肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究

论文题目: 肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科学

作者: 唐琳

导师: 刘杞

关键词: 肝再生增强因子,干扰,肝癌,单克隆抗体,免疫抑制

文献来源: 重庆医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration, ALR)是Hagiya 等于 1994 年对肝刺激因子(Hepatic stimulatory substance,HSS) 的进一步研究时克隆的一种非特异性、具有热稳定性、不同于肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor , HGF)的促肝细胞再生因子。前期研究发现 ALR 在体外能刺激肝癌细胞株增殖,并呈剂量依赖性,并且将 ALR 表达质粒转入肝癌细胞中,发现 ALR 能明显促进肝癌细胞增殖和增强其抗损伤的能力,这些研究结果提示 ALR 与肝癌的发生、发展可能存在一定关系。我们新近对正常肝组织和肝癌组织的研究中发现正常肝细胞几乎不表达 ALR,而肝癌细胞却高表达 ALR,但是高表达的意义尚不明确。并且还发现 ALR 对 ConA 激活的单个核细胞具有很强的抑制作用。因此,推测 ALR 作为一种生长因子和免疫抑制因子可能在肝癌的自主性生长以及肝癌逃避机体免疫监视中发挥了重要的作用。但是其在肝癌发生、发展中的具体作用及地位尚不清楚。本研究拟在体内、外通过在核酸及蛋白质水平阻断内源性人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration, hALR)的表达和分泌后,观察肝癌的生长是否受影响;以及观察 rALR 对肿瘤细胞膜抗原激活的大鼠外周血单个核细胞增殖作用的影响,以明确 ALR 在肝癌发生、发展中的作用及地位。因此,本实验根据 hALR 的基因序列,设计、构建针对 hALR 基因编码区能够产生发夹结构的小干扰 RNA(small interfering RNA, siRNA)的载体质粒,将其转染 HepG2 细胞,观察对hALR 表达的影响,以及对体外培养的 HepG2 细胞和裸鼠移植瘤生长的影响;同时观察 anti-hALR McAb (anti-hALR monoclonal antibody)中和 hALR 后对 HepG2 细胞增殖和裸鼠移植瘤生长的抑制作用;用

论文目录:

符号说明

中文摘要

英文摘要

肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究

前言

第一章 anti-hALR McAb 对人肝癌生物学活性的影响

前言

第一节 免疫细胞化学及RT-PCR 证实hALR 在 HepG2 细胞中的表达

一、 实验材料

二、 实验方法

三、 实验结果

第二节 anti-hALR McAb 在体外对人肝癌细胞株HepG2 增殖活性的影响

一、 实验材料

二、 实验方法

三、 实验结果

第三节 anti-hALR McAb 在体内对裸鼠移植瘤生物学活性的影响

一、 实验材料

二、 实验方法

三、 实验结果

讨论

参考文献

第二章 hALR 的siRNA 对人肝癌生物学活性的影响

前言

第一节 人肝再生增强因子的siRNA 表达质粒的构建和鉴定

一、 实验材料

二、 实验方法

三、 实验结果

第二节 人肝再生增强因子的siRNA在体外对人肝癌细胞株HepG2增殖活性的影响

一、 实验材料

二、 实验方法

三、 实验结果

第三节 人肝再生增强因子的siRNA 在体内对裸鼠移植瘤生长的影响

一、 实验材料

二、 实验方法

三、 实验结果

讨论

参考文献

第三章 ALR 对肿瘤细胞膜抗原激活的大鼠外周血单个核细胞增殖的影响

前言

一、 实验材料

二、 实验方法

三、 实验结果

讨论

参考文献

全文小结

本课题的创新点

肝再生增强因子的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

发布时间: 2005-07-22

参考文献

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