本一致，均为第5天进入对数生长期，9天进入平台期。通过流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44和CD29的表达均为阳性，证实其为间充质干细胞来源的前脂肪细胞。在细胞学水平上初步证实了眼眶脂肪组织中存在前脂肪细胞。结论：正常人眼眶脂肪组织和TAO患者眼眶脂肪组织中存在前脂肪细胞。眼眶前脂肪细胞具有特征性的CD44／CD29表面抗原阳性表达。与正常人相比，TAO患者眼眶前脂肪细胞的增殖较旺盛，提示TAO患者眼眶内前脂肪细胞在TAO发病机制中起着重要的作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词说明
• 论文正文
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 组织来源
• 2.2 实验仪器与实验试剂
• 2.3 实验方法
• 第三章 结果
• 3.1 细胞形态学观察
• 3.2 细胞生长曲线的绘制
• 3.3 前脂肪细胞的鉴定
• 3.4 前脂肪细胞的诱导和分化
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢