枇杷叶药渣中乌索酸的提取分离及乌索酸标准样品的制备研究

论文摘要

本文首先以乙醇为溶剂,采用超声辅助提取法提取枇杷叶药渣中的乌索酸,然后用酸碱凝析法分离纯化提取物中的乌索酸,并进行了乌索酸标准样品的制备研究。研究表明:采用反相高压液相色谱方法准确测定枇杷叶药渣中乌索酸和齐墩果酸的含量,同分异构体乌索酸和齐墩果酸达基线分离。枇杷叶药渣中6种成分含量高于枇杷叶原料,枇杷叶药渣中主要成分乌索酸经水提工艺后无损耗,且除去了大量杂质,可明显降低有效成分提取的除杂量,简化提取工艺。通过单因素实验和正交实验的考察,确定了超声辅助提取枇杷叶药渣中乌索酸的各因素影响的主次为:乙醇体积分数>提取次数>提取时间>液固比。超声辅助提取枇杷叶药渣中乌索酸的最佳工艺条件为:乙醇体积分数为95%,提取次数为2次,液固比为10,提取时间每次40min,枇杷叶药渣中乌索酸提取率最高,为96.346%。且超声提取法与回流提取法相比,更加快速,节能省时,提取率较高。对酸碱凝析分离纯化乌索酸的方法进行了考察,并建立高效液相色谱法对产品进行了乌索酸的定量分析。采用活性炭脱色,利用不同pH条件下存在于提取液中各类物质的溶解性差异,有效地分离了乌索酸,再以无水乙醇重结晶纯化乌索酸,效果较好,所得结晶中乌索酸的含量达99.6%,得率为68.5%。整个分离纯化过仅使用单一的有机溶剂乙醇,使乌索酸分离纯化过程简便和低成本,保证了生产过程及产品的安全性。通过UV,IR,EI-MS,NMR等现代化检测手段对产品进行了结构鉴定,证实产品为乌索酸。按照《标准样品工作导则》的相关要求对乌索酸样品进行了稳定性、均匀性和定值研究,制备了乌索酸标准样品。与传统的对照品相比,标准样品具有准确性、可比性和可溯源性等优点。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 1.1 枇杷叶研究概况
• 1.1.1 枇杷叶的来源与鉴别
• 1.1.2 枇杷叶的化学成分
• 1.1.3 枇杷叶的药理作用
• 1.1.4 枇杷叶的开发应用
• 1.2 中药渣的研究现状
• 1.3 乌索酸的分析测定方法
• 1.3.1 分光光度法
• 1.3.2 薄层比色法
• 1.3.3 薄层扫描法
• 1.3.4 气相色谱法
• 1.3.5 高效液相色谱法
• 1.3.6 毛细管电泳法
• 1.3.7 液相色谱质谱联用法
• 1.4 乌索酸的提取与纯化工艺
• 1.4.1 乌索酸的主要提取方法
• 1.4.2 乌索酸的主要纯化方法
• 1.5 本论文的选题背景和主要研究内容
• 1.5.1 课题的提出
• 1.5.2 选题背景及研究意义
• 1.5.3 本论文研究的主要内容
• 第2章 实验内容
• 2.1 实验仪器、材料与试剂
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 材料、药品与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 检测方法
• 2.2.2 超声辅助提取枇杷叶药渣中乌索酸的研究
• 2.2.3 乌索酸分离纯化工艺研究
• 2.2.4 乌索酸标准样品的制备研究
• 第3章 结果与分析
• 3.1 枇杷叶及其药渣中乌索酸和齐墩果酸的含量比较
• 3.1.1 测定波长的选择和峰纯度检测
• 3.1.2 标准曲线的测定
• 3.1.3 精密度试验
• 3.1.4 提取时间的选择
• 3.1.5 重现性试验
• 3.1.6 回收率测定
• 3.1.7 枇杷叶及其药渣中乌索酸和齐墩果酸含量的测定
• 3.1.8 枇杷叶及其药渣中醇提成分比较
• 3.2 超声辅助提取枇杷叶药渣中乌索酸的工艺
• 3.2.1 单因素实验结果
• 3.2.2 正交实验结果
• 3.2.3 验证实验
• 3.2.4 超声提取法与回流提取法的比较
• 3.3 乌索酸的分离纯化工艺
• 3.3.1 超声提取乌索酸的放大实验
• 3.3.2 乌索酸分离纯化工艺流程
• 3.3.3 产品中乌索酸含量的测定
• 3.3.4 活性炭脱色
• 3.3.5 乌索酸的凝析分离
• 3.3.6 乌索酸的重结晶
• 3.4 乌索酸标准样品的制备
• 3.4.1 制备的目的和范围
• 3.4.2 分装和储存
• 3.4.3 样品基本信息
• 3.4.4 理化常数测定
• 3.4.5 Liebermann-Burchard定性反应
• 3.4.6 薄层色谱鉴别
• 3.4.7 结构确证
• 3.4.8 稳定性研究
• 3.4.9 均匀性研究
• 3.4.10 定值研究
• 第4章 结论与展望
• 4.1 结论
• 4.2 进一步工作的方向
• 致谢
• 参考文献
• 附录A 乌索酸相关图谱
• 攻读学位期间的研究成果