论文摘要
目的：研究乳腺癌特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV自杀基因系统对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向杀伤作用。方法：PCR从质粒pORF-HSV-TK中扩增目的基因PI-TK,克隆到原核表达载体pET-28a（+）中,构建重组原核表达载体pET-28a （+）-PI-TK,转化宿主菌,经IPTG诱导表达PI-TK融合蛋白,利用His-Tag对其进行纯化。SDS-PAGE和Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白。将不同浓度的PI-TK融合蛋白与MDA-MB-231细胞共培养,联合更昔洛韦（ganciclovier, GCV）作用后,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,并用CCK-8及流式细胞仪技术检测其对细胞增殖的影响。结果：成功构建了重组原核表达载体pET-28a （+）-PI-TK,获得纯化的PI-TK融合蛋白。SDS-PAGE及Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白表达正确。CCK-8法及流式细胞仪技术检测显示,单独PI-TK融合蛋白不影响MDA-MB-231细胞的形态和增殖,但PI-TK融合蛋白联合GCV作用能剂量依赖性靶向抑制MDA-MB-231细胞的增殖,200μg/ml PI-TK+10mg/L GCV作用的抑制率达68.9±7.57%,IC50值为152.64μg/ml,对MDA-MB-435细胞无影响（P<0.05）结论：乳腺癌特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统可靶向杀伤MDA-MB-231细胞。
论文目录
相关论文文献
标签：乳腺癌特异性转导多肽论文; 乳腺癌论文; 自杀基因系统论文; 靶向性论文;