不同剂量氟对体外培养成骨细胞增殖活性与氧化应激水平的影响

不同剂量氟对体外培养成骨细胞增殖活性与氧化应激水平的影响

论文摘要

当前氟骨症发病机制的研究,迫切需要把氧化应激与成骨细胞增生、活化联系起来。本文通过体外培养成骨细胞并染氟,利用形态学、生物化学、RT-PCR和ELISA等方法,观察不同剂量氟对成骨细胞增殖活性与氧化应激水平的影响。实验结果,低剂量氟(0.5-2.0 mg F-/L)可显著提高成骨细胞增殖活性,培养上清液中OCN含量多有增高;脂质过氧化产物MDA上升,抗氧化酶GPX活性增高,SOD mRNA表达上调,显示程度较轻的氧化应激状态。大剂量氟(20.0 mg F-/L)作用下细胞增殖活性受抑制,OCN含量降低;MDA水平升高,GPX和SOD活性下降。低剂量氟所致成骨细胞活跃增生与氧化应激同时出现,提示程度较轻的氧化应激可能参与成骨细胞增生、活化的信号转导与调控。

论文目录

  • 提要
  • 英文缩写词
  • 前言
  • 文献回顾
  • 一、 关于氧化应激
  • 二、 慢性氟中毒与氧化应激
  • 材料与方法
  • 一、 成骨细胞培养方法的建立
  • 二、四唑盐比色实验(MTT)
  • 三、细胞氧化应激水平的检测
  • 四、ELISA 法测定培养细胞上清液中骨钙素
  • 五、染氟成骨细胞内 GSH 和 GSSG 水平的检测
  • 六、染氟72h成骨细胞CAT 、GPX、SOD的mRNA的表达
  • 七、统计学分析
  • 结果
  • 一、形态观察及鉴定
  • 二、 成骨细胞增殖活性的变化
  • 三、 氟处理成骨细胞氧化应激水平的变化
  • 四、染氟成骨细胞培养上清液中骨钙素分泌水平的变化
  • 五、染氟成骨细胞GSH、GSSG水平及GSH/GSSG比值的变化
  • 六、 染氟 72h 体外培养成骨细胞抗氧化酶 RT-PCR 产物凝胶电泳结果
  • 讨论
  • 一、 关于氟作用下成骨细胞的增殖活性
  • 二、关于氧化应激的作用
  • 结论
  • 参考文献
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 致谢
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